全自動熒光免疫分析儀工作原理
一、基本結構 (一)按照反應裝置的結構,自動生化分析儀主要分為流動式(FLOW SYSTEM)、分立式(DISCRETE SYSTEM)兩大類 1.流動式 指測定項目相同的各待測樣品與試劑混合后的化學反應在同一管道流動的過程中完成。這是第一代自動生化分析儀。 2.分立式 指各待測樣品與試劑混合后的化學反應都是在各自的反應杯中完成。其中有幾類分支。 (1)典型分立式自動生化分析儀。此型儀器應用最廣。 (2)離心式自動生化分析儀,每個待測樣品都是在離心力的作用下,在各自的反應槽內與試劑混合,完成化學反應并測定。由于混合,反應和檢測幾乎同時完成,它的分析效率較高。 3.袋式自動生化分析儀是以試劑袋來代替反應杯和比色杯,每個待測樣品在各自的試劑袋內反應并測定。 4.固相試劑自定生化分析儀(亦稱干化學式自動分析儀) 是將試劑固相于膠片或濾紙片等載體上,每個待測樣品滴加在相應試紙條上進行反應及測定。操作快捷、便于攜帶是它的優點。 (二)典......閱讀全文
免疫熒光
Immunofluorescence Technique?(Spector Lab)protocol for immunofluorescence on cells??Immunofluorescence Protocol?(Walter Steffen)Methanol fixationForma
熒光免疫技術
熒光免疫技術是標記免疫技術中發展最早的一種。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantibod
熒光免疫分析
免疫分析是基于蛋白抗原和抗體之間、或者小分子半抗原與抗體之間的特異反應的分析方法,是生物分析化學的重要內容之一。其中,用熒光物質作為標記的免疫分析即為熒光免疫分析。作為熒光標記物,應具有高的熒光強度,其發射的熒光與背景熒光有明顯區別;它與抗原或抗體的結合不破壞其免疫活性,標記過程要簡單、快速;水溶性
免疫熒光的常見熒光
1)FITC2)RB2003)TRITC4)鑭系:Eu、Tb5)PE6)其它常見熒光素的特性1)FITC:黃色結晶粉末,吸收光:490~495nm,發射光:520~530nm,明亮的黃綠色熒光。2)RB200:橘紅色粉末,吸收光570nm,發射光595~600nm,橘紅色熒光。3)TRITC:紫紅色
免疫熒光技術
基本原理 將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。試劑與儀器l??????????磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):
免疫熒光簡介
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。
間接免疫熒光
實驗方法原理固定細胞,順序加入一抗和二抗,通過 UV 光觀察。實驗材料細胞培養在蓋玻片 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?產生一抗種屬的二抗 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
間接免疫熒光
實驗方法原理固定細胞,順序加入一抗和二抗,通過 UV 光觀察。實驗材料細胞培養在蓋玻片產生一抗種屬的二抗豬血清或其他封閉劑D-PBSA試劑、試劑盒新鮮制備的固定劑用含10%的FBS培養液封固劑實驗步驟1. 用 D-PBSA 洗滌長有細胞的蓋玻片,置于合適的培養皿中。如 13 mm 蓋玻片可用24 孔
直接免疫熒光
中文名稱直接免疫熒光英文名稱direct immunofluorescence定 義直接用熒光標記抗體來研究特異性抗原在細胞內定位的方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
免疫熒光概述
免疫熒光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantibodytechnique)。 用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法;用
間接免疫熒光
方案16.11 間接免疫熒光實驗方法原理固定細胞,順序加入一抗和二抗,通過 UV 光觀察。實驗材料細胞培養在蓋玻片產生一抗種屬的二抗豬血清或其他封閉劑D-PBSA試劑、試劑盒新鮮制備的固定劑用含10%的FBS培養液封固劑實驗步驟1. 用 D-PBSA 洗滌長有細胞的蓋玻片,置于合適的培養皿中。如 1
免疫熒光技術
免疫熒光技術1)??直接法1.標本經固定后,PBS洗滌3×3分鐘。2.加熒光素標記的抗體,濕盒內37℃孵育50分鐘。3.PBS洗滌3×3分鐘。4.0.1%伊文氏蘭復染。5.PBS洗3次,蒸餾水洗2次,每次3分鐘,以除去NaCl結晶。6.緩沖甘油封片,鏡檢。?2)??間接法1.標本固定后,PBS洗滌3
免疫熒光技術
實驗方法原理 直接法是以熒光素標記的抗體直接與標本內的抗原反應,形成抗原—熒光素標記抗體復合物。根據熒光的分布位置及強度,確定相應抗原的存在與否及其所在部位。實驗材料 抗體試劑、試劑盒 PBS伊文氏蘭儀器、耗材 顯微鏡實驗步驟 1. 標本經固定后,PBS洗滌3×3 分鐘;2. 加熒光素標記的抗體,濕
免疫熒光原理
免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。
免疫熒光技術
免疫熒光技術是標記免疫技術中發展最早的一種.它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記抗體獲得成功。經過幾十年的發展,該技術已相當成熟。 用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的
免疫熒光原理
免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。 直接法 將
熒光免疫技術介紹
熒光免疫技術是標記免疫技術中發展最早的一種。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantib
間接免疫熒光
中文名稱間接免疫熒光英文名稱indirect immunofluorescence定 義直接免疫熒光技術的改進。待檢細胞首先用未標記的抗體處理,使之與特異的抗原形成復合物,然后再用抗抗體的熒光標記抗體著色,即可檢測出特異抗原在細胞中的存在部位,具有熒光增強效應。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞
熒光免疫分析原理
熒光免疫檢測技術具有專一性強、靈敏度高、實用性好等優點,因此它被用于測量含量很低的生物活性化合物,例如蛋白質(酶、接受體、抗體)、激素(甾族化合物、甲狀腺激素、酞激素)、藥物及微生物等 作為免疫分析法的一種,FIA同樣存在兩種模式,即競爭型和夾心型。其中競爭型(以標記抗原的競爭型為例)的測定原
關于免疫熒光技術—熒光免疫測定的基本介紹
熒光免疫測定與酶免疫測定一樣,可分均相和非均相法。均相法常利用熒光的某些特性,如熒光的激發、吸收、猝滅等設計試驗,無需作結合的與游離的標記物分離。雙標記法即為均相熒光免疫測定的一種類型,檢測試劑為FITC標記的抗原和羅丹明標記的抗體,當兩種標記物標記的抗原和抗體特異性結合后使兩種熒光素靠近,由于
病毒免疫熒光實驗_?熒光抗體染色
實驗材料細胞小玻片標本試劑、試劑盒熒光抗體實驗步驟熒光抗體染色按不同反應機制,可有以下幾種:1.直接法 用已知特異性病毒抗體與熒光素結合,制成熒光特異性抗體,直接與細胞或組織中相應病毒抗原結合,在熒光顯微鏡下即可見病毒或病毒抗原存在部位呈現特異性熒光。此法特異簡便,但一種熒光抗體只能檢查一種抗原,特
熒光免疫技術熒光的基本知識
熒光的基本知識:1.熒光偏振。2.熒光壽命:熒光物質被激發后產生的熒光衰減到一定程度時所用的時間稱為熒光壽命。3.熒光:某些物質受到一定波長光的激發后,在極短時間內發射出的波長大于激發光波長的光。4.激發光譜:固定檢測發射光熒光波長,用不同波長的激發光照射樣品所記錄到的相應的熒光發射強度譜圖。5.發
熒光免疫技術熒光的基本知識
熒光的基本知識:1.熒光偏振。2.熒光壽命:熒光物質被激發后產生的熒光衰減到一定程度時所用的時間稱為熒光壽命。3.熒光:某些物質受到一定波長光的激發后,在極短時間內發射出的波長大于激發光波長的光。4.激發光譜:固定檢測發射光熒光波長,用不同波長的激發光照射樣品所記錄到的相應的熒光發射強度譜圖。5.發
熒光免疫技術的熒光物質有哪些?
(一)熒光色素1.異硫氰酸熒光素(FITC):呈現明亮的黃綠色熒光。2.四乙基羅丹明(RB200):呈橘紅色熒光。3.四甲基異硫氰酸羅丹明(TRITC):呈橙紅色熒光。4.藻紅蛋白(R-RE):呈明亮的橙色熒光。(二)其他熒光物質1.鑭系螯合物:其中以Eu3+應用最廣。Eu3+螯合物的激發光波長范圍
熒光免疫技術的熒光物質有哪些?
(一)熒光色素1.異硫氰酸熒光素(FITC):呈現明亮的黃綠色熒光。2.四乙基羅丹明(RB200):呈橘紅色熒光。3.四甲基異硫氰酸羅丹明(TRITC):呈橙紅色熒光。4.藻紅蛋白(R-RE):呈明亮的橙色熒光。(二)其他熒光物質1.鑭系螯合物:其中以Eu3+應用最廣。Eu3+螯合物的激發光波長范圍
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同:直接免疫熒光的實驗方案通常較短,因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少,更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗,增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出,
自動化熒光免疫分析系統—熒光偏振免疫分析儀
熒光偏振免疫分析儀 熒光偏振免疫測定(FPIA)為一種均相熒光免疫測定方法,熒光強度與熒光標志物質在溶液中旋轉的速度與分子大小成反比,分子大,轉動速度慢,熒光強度大;分子小,轉動速度快,熒光強度小。常采用抗原抗體競爭反應原理,適用于小分子半抗原(如藥物濃度)的檢測。 第四節 自動化酶聯免疫
間接免疫熒光和直接免疫熒光染色方法的異同
免疫熒光細胞化學方法的原理是根據抗原抗體反應的規律,把已知的抗原或抗體標記上熒光素,制成熒光抗原或抗體,然后以它作為探針來檢測組織或細胞內的相應物質。方法具體種類有直接法、間接法、夾心法和補體法等。在熒光顯微鏡下,根據其形成復合物所發的熒光,來確定判斷檢測物的來源、性質和部位。?1、直接法:這是最早
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同:直接免疫熒光的實驗方案通常較短,因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少,更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗,增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出,
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同:直接免疫熒光的實驗方案通常較短,因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少,更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗,增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出,