細胞核連綴分析實驗_從組織中制備細胞核
實驗材料動物組織試劑、試劑盒PBS蔗糖儀器、耗材電動勻漿器特氟隆研杵實驗步驟一、用超速離心法從組織中分離細胞核1. 切下動物組織，放入置于冰上的平皿中，用冰冷的 PBS 沖洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液，用剪刀或剃須刀片將組織切碎，轉入一個干凈試管中，加蔗糖Ⅰ溶液至終體積為每克組織 10 ml。3. 用特氟隆研杵在電動勻漿器中將細胞勻漿裂解。4. 于 1000 g 低溫離心 5 分鐘收集細胞核。5. 用 2 ml 蔗糖Ⅱ，用移液管猛力吹打重懸沉淀，然后加蔗糖Ⅱ至每克組織 10 ml。6. 離心：(1) 取一個 SW41 離心管（Beckman)，加入 2 ml 蔗糖Ⅱ，再將上一步所得懸液加于其上。(2) 于 20000 r/min，4℃ 用 SW41 轉頭離心 1 小時，沉淀即是去除了膜成分與細胞碎片的干凈的細胞核。7. 吸去上層的細胞碎片和透明的墊層，一定要吸徹底，以免沉淀受到任何細胞碎片的污染。然后用干凈的 Kimwipe 吸水......閱讀全文
細胞核連綴分析實驗_從組織中制備細胞核
實驗材料動物組織試劑、試劑盒PBS蔗糖儀器、耗材電動勻漿器特氟隆研杵實驗步驟一、用超速離心法從組織中分離細胞核1. 切下動物組織，放入置于冰上的平皿中，用冰冷的 PBS 沖洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液，用剪刀或剃須刀片將組織切碎，轉入一個干凈試管中，加蔗糖Ⅰ溶液至終體積為每克組織 10 ml。3. 用
細胞核連綴分析實驗_體外細胞核連綴反應
實驗材料組織試劑、試劑盒EDTASDS蛋白酶 K儀器、耗材玻璃試管實驗步驟1. 融解從 1 g 組織或 5 瓶培養皿細胞制備、凍存于 NSB 中的細胞核。1000 g 離心 5 分鐘，去上清，用 200 μl HRB 輕輕吹打重懸。2. 將懸液轉至一個帶有抗酚螺帽的硅化玻璃試管，37℃ 水浴 5 到
細胞核連綴分析實驗
從組織中制備細胞核體外細胞核連綴反應體外細胞核連綴反應產物的分析實驗材料動物組織 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒PBS ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
細胞核連綴分析實驗
從組織中制備細胞核 體外細胞核連綴反應 體外細胞核連綴反應產物的分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 動物組織
細胞核連綴分析實驗_體外細胞核連綴反應產物的分析
實驗材料環狀質粒 DNA試劑、試劑盒氫氧化鈉SSPE預雜交緩沖液儀器、耗材狹線印跡裝置實驗步驟一、狹線印跡的制備1. 如果用的是環狀質粒 DNA，用適當的限制酶使 DNA 探針線性化。每個狹線需用 5 μg DNA。2. 往線性 DNA 溶液中加氫氧化鈉至 0.1 mol/L，混勻，室溫放置 30
從肝臟組織中制備細胞核實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 大鼠 試劑、試劑盒 裂解緩沖液 濃蔗糖溶液
從肝臟組織中制備細胞核實驗
實驗材料大鼠試劑、試劑盒裂解緩沖液濃蔗糖溶液儀器、耗材超速離心機組織研磨器實驗步驟1. 配制裂解緩沖液和濃蔗糖溶液（PMSF 在使用前添加），冰上放置。裂解緩沖液：0.25 mol/L 蔗糖網織紅細胞標準緩沖液（RSB）0.25 mol/L 蔗糖（超級純）10 mmol/ Tris-HCl (pH7
從培養細胞或組織中制備細胞核基質/中間纖維骨架結...
從培養細胞或組織中制備細胞核基質/中間纖維骨架結構實驗實驗材料 細胞試劑、試劑盒 Tritron X-100抽提緩沖液儀器、耗材 電子顯微鏡實驗步驟 1. 在 4℃ 用 PBS 洗細胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的細胞骨架緩沖液抽提細胞 3 到 5 分鐘。直到消
從培養細胞或組織中制備細胞核基質/中間纖維骨架結構
從培養細胞中制備細胞核基質/中間纖維骨架結構 從組織中分離制備細胞核基質/中間纖維支架結構 細胞核的預先分離 ? ? ? ? ? ? 實驗材料
從培養細胞或組織中制備細胞核基質/中間纖維骨架結構
從培養細胞中制備細胞核基質/中間纖維骨架結構從組織中分離制備細胞核基質/中間纖維支架結構細胞核的預先分離實驗材料細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒Tritron X-100 ? ? ? ? ? ? ?
從組織中分離制備細胞核基質/中間纖維支架結構
實驗材料新鮮組織試劑、試劑盒NaCl 緩沖液細胞骨架緩沖液儀器、耗材Teflon 研杵Doume 勻漿器實驗步驟1. 在 4℃ 將新鮮組織切成 1 mm3?左右的小塊。在 4℃，用 Teflon 研杵和 Doume 勻漿器在含 0.5% Tritron X-100 的細胞骨架緩沖液中對切碎的組織進行
從培養細胞中制備細胞核基質/中間纖維骨架結構
實驗材料細胞試劑、試劑盒Tritron X-100抽提緩沖液儀器、耗材電子顯微鏡實驗步驟1. 在 4℃ 用 PBS 洗細胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的細胞骨架緩沖液抽提細胞 3 到 5 分鐘。直到消化步驟，每 107?個細胞最少要用 1 ml 緩沖液，以后減半
酵母細胞核制備
實驗材料?酵母菌試劑、試劑盒?細胞核緩沖液Ficoll緩沖液儀器、耗材?勻漿機實驗步驟 1.? 將酵母菌接種于YPD培養基（100 ml 到20 L），劇烈搖動或強制通氣條件下培養至對數中期（OD600≈1~5）。培養物在預稱重的離心瓶中于4℃， 1 500 g 離心5 min。?2.? 確定酵母細
原代細胞核仁的制備
試劑和器材：?1.?懸浮緩沖液：0.34mol/L蔗糖、0.05mmol/L MgCl2、10mmol/L Tris-HCl，pH7.5；2.?密度阻滯溶液：0.88mol/L蔗糖、0.05mmol/L MgCl2、10mmol/L Tris-HCl，pH7.5；3.?按要求向溶液中加入蛋白酶抑制劑
滲透溶脹法制備細胞核實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 HeLa 細胞 試劑、試劑盒 Earle’s 平衡鹽溶液 RSB
滲透溶脹法制備細胞核實驗
實驗材料HeLa 細胞試劑、試劑盒Earle’s 平衡鹽溶液RSB儀器、耗材玻璃蓋玻片實驗步驟1. 懸浮培養出 HeLa 細胞，600 g 離心 5 分鐘收集細胞。2. 沉淀細胞用 5 倍體積 4℃ 預冷的 Earle’s 平衡鹽溶液重新懸浮。3. 重懸浮的細胞在 4℃，600 g 離心 5 分鐘，
酵母細胞核制備實驗——差速離心法
細胞核（nucleus）是細胞中最大、最重要的細胞器（初中老教材認為細胞核不是細胞器，大學細胞生物學則認為是細胞器，這里以大學教材為準），它是由核膜（nuclear membrane）、核骨架（nuclear scaffold）、核仁(nucleolus) 幾部分組成。實驗材料酵母菌試劑、試劑盒細胞
HeLa－細胞核提取物的制備實驗
試劑、試劑盒?甘油液氮MgCl2?6 H2O硫酸銨HeLa 細胞磷酸緩沖鹽溶液（PBS) 緩沖液 G緩沖液 H 緩沖液 DTM 緩沖液+0.1 ml L KCl實驗步驟 材料HeLa 細胞（培養和保存條件見下文。我們也成功地使用過 CellexBiosciences 公司制備并冷凍的 HeLa 細胞
滲透溶脹法制備細胞核實驗
用滲透溶脹法從HeLa細胞懸浮培養物中制備細胞核實驗材料HeLa 細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒Earle’s 平衡鹽溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
HeLa－細胞核提取物的制備實驗
在本實驗中，基本上是按Dignam等（1983)所述的方法從HeLa細胞制備核提取物的。這一基本方法大概是制備體外轉錄和DNA結合實驗用因子的最常用的方法。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南，作者：朱厚礎。試劑、試劑盒甘油液氮MgCl2?6 H2O硫酸銨HeLa 細胞磷酸緩沖鹽溶液（PBS)緩沖液
滲透溶脹法制備細胞核實驗
實驗材料 HeLa 細胞試劑、試劑盒 Earle’s 平衡鹽溶液RSB儀器、耗材 玻璃蓋玻片實驗步驟 1. 懸浮培養出 HeLa 細胞，600 g 離心 5 分鐘收集細胞。2. 沉淀細胞用 5 倍體積 4℃ 預冷的 Earle’s 平衡鹽溶液重新懸浮。3. 重懸浮的細胞在 4℃，600 g 離心 5
原代細胞核基質的制備
試劑和器材：?1.?硫酸銨（含10mmol/L Tris-HCl，（pH7.4）及0.2mmol/L MgCl2的1mol/L與0.2mol/L硫酸銨溶液）；2.?氯化鎂（1mol/L儲存液）；3.?苯甲基磺酰氟（PMSF）（無水乙醇配制的1mol/L儲存液）；4.?純化的細胞核保存于含0.25mo
利用－Trizol－從植物組織中制備－RNA－實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 植物組織 試劑、試劑盒 Trizol 氯仿 異丙醇 乙醇
利用－Trizol－從植物組織中制備－RNA－實驗
下述方案是經修改過的 Trizol 方案，用于從植物組織中分離 RNA，其中增加了一個高鹽異丙酵沉淀步驟，以選擇性地沉淀 RNA，而將多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗材料植物組織試劑、試劑盒Trizol氯仿異丙醇乙醇DEPC處理過的水液態
利用－Trizol－從植物組織中制備－RNA－實驗
實驗材料 植物組織試劑、試劑盒 Trizol氯仿異丙醇乙醇DEPC處理過的水液態N2NaCl檸檬酸鈉儀器、耗材 轉子-定子均化器研缽和杵圓錐形管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑Trizol(Invitrogen)氯仿異丙醇乙醇，70%，用焦碳酸二乙酯（DEPC) 處理過的水配制DEPC 處
LSCM組織切片的細胞核標記
組織切片的細胞核標記目前仍然采用?DAPI(4，6-聯脒-2-苯基吲哚，ex 359 nm / em 461 nm)，其特點是專一性強、靈敏度高、穩定性好、毒性小，且可被405nm激光器有效地激發，獲取明亮的核標記熒光圖像。PI(碘化丙啶?ex 536nm / em 617nm)也可以用于核標記，因
從石蠟包埋固定的組織中制備－RNA－實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 石蠟包埋的組織樣品 試劑、試劑盒 甲酰胺 消化緩沖液 乙醇 肝糖
從石蠟包埋固定的組織中制備－RNA－實驗
實驗材料 石蠟包埋的組織樣品試劑、試劑盒 甲酰胺消化緩沖液乙醇肝糖異丙醇苯酚 氯仿蛋白酶 KTrizol二甲苯儀器、耗材 微量離心管恒溫箱實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑去離子化的甲酰胺焦碳酸二乙酯（DEPC) 處理過的水消化緩沖液（lmol/L 異硫氰酸胍,25 mmol/Lβ-巰基乙醇
從石蠟包埋固定的組織中制備－RNA－實驗
該方案是由 Godfrey 等改進 Fisher 的方案發表的。此前已有從固定組織中純化 RNA 的方案發表。Ambion 和 Roche 發明了從石蠟包埋的組織中純化 RNA 的商品化試劑盒。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗材料石蠟包埋的組織樣品試劑、試劑盒甲酰胺
活化劑裂解方法制備細胞核實驗
用活化劑裂解方法從懸浮培養的HeLa細胞中制備細胞核實驗材料HeLa 細胞試劑、試劑盒TM-2 緩沖液儀器、耗材塑料離心瓶Corex 管實驗步驟1. 轉瓶培養 4 升 HeLa 細胞，便細胞濃度達到 1.0x106?細胞/ml。2. 細胞在 1 L 的塑料離心瓶中，用 Sorvall 的 RC-3B