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  • 核酸酶保護實驗

    實驗材料核酸酶試劑、試劑盒ATPCTPGTPMUTPEDTANaCl甲酰胺Tris-HClRNase ARNase T1RNasinDTTUTPT7RNA聚合酶DNaseⅠ飽和酚氯仿酵母tRNANaAc無水乙醇SDS蛋白酶K異丙醇丙烯酰胺亞甲雙丙烯酰胺TBE尿素過硫酸胺TEMED儀器、耗材低溫離心機恒溫培養箱恒溫水浴鍋電泳儀保鮮膜實驗步驟1. 在一個高壓過的微量離心管中建立20 μl 的反應復合物如下:(1)4 μl 5×轉錄緩沖液(2)1 μl 200 mmol/的3NTP混合液(3)10 μl [α-32P]CTP(4)1 μl 胎盤核酸酶抑制劑(5)1 μl 1 mg/ml 模板DNA(6)1 μl 噬菌體RNA聚合酶(7)SP6 RNA聚合酶反應時在40℃保溫30~60 min。采用T7或T3 RNA聚合酶則在37℃溫育。 2.......閱讀全文

    核酸酶保護實驗

    實驗材料 核酸酶試劑、試劑盒 ATPCTPGTPMUTPEDTANaCl甲酰胺Tris-HClRNase ARNase T1RNasinDTTUTPT7RNA聚合酶DNaseⅠ飽和酚氯仿酵母tRNANaAc無水乙醇SDS蛋白酶K異丙醇丙烯酰胺亞甲雙丙烯酰胺TBE尿素過硫酸胺TEMED儀器、耗材 低溫

    核酸酶保護實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗材料 核酸酶 試劑、試劑盒 ATP CTP GTP MUTP

    核酸酶保護實驗

    實驗材料核酸酶試劑、試劑盒ATPCTPGTPMUTPEDTANaCl甲酰胺Tris-HClRNase ARNase T1RNasinDTTUTPT7RNA聚合酶DNaseⅠ飽和酚氯仿酵母tRNANaAc無水乙醇SDS蛋白酶K異丙醇丙烯酰胺亞甲雙丙烯酰胺TBE尿素過硫酸胺TEMED儀器、耗材低溫離心機

    核糖核酸酶保護實驗的定義

      核糖核酸酶保護實驗(Ribonuclease protection assay,RPA)是近十年發展起來的一種全新的mRNA定量分析方法。

    核糖核酸酶保護實驗的原理

      其基本原理是將標記的特異RNA探針(32P或生物素)與待測的RNA樣品液相雜交,標記的特異RNA探針按堿基互補的原則與目的基因特異性結合,形成雙鏈RNA;未結合的單鏈RNA經RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸,而待測目的基因與特異RNA探針結合后形成雙鏈RNA,免受RNA酶的消化,故該方

    核糖核酸酶保護實驗的基本原理

    核糖核酸酶保護實驗(Ribonuclease protection assay,RPA)是近十年發展起來的一種全新的mRNA定量分析方法。其基本原理是將標記的特異RNA探針(32P或生物素)與待測的RNA樣品液相雜交,標記的特異RNA探針按堿基互補的原則與目的基因特異性結合,形成雙鏈RNA;未結合的

    核糖核酸酶保護分析

    一、體外轉錄在無菌1.5 ml 微型離心管中,結合以下內容:4 ul 5倍轉錄緩沖液2 ul 0.1 M DTT4 ul 2.5 MM NTP(A,C,G)0.8 ul RNA酶抑制劑(25 U/ul)RNA酶抑制劑(Promega)中100 UM冷UTP1 ul/ug ?UL線性DNA模板5 ul

    核酸酶保護分析的方法特點和應用

    中文名稱核酸酶保護分析英文名稱nuclease protection assay定  義當核酸(DNA、RNA)中某段序列能與其他核酸(DNA、RNA)形成互補結合或與某種蛋白特異結合后,核酸酶(如S1核酸酶)就只能降解反應系統中未結合的核酸,留下被結合的核酸段落可以定性或定量檢測出來的方法。此法可

    核糖核酸酶保護(用核糖核酸酶和放射性標記RNA探針)

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 核糖核酸酶保護分析用于度量特異性 mRNA 的豐度以及為它們的拓撲異構特征作圖。這種方法包括測試 RNA 與互補的放射標記的 RNA 探針(核糖探針)雜交,然后未雜交的序列被一種或幾種單鏈特異性的核糖核酸酶裂解。

    核糖核酸酶保護(用核糖核酸酶和放射性標記的RNA探針...

    核糖核酸酶保護(用核糖核酸酶和放射性標記的RNA探針對RNA作圖)實驗方法原理 核糖核酸酶保護分析用于度量特異性 mRNA 的豐度以及為它們的拓撲異構特征作圖。這種方法包括測試 RNA 與互補的放射標記的 RNA 探針(核糖探針)雜交,然后未雜交的序列被一種或幾種單鏈特異性的核糖核酸酶裂解。實驗材料

    多探針核糖核酸酶保護試驗同時測定-mRNA-表達

    實驗步驟?基 本 方 案 多 探 針 核 糖 核 酸 酶 保 護 試 驗材 料R i b o Q u a n t 體 外 轉 錄 試 劑(B D Pharmingen) 包含下面:40U /ul RNasinG A C U 庫(2.75m m o l / L G T P /2.75m m o l /

    核糖核酸酶(胰腺)的測定實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 RNaseⅠ分解 RNA 形成 3'-磷酸單核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸,以 Cp 或 Up 結尾形成一個 2'

    核糖核酸酶(胰腺)的測定實驗

    實驗方法原理RNaseⅠ分解 RNA 形成 3'-磷酸單核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸,以 Cp 或 Up 結尾形成一個 2',3'-環狀磷酸中間體。實驗材料酶樣品試劑、試劑盒乙酸緩沖液乙酸鈾酰-高氯溶液RNA(酵母)溶液核酸核酸酶儀器、耗材分光光度計實驗步驟實驗所需「

    噬菌體竟然可以保護自身基因組免受CRISPR核酸酶切割

      細菌和感染它們的病毒正在進行一場與生命本身一樣古老的分子軍備競賽。進化為細菌配備了一系列可靶向并破壞病毒DNA的免疫酶,包括CRISPR-Cas系統。但是,殺死細菌的病毒(也稱為噬菌體)已設計出了它們自己的工具來幫助它們戰勝這些最強大的細菌防御。  如今,在一項新的研究中,來自美國加州大學舊金山

    交叉保護中和實驗

    實驗概要動物受到病毒感染后,體內產生特異性中和抗體,并與相應的病毒粒子呈現特異性結合,因而阻止病毒對敏感細胞的吸附,或抑制其侵入,使病毒失去感染能力。中和試驗 ?(Neutralization ?Test)是以測定病毒的感染力為基礎,以比較病毒受免疫血清中和后的殘存感染力為依據,來判定免疫血清中和病

    交叉保護中和實驗

    實驗材料 毒株標準血清試劑、試劑盒 牛血清Hanks 氏液瓊脂糖儀器、耗材 水浴鍋24孔板孵箱實驗步驟 一、試驗目的血清分型。二、實驗材料準備?1. ?標本出血熱恢復期病人血清2. ?材料?(1) 毒株 漢灘病毒標準株 76-118,漢城病毒標準株 Seoul;?(2)標準血清 兔抗漢灘病毒、漢城病

    交叉保護中和實驗

    動物受到病毒感染后,體內產生特異性中和抗體,并與相應的病毒粒子呈現特異性結合,因而阻止病毒對敏感細胞的吸附,或抑制其侵入,使病毒失去感染能力。中和試驗 (Neutralization Test)是以測定病毒的感染力為基礎,以比較病毒受免疫血清中和后的殘存感染力為依據,來判定免疫血清中和病毒的能力。實

    交叉保護中和實驗

    試驗目的?血清分型標本?出血熱恢復期病人血清材料1、 毒株?漢灘病毒標準株 76-118,漢城病毒標準株 Seoul;2、標準血清?兔抗漢灘病毒、漢城病毒血清;3、空斑減少中和試驗常用試劑。步驟1、將待檢血清用牛血清Hanks 氏液稀釋成1:10,56℃滅活30分鐘;2、進一步2倍稀釋血清成1:20

    Nature首次揭示噬菌體保護自身基因組免受CRISPR核酸酶切割

      細菌和感染它們的病毒正在進行一場與生命本身一樣古老的分子軍備競賽。進化為細菌配備了一系列可靶向并破壞病毒DNA的免疫酶,包括CRISPR-Cas系統。但是,殺死細菌的病毒(也稱為噬菌體)已設計出了它們自己的工具來幫助它們戰勝這些最強大的細菌防御。  如今,在一項新的研究中,來自美國加州大學舊金山

    實驗室塑料制品中核糖核酸酶和去氧核糖核酸酶的去除

    通常RNA提取和RT-PCR實驗操作失敗的原因是由于器皿被核糖核酸酶(RNase)和去氧核糖核酸酶(DNase)污染。實驗中應盡量使用不含 RNase的一次性塑料制品。重復使用的塑料制品可用0.1%二乙基焦碳酸(DEPC)水溶液于37℃浸泡2小時,再用去離子水沖洗,然后放入高壓蒸汽滅菌器中,高壓滅菌

    實驗室常用塑料制品中核酸酶的去除

    塑料制品中核糖核酸酶和去氧核糖核酸酶的去除通常RNA提取和RT-PCR實驗操作失敗的原因是由于器皿被核糖核酸酶(RNase)和去氧核糖核酸酶(DNase)污染。實驗中應盡量使用不含 RNase的一次性塑料制品。重復使用的塑料制品可用0.1%二乙基焦碳酸(DEPC)水溶液于37℃浸泡2小時,再用去離子

    什么是核酸酶?

      核酸酶有DNase、RNase、核酸酶S1等,可水解相應的DNA和RNA,核酸酶S1可降解單鏈DNA和RNA,用量增大也可降解雙鏈核酸。它可用于切去ds-cDNA合成中產生的發夾環。  末端轉移酶在Mg 存在下,選擇3′-OH端單鏈DNA為引物加成核苷酸,在Co 存在下,選擇3′-OH端雙鏈DN

    實驗室的防腐保護

    化學試劑對于實驗室裝備具有持久的侵蝕作用,尤以貯存酸或堿的金屬櫥柜為甚。為此,德國閉鎖系統生產商Burg公司研發了一種新型表面材料,用以保護閉鎖系統抵御化學試劑的侵蝕。 德國實驗室櫥柜商霍恩洛爾公司已不再生產用于保護實驗室櫥柜閉鎖系統的塑料罩。原因是通常在銷售兩年之后用戶就會登門投訴,對質

    繼電保護實驗儀分類

      市面上出現的繼電保護實驗儀分為兩大類,一是常規型模擬式繼電保護實驗儀,第二類則是應用了微處理器等先進技術的智能型繼電保護實驗儀。智能型繼電保護實驗儀的智能程度高低不等,分為單片機型和微機型。由于微機型在智能度、性能、價格等主要參考點快速提升,單片機型被迫逐漸淡出市場或與常規型合二為一,代表產品為

    限制性內切核酸酶介導的差異顯示(RMDD)實驗

    實驗方法原理 實驗材料 總 RNA試劑、試劑盒 無 RNase 的 DTTSuperScript 緩沖液無 RNase 的標準 dNTPRNase 抑制劑第二鏈緩沖液 IIRNase HTE 緩沖液平衡的酚氯仿糖原乙醇通用緩沖液乙酸鈉ATPTE 緩沖液PCR 緩沖液MgCl2RediLoad甲酰胺緩

    限制性內切核酸酶介導的差異顯示(RMDD)實驗

    基本方案 RMDD 文庫的準備和兩輪擴增 備擇方案 兩階段 PCR 擴增 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料

    分析繼電保護實驗儀測試實驗過程

      測試實驗過程主要分為三個步驟.  1.選擇測試功能。首先根據試驗目的選擇相應的被測繼電保護裝置以及相對應的試驗模塊(通過標號1, 3, 4和6等人機操作界面完成)。其中包括:試驗項目、故障電流、整組試驗仿真包括三相短路、兩相短路、單相接地、兩相接地等故障類型和相應的開關輸出量設置。相關試驗參數的

    外切核酸酶的種類

      為限制性核酸內切酶(restrictionendonuclease,簡稱限制酶)。當外源DNA侵入細菌后,限制性內切酶可將其水解切成片段,從而限制了外源DNA在細菌細胞內的表達,而細菌本身的DNA由于在該特異核苷酸順序處被甲基化酶修飾,不被水解,從而得到保護。  限制性核酸內切酶的研究和應用發展

    核酸酶的主要種類

    核酸外切酶有些核酸酶能從DNA或RNA鏈的一端逐個水解下單核苷酸,所以稱為核酸外切酶。只作用于DNA的核酸外切酶稱為脫氧核糖核酸外切酶,只作用于RNA的核酸外切酶稱為核糖核酸外切酶;也有一些核酸外切酶可以作用于DNA或RNA。核酸外切酶從3′端開始逐個水解核苷酸,稱為3′→5′外切酶,例如,蛇毒磷酸

    RNA-SI-核酸酶作圖

    實驗材料 [γ-32P」ATP合適的寡核苷酸DNA 模板l10XdNTP 混合物KLenow 片段合適的限 制性內切核酸酶X 射線膠片洗脫緩沖液tRNA 石蠟油S1 核酸酶試劑、試劑盒 10X 激酶緩沖液PNK10X 復性緩沖液6% 聚丙烯酰胺 8mol L 尿素溶液 (溶于 0.5XTBE) 及甲

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