方案11膠內蛋白質的硝酸銀染色實驗
實驗材料通過電泳分離的凝膠內蛋白質試劑、試劑盒乙酸顯影液固定液甲醇硫酸銀水溶液終止反應液儀器、耗材塑料皿搖床實驗步驟1.將凝膠放在塑料皿中（用一次性的塑料皿或者徹底洗過的塑料皿），加入足量的固定液以覆蓋凝膠。固定 20 min, 并輕輕搖動。2.棄掉固定液，加人足量的 50% 甲醇覆蓋膠，輕輕搖動 10 mm。3.棄掉甲醇，加人去離子水，再搖動 10 min。4.棄掉去離子水，在 0.02% 的硫代硫酸鈉中浸泡凝膠 1min。5.用去離子水洗凝膠 2 次，每次 1 min。6.將凝膠浸到冰冷的0.1% 硝酸銀溶液中，在 4°C 孵育 20 min。7.用去離子水洗凝膠 2 次，每次 1 min。8.將凝膠浸到顯影液中，劇烈搖動塑料皿，直到達到理想的染色效果（見步驟⑨）。如果顯影液變黃，棄掉之，另換新鮮的顯影液。實驗提示：在顯影的過程保持顯影液透明非常關鍵。9.當染色達到理想的程度時，用終止液代替顯影液，停止顯色。10.將銀染的凝......閱讀全文
方案11－膠內蛋白質的硝酸銀染色實驗
實驗材料通過電泳分離的凝膠內蛋白質試劑、試劑盒乙酸顯影液固定液甲醇硫酸銀水溶液終止反應液儀器、耗材塑料皿搖床實驗步驟1.將凝膠放在塑料皿中（用一次性的塑料皿或者徹底洗過的塑料皿），加入足量的固定液以覆蓋凝膠。固定 20 min, 并輕輕搖動。2.棄掉固定液，加人足量的 50% 甲醇覆蓋膠，輕輕搖動
方案10－膠內蛋白質的鋅/咪唑負染色實驗
實驗材料通過電泳分離的凝膠內蛋白質試劑、試劑盒固定液咪唑硫酸鋅儀器、耗材搖床實驗步驟方法 1: 直接用咪唑、SDS 和鋅負染色1.將膠浸放在固定液中 20 min，并輕輕搖動。2.棄掉固定液，用去離子水洗膠 2 次，輕輕搖動 15 min。3.將膠與含有0.1%SDS 的 0.2mol/L 咪唑共孵
方案9－膠內蛋白質的考馬斯亮藍染色實驗
實驗材料通過電泳分離的凝膠內蛋白質試劑、試劑盒考馬斯亮藍染色液脫色液儀器、耗材玻璃紙塑料制凝膠干燥框機械搖床塑料皿塑料包裝紙高級紙巾實驗步驟一、染膠除非特別提到，否則應在室溫下進行染色。1.把含有目標蛋白質的凝膠放到裝有考馬斯亮藍染色液的塑料皿中，使染色液覆蓋凝膠。把塑料皿放到機械搖床上，在室溫下染
方案12－膠內蛋白質的S吡啶乙基化實驗
實驗材料通過電泳分離的凝膠內蛋白質試劑、試劑盒β-巰基乙醇還原緩沖液儀器、耗材冷凍干燥離心機去離子水溫箱冷凍干燥機小離心管移液管塑料皿實驗步驟方法 1: 整塊凝膠的還原和 S-吡啶乙基化1.保證整塊凝膠的正確染色和脫色（見方案 9)。2.在 400~500 ml 水中清洗凝膠 3 次，約 1.5 h
方案13－膠內蛋白質的酶解和肽段提取實驗
實驗材料在二維凝膠電泳中分離的蛋白質試劑、試劑盒膠內胰酶消化緩沖液三氟乙酸（TFA)儀器、耗材冷凍干燥離心機小離心管水浴鍋實驗步驟1.切下凝膠上的蛋白質點，放人小離心管中。2.以 0.lmol/L NH4HCO3、50% 乙腈（用于胰酶）或 0.05mol/L Tris-HCl(PH9.3)、50%
鞭毛染色實驗——硝酸銀染色法
細菌的鞭毛很纖細，其直徑通常為 0.01 ~0.02 μm， 所以，除了很少數能形成鞭毛束（由多根鞭毛構成）的細圈可以用相差顯微鏡直接觀察到鞭毛束的存在外，一般細菌的鞭毛均不能用光學顯微鏡直接觀察到，而只能用電子顯微鏡觀察。要用普通光學顯微鏡觀察細菌的鞭毛，必須用鞭毛染色法。鞭毛染色方法很多，本實驗
電泳分離的蛋白質肽譜和序列分析實驗
方案1 蛋白質的過甲酸氧化實驗 方案2 蛋白質還原和S-羧甲基化：大規模方法 方案3 蛋白質還原和S-羧甲基化：微量方法 方案4 用Ellman 試劑測定自由巰基和二硫鍵實驗 方案5 蛋白質的胰酶消化實驗 方案6 用溴化氰切割 M
方案11－利用脫水胰酶親和捕獲蛋白質實驗
試劑、試劑盒乙酸牛胰酶CaCl2溴化氰活化的 Sepharose 4BHClKOHNaHCO3NaOHPMSFPBS硫酸鮭精蛋白乙酸鈉三氟乙酸Tris-Cl儀器、耗材透析膜燒結的玻璃漏斗水浴鍋實驗步驟一、ST-Sepharose 親和樹脂的制備二、脫水胰酶的制備三、脫水胰酶親和柱的制備四、樣品制備、
蛋白質染色實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 聚丙烯酰胺凝膠固定液染色液脫色液儀器、耗材 濾紙培養箱實驗步驟 1. ?將聚丙烯酰胺凝膠放在塑料容器并以3~5倍體積的固定液覆蓋，在旋轉搖床中緩慢揺動2 h。?2. ?傾去固定液，以考馬斯亮藍染色液覆蓋凝膠，并緩慢搖動4 h。3. ?傾去染色液，用約50 ml 固定液沖
蛋白質染色實驗
考馬斯亮藍染色 銀染法 非氨鹽銀染法 快速銀染法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1. 凝膠中蛋白質的定位可用考馬斯亮藍染料染色或銀染色。前者簡便
蛋白質硝酸銀染色試劑盒使用說明
主要用途YIJI蛋白質硝酸銀染色試劑是一種旨在使用硝酸銀通過固著、清洗和染色，直接在聚丙烯酰胺凝膠上顯色，在清晰背景上產生靈敏度10?納克以下蛋白質的銀色條帶的權威而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于蛋白電泳包括?IEF?的檢測。產品即到即用，性能穩定，操作便捷，
蛋白質硝酸銀染色試劑盒產品說明書
主要用途 YIJI蛋白質硝酸銀染色試劑是一種旨在使用硝酸銀通過固著、清洗和染色，直接在聚丙烯酰胺凝膠上顯 色，在清晰背景上產生靈敏度10 納克以下蛋白質的銀色條帶的權威而經典的技術方法。該技術由大師級科 學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于蛋白電泳包括 IEF 的檢測。產品即
蛋白質免疫印跡實驗制備分離膠、積層膠
制備分離膠、積層膠 1）所需器材：制冰機、制膠槽、Teflon梳子、小燒杯、手套、大冰盒、去離子水、30%聚BXXA溶液、1.5mol/L的Tris-cl（PH值8.8）、1.0mol/L的Tris-cl（PH值6.8）、10%SDS（十二烷基磺酸鈉）、10%AP（過硫酸銨）、TEMED（四甲
蛋白質染色實驗——考馬斯亮藍染色
蛋白質染色可用于（1）蛋白質的觀測（2）蛋白質含量的測定。實驗方法原理1. 凝膠中蛋白質的定位可用考馬斯亮藍染料染色或銀染色。前者簡便且快捷，而銀染法具有相當高的靈敏度，能用于檢出更少量的蛋白質。2. 蛋白質的存在影響酸堿滴定中所用某些指示劑的顏色變化，從而改變這些染料的光吸收。在些基礎上發展了蛋白
方案22.5－姐妹染色單體交換實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用胰蛋白酶消化 BUdR 標記了的兩個細胞周期并停留在分裂中期的細胞，在低張緩沖液中孵育細胞，然后固定。用 Hoechst 33258 處理細胞后制備載有細胞的載玻片，光降解染色體。用姬姆薩進行染色體染色，在光學顯微鏡的油鏡下
濾膠過濾層析法蛋白質的純化實驗
凝膠過濾層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 凝膠過濾層析是根據蛋白質分子大小不同而達到分離效果的，凝膠過濾填料中含有大量微孔，只允許緩沖液及小分子量蛋白質通過，而大分子蛋白
濾膠過濾層析法蛋白質的純化實驗
實驗方法原理 凝膠過濾層析是根據蛋白質分子大小不同而達到分離效果的，凝膠過濾填料中含有大量微孔，只允許緩沖液及小分子量蛋白質通過，而大分子蛋白質及一些蛋白復合物則被阻擋在外。因此，高分子量的蛋白質在填料顆粒間隙中流動，比低分于量蛋白更早地被洗脫下來。最大的蛋白質分子最早流出柱子，因為它們在到達柱底前
蛋白質凝膠染色法實驗
實驗步驟總蛋白質的檢測1. 總蛋白質色度法染色簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群，使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度，那么銀染法是可選擇的色度方法。如果需要對切下的蛋白質進行質譜分析，則首選不會引入共價蛋白
蛋白質凝膠染色法實驗
實驗步驟 總蛋白質的檢測 1. 總蛋白質色度法染色 簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群，使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度，那么銀
蛋白質染色實驗——銀染法
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒脫色液戊二醛硝酸銀洗印顯影液儀器、耗材培養箱搖床實驗步驟1. ?將聚丙烯酰胺凝膠放在塑料容器并以5倍體積的固定液覆蓋，在旋轉搖床中緩慢搖動30 min 以上。?2. ?傾去固定液，加5倍凝膠體積的脫色液，緩慢搖動60 min 以上。?3. ?傾去脫色液，加5倍凝膠體積的10
【技術方案】微孔板內細胞固定和抗體染色自動化解決方案
以往，我們使用顯微鏡做熒光成像的時候，常常將樣本放在載玻片上。但是隨著樣本量增加，細胞實驗使用 96 孔和 384 孔微孔板逐漸成為趨勢，這與高內涵（high-content analysis，HCA）分析不謀而合。高內涵分析是一種高通量識別并分析由與細胞相互作用的物質所帶來的細胞表型變化的方法。這
蛋白質凝膠染色法實驗（二）
關鍵步驟通常如下所述。(1) 固定凝膠，以固定蛋白質條帶，并移除凝膠中的干擾物質, 如 S D S 、緩沖液和鹽，這些物質會結合銀并造成背景染色。(2) 用能夠結合蛋白質并提高銀結合能力的物質, 或是能夠干擾剩余未結合的銀造成的背景染色的物質來孵育凝膠。總之，這些各種各樣的方法都和敏化作用有關。(3
蛋白質染色實驗——快速銀染法
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒甲醛固定液硫代硫酸鈉干膠液甲醇儀器、耗材搖床透析膜實驗步驟1. 將凝膠置于塑料容器中，加入50 ml 甲醛固定液，在旋轉搖床中緩慢搖動10 min。?2. ?傾去固定液，用水冼兩次，每次5 min，緩慢搖動。?3. ?傾去水，凝膠浸泡在0.2 g/l 硫代硫酸鈉溶液中1 m
蛋白質凝膠染色法實驗（三）
尼羅紅蛋白質凝膠染色劑尼羅紅 (Nile red) 是一種吩囉嗪酮類染料, 當其從水轉入到疏水環境，如 S D S 微粒或蛋白質-S D S 復合物中時，便顯示出強烈的熒光增強作用。尼 羅 紅 不 會 與 S D S 單體發生顯著作用》利用這一特點開發出了一種適合 S D S 凝膠的迅速
蛋白質凝膠染色法實驗3
糖蛋白的檢測1. 通用糖蛋白檢測糖 基 化 是 真 核 細 胞 中 最 常 見 的 蛋 白 質 翻 譯 后 修 飾 。寡 糖 通 常 連 接 于 天 冬 酰 胺 側 鏈(iV-連 接 糖 基 化 ) 或 絲 氨 酸 和 蘇 氨 酸 羥 基 側 鏈 (〇 連 接 糖 基 化）。凝 膠 中 蛋 白 質
蛋白質凝膠染色法實驗（四）
(3) 用 10% 〇 //V ) 甲醇、7 % ( V /V ) 乙酸進行簡單的凝膠脫色。利用基于微波爐的方案可以加快染色過程的進行。 SYPRO R uby 蛋白質凝膠染料具有相對較高的消光系數和量子產率，因此它十分亮眼, 化學穩定性和光穩定性都很高。光譜的激發可借助紫外線或是藍光光源;
蛋白質凝膠染色法實驗（五）
磷 蛋 白 的 檢 測作為基本的細胞信號機制, 指定氨基酸殘基的可逆磷酸化作用的重要性已無需爭辯。當前磷蛋白染料具有受ZL保護的構型，即磷酸基結合部分共價連接于熒光團。檢測的方式是選擇性結合磷酸化的氨基酸，但是沒有熒光增強作用。從某種程度上講, 許多可溶的熒光復合物都可作為總蛋白質染色劑
蛋白質凝膠染色法實驗（一）
總蛋白質的檢測1. 總蛋白質色度法染色簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群，使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度，那么銀染法是可選擇的色度方法。如果需要對切下的蛋白質進行質譜分析，則首選不會引入共價蛋白
蛋白質凝膠染色法實驗2
2. 總蛋白質熒光法染色熒光染色法結合了檢測靈敏度 (可與銀染法媲美) 與染色流程簡便性 (與考馬斯亮藍染 色 或 Z n?2+?反染法相同），且其線性定量范圍較比色法大 10?100 倍 。檢測依賴于儀器,需要一個單色激發光源、能將波長較長的發射光從波長較短 (也更亮）的激發光中分離出來的選擇性光
固相化－pH－梯度雙向凝膠電泳實驗10
方案11 銀氨染色實驗方法原理銀染聚丙烯酰胺凝膠首先由 Switzer 等引進（1979)，已迅速成為一種最普遍使用的高靈敏度蛋白質染色方法。因存在背景高、重復性不好及銀鏡等問題，多年來對此方法的改進較多。目前，Rabilloud 等（1994b）在文獻中發現 100 多種不同的方案，但所有這些方案