方案13膠內蛋白質的酶解和肽段提取實驗
實驗材料在二維凝膠電泳中分離的蛋白質試劑、試劑盒膠內胰酶消化緩沖液三氟乙酸（TFA)儀器、耗材冷凍干燥離心機小離心管水浴鍋實驗步驟1.切下凝膠上的蛋白質點，放人小離心管中。2.以 0.lmol/L NH4HCO3、50% 乙腈（用于胰酶）或 0.05mol/L Tris-HCl(PH9.3)、50% 乙腈（用于 Lys-Q 各 1 ml，清洗凝膠 2 次，以去除多余的考馬斯亮藍染液。3.離心冷凍干燥，使每一片凝膠完全干燥。當完全干燥時，每一片凝膠應不會粘到離心管壁上。4.加入 10ul 的含有 0.5ug 適當蛋白酶的消化緩沖液，直接傾到干燥的凝膠片上，使其重新濕潤。5.靜候 10~20 min，直到溶液完全被凝膠吸收。6.如果需要，重復步驟④和步驟⑤，使凝膠充分膨脹。7.加入 200 沁消化緩沖液，徹底覆蓋凝膠片。8.35°C 孵育 16 h。9.小心傾出消化緩沖液（現在應稱其為抽提液），注人一個干凈的小離心管中。消化緩沖液中......閱讀全文
方案13－膠內蛋白質的酶解和肽段提取實驗
實驗材料在二維凝膠電泳中分離的蛋白質試劑、試劑盒膠內胰酶消化緩沖液三氟乙酸（TFA)儀器、耗材冷凍干燥離心機小離心管水浴鍋實驗步驟1.切下凝膠上的蛋白質點，放人小離心管中。2.以 0.lmol/L NH4HCO3、50% 乙腈（用于胰酶）或 0.05mol/L Tris-HCl(PH9.3)、50%
蛋白質內序列分析用肽段的分離與純化實驗
分子生物學中最重要的環節之一是對微量蛋白質進行分析，使對編碼待研究蛋白的 cDNA 序列的克隆成為可能。為有效地做到這一點，通常需要知道蛋白質的內序列。在這一方面，肽段的有效分離是極重要的。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南，作者：朱厚礎。試劑、試劑盒考馬斯亮藍 G乙酸甲醇Achromobacte
蛋白質內序列分析用肽段的分離與純化實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 考馬斯亮藍 G 乙酸 甲醇 Achromobacter 胰蛋白酶 I 三氟乙酸 乙腈 2-丙醇
蛋白質內序列分析用肽段的分離與純化實驗
試劑、試劑盒 考馬斯亮藍 G乙酸甲醇Achromobacter 胰蛋白酶 I 三氟乙酸乙腈2-丙醇儀器、耗材 SpeedVac 型旋轉濃縮器Tween-20UltrafreeTM MC 濾器C18 反相 HPLC 柱實驗步驟 材料與設備考馬斯亮藍 G(0.05% 的乙酸-20% 甲醇溶液）乙酸 (5
電泳分離的蛋白質肽譜和序列分析實驗
方案1 蛋白質的過甲酸氧化實驗 方案2 蛋白質還原和S-羧甲基化：大規模方法 方案3 蛋白質還原和S-羧甲基化：微量方法 方案4 用Ellman 試劑測定自由巰基和二硫鍵實驗 方案5 蛋白質的胰酶消化實驗 方案6 用溴化氰切割 M
方案11－膠內蛋白質的硝酸銀染色實驗
實驗材料通過電泳分離的凝膠內蛋白質試劑、試劑盒乙酸顯影液固定液甲醇硫酸銀水溶液終止反應液儀器、耗材塑料皿搖床實驗步驟1.將凝膠放在塑料皿中（用一次性的塑料皿或者徹底洗過的塑料皿），加入足量的固定液以覆蓋凝膠。固定 20 min, 并輕輕搖動。2.棄掉固定液，加人足量的 50% 甲醇覆蓋膠，輕輕搖動
方案10－膠內蛋白質的鋅/咪唑負染色實驗
實驗材料通過電泳分離的凝膠內蛋白質試劑、試劑盒固定液咪唑硫酸鋅儀器、耗材搖床實驗步驟方法 1: 直接用咪唑、SDS 和鋅負染色1.將膠浸放在固定液中 20 min，并輕輕搖動。2.棄掉固定液，用去離子水洗膠 2 次，輕輕搖動 15 min。3.將膠與含有0.1%SDS 的 0.2mol/L 咪唑共孵
方案12－膠內蛋白質的S吡啶乙基化實驗
實驗材料通過電泳分離的凝膠內蛋白質試劑、試劑盒β-巰基乙醇還原緩沖液儀器、耗材冷凍干燥離心機去離子水溫箱冷凍干燥機小離心管移液管塑料皿實驗步驟方法 1: 整塊凝膠的還原和 S-吡啶乙基化1.保證整塊凝膠的正確染色和脫色（見方案 9)。2.在 400~500 ml 水中清洗凝膠 3 次，約 1.5 h
方案9－膠內蛋白質的考馬斯亮藍染色實驗
實驗材料通過電泳分離的凝膠內蛋白質試劑、試劑盒考馬斯亮藍染色液脫色液儀器、耗材玻璃紙塑料制凝膠干燥框機械搖床塑料皿塑料包裝紙高級紙巾實驗步驟一、染膠除非特別提到，否則應在室溫下進行染色。1.把含有目標蛋白質的凝膠放到裝有考馬斯亮藍染色液的塑料皿中，使染色液覆蓋凝膠。把塑料皿放到機械搖床上，在室溫下染
方案15標準條件下肽段的反相－HPLC實驗
實驗材料通過蛋白質消化得到的肽段混合物試劑、試劑盒乙腈去離子水蛋白質標準品三氟乙酸（TFAHPLC級）儀器、耗材HPLC 層析系統帶帽的聚丙烯試管反相層析柱實驗步驟展開
質譜分析
實驗概要本實驗在二維電泳圖像獲取和分析的基礎上，利用質譜分析及數據庫搜索鑒定部分蛋白質斑點。實驗步驟1. 膠內酶切隨機選擇重復性好，差異顯著，無明顯變形、拖尾，與周圍蛋白點分離明確的蛋白點作為質譜分析對象，進行膠內酶解。?? 1) 從膠上切取蛋白質凝膠顆粒置入96孔培養板內，用去離子水清洗數次。??
丙烯酰胺膠中肽提取和蛋白消化技術
Digestion of Proteins and Extraction of Peptides from an Acrylamide GelSherry Niessen, Ian McLeod and John R. Yates IIIDepartment of Cell Biology, The
利用納升級液相色譜－串聯質譜進行蛋白質鑒定實驗
實驗材料:修飾胰蛋白酶試劑、試劑盒:消化緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? 萃取液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
利用納升級液相色譜－串聯質譜進行蛋白質鑒定實驗
實驗材料修飾胰蛋白酶試劑、試劑盒消化緩沖液萃取液清洗液脫色液儀器、耗材多通道移液槍Eppendorf Repeater 分液器Combitips 分液管實驗步驟3.1 膠內蛋白的水解和多肽的提取（一天的實驗方案)對于從 SDS-PAGE，2D-PAGE，BN-PAGE 電泳（經考馬斯亮藍 G-250
利用納升級液相色譜－－串聯質譜進行蛋白質鑒定實驗
實驗材料 修飾胰蛋白酶試劑、試劑盒 消化緩沖液萃取液清洗液脫色液儀器、耗材 多通道移液槍Eppendorf Repeater 分液器Combitips 分液管實驗步驟 3.1 膠內蛋白的水解和多肽的提取（一天的實驗方案)對于從 SDS-PAGE，2D-PAGE，BN-PAGE 電泳（經考馬斯亮藍
方案13－利用化學印刷法進行肽質量指紋圖譜分析實驗
實驗材料細胞或所研究的蛋白質試劑、試劑盒ACTH 肽段樣品變性緩沖液直接藍-71等電聚焦平衡緩沖液碘乙酰胺基質緩沖液辛基-吡喃葡萄糖修飾的豬胰蛋白酶三丁基膦儀器、耗材離心機化學打印儀導電膠帶濕盒固定化pH梯度膠條MALDI 板質譜儀NuPAGE離線掃描儀PVDF 膜實驗步驟一、樣品的 2DPAGE
肽段
?·?????????Designing Your Peptide? (Genosys)·?????????Handling & Storage of Peptides?(Genosys)Two Dimensional Peptide Mapping?(Sefton Lab)??Synthesizi
蛋白質提取分離純化鑒定的實驗方案
一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血細胞與血清分離：取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm離心20min .棄沉淀,留上清備用(沉淀為血細胞，上部為血清).2. 乳糜粒分離：4000rpm 10°C離心10分鐘,采用密度梯度離心梯度液配置：離心管下部3/4容積加血漿，上部1/4容積
蛋白質提取分離純化鑒定的實驗方案
一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血細胞與血清分離：取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm離心20min .棄沉淀,留上清備用(沉淀為血細胞，上部為血清).2. 乳糜粒分離：4000rpm 10°C離心10分鐘,采用密度梯度離心梯度液配置：離心管下部3/4容積加血漿，上部1/4容積
方案5－蛋白質的胰酶消化實驗
實驗材料凍干的目標蛋白質試劑、試劑盒CaCl2NH4HCO3苯甲基磺酰氟（PMSF)胰酶貯存液Tween-20儀器、耗材聚丙烯試管水浴箱實驗步驟1.凍干的蛋白質底物溶解在 1% 的碳酸氫銨中，控制使用盡量少的溶液體積，以達到較高的底物濃度。當蛋白質底物很微量（如小于 1mg) 時，加入 Tween-
胃酶解血管緊張肽的結構功能特點
熔點224～226℃(分解)。旋光度-26o(c=1，二甲基甲酰胺)。其5-oxo-Pro-Gln-Asp-Tyr(SO3H)-Thr-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2肽鏈羧基末端五個氨基酸的組成與胰泌素、縮膽囊素完全一致，故黑蛙素有縮膽囊素和胰泌素二者的生物活性促胃液分泌作用相當于四
胃酶解血管緊張肽的結構功能特點
中文名稱胃酶解血管緊張肽英文名稱pepsitensin定 義一種具有升高血壓作用的血管緊張肽。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），激素與維生素（二級學科）
蛋白質組學樣品前處理的方法
要回答這個問題，首先需要理解樣品前處理需要達到的目的：減少人為降解和修飾，并且盡量多的釋放肽段。整個過程可以分為以下流程：先從組織、體液或細胞中提取蛋白質，拿到蛋白混合溶液（根據你的研究目的，可以對蛋白先做分離，或者不分離），接下來還原烷基化（還原的過程是將蛋白的二硫鍵打開，然后烷基化可以修飾巰基，
蛋白質組學樣品前處理的方法
要回答這個問題，首先需要理解樣品前處理需要達到的目的：減少人為降解和修飾，并且盡量多的釋放肽段。整個過程可以分為以下流程：先從組織、體液或細胞中提取蛋白質，拿到蛋白混合溶液（根據你的研究目的，可以對蛋白先做分離，或者不分離），接下來還原烷基化（還原的過程是將蛋白的二硫鍵打開，然后烷基化可以修飾巰基，
融合蛋白的酶解實驗
基本方案 輔助方案 備選方案1 輔助方案 備選方案2 備選方案3 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 融合蛋白
融合蛋白的酶解實驗
實驗材料 融合蛋白試劑、試劑盒 SDS儀器、耗材 水浴鍋培養箱離心機實驗步驟 1. ?準備兩個小量預試驗反應以確定最佳溫育時間：?（1）反應1：20 μl 含有1 μl 200 μg/ml Xa因子的1 mg/ml 融合蛋白，室溫下反應（2）反應2：5 μl 不含因子Xa的1 mg/ml 融合蛋白（
三氟拉嗪處理后的白杄花粉管蛋白質組學研究
實驗概要本實驗運用雙向電泳技術、計算機圖像分析與大規模數據處理技術以及質譜技術研究了。鈣調素調節的下游效應蛋白的表達模式和活性，通過鑒定這些蛋白、分析它們的表達模式以及它們依賴于Ca2 的與CaM的相互作用，將有助于我們了解鈣-鈣調素信號在時間和空間上的特異性，初步探討了細胞如何通過鈣-鈣調素信號響
肽和酶的關系？
科學研究發現，所有的酶都是肽，因此也稱肽酶。人體有內肽酶和外肽酶。內肽酶如消化酶、淀粉酶、細菌酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶，幫助人體消化食物蛋白質，使它變成小肽，讓人體吸收和利用。此外，可以控制細胞的無序生長，使細胞數量和質量控制在正常水平。同時也維系器官的大小、間隔距離及生長比例和速度，不讓其
蛋白質組學肽段除鹽吸頭免費領取！
開學煥新 科研加速高質量的樣品前處理是確保實驗成功與數據可靠的關鍵。C18肽段除鹽吸頭作為蛋白質組學(尤其是基于LC-MS/MS的肽段分析)中常用的脫鹽耗材，亦可用于部分蛋白/肽類相關的生物分析質譜前處理，能夠幫助科研人員高效實現樣品富集與脫鹽，提升質譜檢測的靈敏度與準確性。新學期伊始，Open
蛋白質組學鑒定技術流程
蛋白質組（Proteome）的概念，蕞早由澳大利亞Macquarie大學的Wilkins和Williams于1994年首先提出的，是指一個基因組（Genome），或一個細胞、組織表達的所有蛋白質。蛋白質組學（Proteomics）以細胞、組織或生物體全體蛋白質為研究對象，通過高通量的色譜質譜聯用技術