置換色譜的分離機理
置換色譜是一種非線性色譜技術, 進樣量大, 進樣濃度較高。操作程序包括色譜柱的平衡、上樣、加置換劑、洗脫、分步收集和色譜柱再生這一系列過程。樣品的分離是由于被吸附組分之間對固定相吸附部位直接競爭作用的結果, 吸附較強的組分置換吸附較弱的組分, 并推動其向前移動。系統達到平衡后, 樣品中各組分按照它們對固定相親合力的大小形成一系列毗鄰的樣品區帶, 即置換序列(disp lacem en t train) , 并在置換劑的推動下以相同的速度向前移動。當樣品中各組分全部流出, 置換劑的前沿抵達色譜柱的出口時, 便完成了置換分離過程。色譜柱經再生處理, 就可以進行下一次操作。......閱讀全文
置換色譜的分離機理
置換色譜是一種非線性色譜技術, 進樣量大, 進樣濃度較高。操作程序包括色譜柱的平衡、上樣、加置換劑、洗脫、分步收集和色譜柱再生這一系列過程。樣品的分離是由于被吸附組分之間對固定相吸附部位直接競爭作用的結果, 吸附較強的組分置換吸附較弱的組分, 并推動其向前移動。系統達到平衡后, 樣品中各組分按照它們
影響置換色譜分離的因素
1. 置換劑(1) 置換劑的選擇 置換劑的選擇是置換色譜能否成功地分離和純化目標產物的關鍵因素之一。理想的置換劑必須符合以下條件:●與樣品中其它組分相比, 對固定相的吸附力最強, 而且呈現L angm u ir 吸附行為;●化學穩定性好, 不與樣品中任何組分發生反應;●易溶于流動相, 且能快速完成色
離子色譜的分離機理
離子色譜是液相色譜的一種,故又稱離子色譜(HPIC)或現代離子色譜,其有別于傳統離子交換色譜柱色譜的主要是樹脂具有很高的交聯度和較低的交換容量,進樣體積很小,用柱塞泵輸送淋洗液通常對淋出液進行在線自動連續電導檢測。分離的原理是基于離子交換樹脂上可離解的離子與流動相中具有相同電荷的溶質離子之間進行的可
離子色譜的分離機理
按照分離機理,離子色譜可分為高效離子交換色譜(HPIC)、離子排斥色譜(HPIEC)和離子對色譜(MPIC)三種。用于三種分離方式的柱填料的樹脂骨架都是苯乙烯和二乙烯苯的共聚物。HPIC用低溶量的離子交換樹脂,HPIEC用高容量的樹脂,MPIC用不含離子交換基團的多孔樹脂。 高效離
色譜儀分離機理
色譜儀是利用樣品各組分在固定相和流動相中分配或吸附等作用的差異,使各組分在作相對運動的兩相中反復多次受到上述各作用而達到相互分離。組分要完全分離,兩峰間的距離必須足夠遠,兩峰間的距離是由組分在兩相間的分配系數決定的,即與色譜過程的熱力學性質有關。但是兩峰間雖有一定距離,如果每個峰都很寬,以致彼此重疊
液相色譜分離機理
基本原理液相色譜根據分離機理的不同可分為:液固吸附色譜液液分配色譜離子交換色譜離子對色譜法分子排阻色譜或凝膠滲透色譜
液相色譜柱分離機理
液相色譜柱分離機理
凝膠色譜儀分離機理
凝膠色譜儀是利用大小不同的分子在多孔固定相(凝膠)中的選擇性滲透來分離的,適用于分離分子量不同的大分子物質(Mr>2000)。一、洗脫順序:凝膠色譜中組分與凝膠之間無作用力,只是根據分子量大小來分離。凝膠是有一定孔徑分布范圍的多孔物質,組分進入色譜柱后,向凝膠的孔中擴散,保留程度取決于孔和組分分子的
凝膠色譜儀分離機理
凝膠色譜儀是利用大小不同的分子在多孔固定相(凝膠)中的選擇性滲透來分離的,適用于分離分子量不同的大分子物質(Mr>2000)。一、洗脫順序:凝膠色譜中組分與凝膠之間無作用力,只是根據分子量大小來分離。凝膠是有一定孔徑分布范圍的多孔物質,組分進入色譜柱后,向凝膠的孔中擴散,保留程度取決于孔和組分分子的
關于體積排除色譜的分離機理介紹
體積排除色譜的分離,是在裝填有多孔性材料的色譜柱中進行的。多孔材料的孔有大有小。孔徑,有其“孔徑分布”。當流動相攜帶分子量不同的溶質進入色譜柱后,溶質會因濃度差而滲入或擴散進入填料的孔中。也就是說,溶質在兩相中的運動的動力是濃度梯度。但是,分子體積的大小,造成了在孔中擴散路徑的差異。形象地說,填
分子排阻色譜法的分離機理
樣品分子與固定相之間不存在相互作用,色譜固定相是多孔性凝膠,僅允許直徑小于孔徑的組分進入,這些孔對于溶劑分子來說是相當大的,以致溶劑分子可以自由的擴散出入。樣品中的大分子不能進入凝膠孔洞而完全被排阻,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,首先從柱中被流動相洗脫出來;中等大小的分子能進入凝膠中一些適
分子排阻色譜法的分離機理
樣品分子與固定相之間不存在相互作用,色譜固定相是多孔性凝膠,僅允許直徑小于孔徑的組分進入,這些孔對于溶劑分子來說是相當大的,以致溶劑分子可以自由的擴散出入。樣品中的大分子不能進入凝膠孔洞而完全被排阻,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,首先從柱中被流動相洗脫出來;中等大小的分子能進入凝膠中一些適
分子排阻色譜法的分離機理
樣品分子與固定相之間不存在相互作用,色譜固定相是多孔性凝膠,僅允許直徑小于孔徑的組分進入,這些孔對于溶劑分子來說是相當大的,以致溶劑分子可以自由的擴散出入。樣品中的大分子不能進入凝膠孔洞而完全被排阻,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,首先從柱中被流動相洗脫出來;中等大小的分子能進入凝膠中一些適
hilic色譜柱的分離機理主要包括什么
hilic色譜柱的分離機理主要包括以下三個方面:(1)分配機理(2)離子交換(3)偶極-偶極相互作用。?hilic色譜柱采用了極性改性的固定相,能夠在其表面形成一層富水層,從而增強了對一些強極性化合物的保留能力,有效地克服了反相色譜柱對該類化合物保留能力差的缺點。與傳統的反相色譜柱不同,hilic色
液相色譜儀按分離機理的分類
(一)吸附色譜法(adsorptionchromatography)以吸附劑為固定相的色譜方法稱為吸附色譜法。使用zui多的吸附色譜固定相是硅膠,流動相一般使用一種或多種有機溶劑的混合溶劑。在吸附色譜中,不同的組分因和固定相吸附力的不同而被分離。組分的極性越大、固定相的吸附力越強,則保留時間越長。
液相色譜儀分離機理解析
液相色譜儀有液液分配色譜儀、液固吸附色譜儀、化學鍵合色譜儀、離子交換色譜儀、離子對色譜儀和空間排阻色譜儀等,分離機理如下:一、液液分配色譜儀分離機理:通過組分在固定相和流動相間的多次分配進行分離。可以分離各種無機物和有機物。二、液固吸附色譜儀分離機理:通過組分在固定相和流動相間的多次吸附與解吸平衡而
液相色譜儀分離機理解析
液相色譜儀有液液分配色譜儀、液固吸附色譜儀、化學鍵合色譜儀、離子交換色譜儀、離子對色譜儀和空間排阻色譜儀等,分離機理如下:一、液液分配色譜儀分離機理:通過組分在固定相和流動相間的多次分配進行分離。可以分離各種無機物和有機物。二、液固吸附色譜儀分離機理:通過組分在固定相和流動相間的多次吸附與解吸平衡而
置換色譜的技術特點
置換色譜(displacement chromatography) 作為一種非線性色譜技術, 是指樣品輸入色譜柱后, 用一種與固定相作用力極強的置換劑(disp lacer) 通入色譜柱, 去替代結合在固定相表面的溶質分子。樣品在置換劑的推動下沿色譜柱前進, 使樣品中各組分按作用力強弱的次序, 形成
置換色譜的置換展開方式的優點與局限
雖然傳統洗脫色譜和置換色譜的分離作用都是由于樣品對固定相的作用力不同來實現的, 但兩者的分離機理不同。洗脫色譜中, 樣品各組分的分離是由于它們對固定相作用的平衡常數不同, 導致各組分隨流動相的流動有不同的移動速度。改變流動相的組成、離子強度或pH 值可以改變樣品的吸附特性, 從而達到組分分離的目的。
高效液相色譜儀按分離機理的分類
高效液相色譜法按分離機理的不同可分為以下幾類: (一)吸附色譜法(adsorptionchromatography)以吸附劑為固定相的色譜方法稱為吸附色譜法。使用zui多的吸附色譜固定相是硅膠,流動相一般使用一種或多種有機溶劑的混合溶劑。在吸附色譜中,不同的組分因和固定相吸附力的不同而被分離。
氣相色譜法的分離機理有哪些
1.利用混合物中各組分在流動相和固定相中具有不同的溶解和解吸能力,或不同的吸附和脫附能力或其他親和性能作用的差異。2.當兩相作相對運動時樣品各組分在兩相中反復多次受到各種作用力的作用,從而使混合物中各組分獲得分離。氣相色譜分離的原理混合物中各組分在兩相間進行分配,其中一相是不動的固定相,另一項是攜帶
分子排阻色譜法的分離機理介紹
1、主要取決于凝膠的孔徑大小與被分離組分分子尺寸之間的關系,與流動相的性質沒有直接的關系。 2、樣品分子與固定相之間不存在相互作用,色譜固定相是多孔性凝膠,僅允許直徑小于孔徑的組分進入,這些孔對于溶劑分子來說是相當大的,以致溶劑分子可以自由的擴散出入。樣品中的大分子不能進入凝膠孔洞而完全被排阻
空間排阻色譜法的分離機理介紹
1、主要取決于凝膠的孔徑大小與被分離組分分子尺寸之間的關系,與流動相的性質沒有直接的關系。 2、樣品分子與固定相之間不存在相互作用,色譜固定相是多孔性凝膠,僅允許直徑小于孔徑的組分進入,這些孔對于溶劑分子來說是相當大的,以致溶劑分子可以自由的擴散出入。樣品中的大分子不能進入凝膠孔洞而完全被排阻
液相色譜儀和氣相色譜儀的分離機理對比
液相色譜儀和氣相色譜儀的分離機理 氣相色譜是一種物理的分離方法。利用被測物質各組分在不同兩相間分配系數(溶解度)的微小差異,當兩相作相對運動時,這些物質在兩相間進行反復多次的分配,使原來只有微小的性質差異產生很大的效果,而使不同組分得到分離。 GX液相色譜法是在經典色譜法的基礎上,引用了氣相色譜
ODS的分離機理
反相鍵合相表面具有非極性烷基官能團及未被取代的硅醇基。硅醇基具有吸附功能,剩余的硅醇基的多寡視覆蓋率而定。因此,分離機理較為復雜,其說法有疏水劑理論,雙保留理論,頂替吸附-液相相互作用模型等。
置換色譜的技術優勢
與其它色譜技術相比, 置換色譜有明顯的優點, 即上樣量大、產率高、分辨率好, 而且易于操作。同時, 被分離樣品在分離過程中會自行濃縮。因此, 這一技術已越來越引起人們的關注。尤其對于生物產品, 由于其初始濃度非常低, 并與其它物質混處在同一復合物基質中, 而且在分離過程中要求仍然保持其生物活性, 所
什么是高效置換色譜-、?
HPDC 是利用小分子高效置換劑來交換色譜柱上的樣品,從而達到分離的目的。它具有分離組分含量較少成分的特性。利用HPDC 鑒定分離了低于總量1% 組分的活性人重組生長激素(rHG )。在研究非毒性交換劑時Jayarama 發現硫酸化葡萄糖(Detran Sulfate,DS)是對β 乳球蛋白A
常見的柱色譜和分離化學成分機理
液相柱1、C18、C8等反相柱。2、氨基柱、苯基柱、氰基柱、硅膠等正相柱3、手性柱。(大賽璐)4、離子柱(離子交換柱和離子分析柱)5、凝膠柱(體積排阻法SEC)6、親和色譜柱。
常見的柱色譜和分離化學成分機理
液相柱1、C18、C8等反相柱。2、氨基柱、苯基柱、氰基柱、硅膠等正相柱3、手性柱。(大賽璐)4、離子柱(離子交換柱和離子分析柱)5、凝膠柱(體積排阻法SEC)6、親和色譜柱。
置換色譜法的技術介紹
樣品加載到色譜柱上后,用含有一種比樣品組分保留作用更強的化合物(頂替劑或置換劑)的流動相洗脫,而將樣品組分置換流出色譜柱的分析方法。