SDSpage凝膠電泳出現雜帶是什么問題
SDS-PAGE 電泳過程中常見問題以及解決方法 2 Q:SDS-PAGE 電泳的基本原理? A:SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,是在聚丙烯酰胺凝膠系統中引進 SDS(......閱讀全文
SDSpage凝膠電泳出現雜帶是什么問題
SDS-PAGE 電泳過程中常見問題以及解決方法 2 Q:SDS-PAGE 電泳的基本原理? A:SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,是在聚丙烯酰胺凝膠系統中引進 SDS(
SDSpage凝膠電泳出現雜帶是什么問題
SDS-PAGE 電泳過程中常見問題以及解決方法 2 Q:SDS-PAGE 電泳的基本原理? A:SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,是在聚丙烯酰胺凝膠系統中引進 SDS(
做western顯影出現很多雜帶是什么原因
有很多種原因，舉例如下：1.抗體濃度過高2.SDS造成非特異性結合3. 二抗試劑的非特異結合4.一抗特異性差推薦采用已經經過廠家驗證的WB應用抗體，有圖有真相像義翹的WB抗體一樣，用起來才放心。另，最好放上自己的實驗條件和結果圖片，可以讓大家幫你分析分析。
western－blot－雜帶及背景臟問題
先說這個實驗總體的背景，有黑點，這種背景非常像封閉液沒有完全溶解帶有雜質，或者是容器沒洗干凈，有臟東西了，最好把封閉液用0.22um的膜過濾一下再做。然后其他器皿都洗刷干凈。洗液里面加點tween試試。再一個看條帶，感覺特異性不太好，條帶太多了。看過抗體廠家提供的圖也是這樣的嗎？可以先試試把抗體濃度
SDSPAGE凝膠電泳常見問題及其解決方案
SDS-PAGE凝膠電泳常見問題及其解決方案
sdspage凝膠電泳怎么制備
SDS-PAGE電泳可用于分離蛋白質和核苷酸，這里綜述了SDS-PAGE實驗原理、試劑和器材、以及實驗操作步驟。一.實驗原理：SDS-PAGE是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法是依據混合蛋白的分子量不同來進行分離的。SDS是一種去垢劑，可與蛋白質的疏水部分相結
液相色譜主峰后出現未知雜峰是什么原因
一般是過載了，濃度太高，超出了檢測器的最大響應值，需要稀釋。還有一種可能是，上一次進的樣品中途停掉，再次重新進樣后，相同的化合物在相距很短的保留時間出現，導致出現兩個分叉峰。
pritA蛋白純化有雜帶咋辦
用肝素柱進一步純化。如果結合核酸可以考慮用肝素柱進一步純化。鎳柱純化的時候不用咪唑梯度濃度洗雜，一般用低濃度（10 mM）的溶液洗就可以了，如果有chaperone的話可以用高鹽洗一下。
PCR有雜帶怎么辦
在你現有的退火溫度上各增加三度，降低三度，都去試一下先；如果雜帶的長度比目的帶長的話，就適當縮短退火和延伸時間。
WesternBlot有很多雜帶原因分析
1）目的蛋白有多個修飾位點，本身可以呈現多條帶，建議查閱文獻或進行生物信息學分析，獲得蛋白序列的修飾位點信息，通過去修飾確定蛋白實際大小2) 樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時在冰上操作3）雜蛋白多，建議處理目的蛋白4）抗體特異性不強，建議使用特異性強的抗體5）抗體孵育
PCR只有雜帶，沒有目的條帶
有可能是沒有目標基因，導致PCR只有雜帶PCR片段過長，無法得到目標產物PCR說明：聚合酶鏈式反應（PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇
PCR只有雜帶，沒有目的條帶
有可能是沒有目標基因，導致PCR只有雜帶PCR片段過長，無法得到目標產物PCR說明：聚合酶鏈式反應（PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇
純化蛋白有雜帶但是很細
1.仔細研究填料的說明書，同樣是His-tag或GST標簽的填料，但不同廠家，或者不同分辨率，其緩沖液和洗脫濃度都是有差異的，務必注意！比如，在選擇填料時，可選擇顆粒稍微細些的填料，分辨率會更好些。2.在樣品的各階段都要控制雜蛋白，以最常見的His-tag，可溶表達為例，上樣時，加入低濃度（5-10
SDSPAGE凝膠電泳及蛋白印記
①10×Running Buffer將144g Glycine、30.2g Tris Base、10g SDS溶解于1L雙蒸水中。使用時稀釋10倍②1×Transfer Buffer將3.03g Tris Base、14.4g Glycine溶解于500mL雙蒸水中，加入200mLMethanol，
PCR產物雜帶很多，如何解決
在你現有的退火溫度上各增加三度，降低三度，都去試一下先；如果雜帶的長度比目的帶長的話，就適當縮短退火和延伸時間。
WB結果總有雜帶怎么辦
1、更換一抗，換單克隆的。2、不換一抗，降低一抗稀釋比，這樣目的條帶會變弱，不過雜帶也會，有時候就可以去掉雜帶了。3、多封閉一下。4、洗膜的時候多洗幾次。
PCR產物雜帶很多，如何解決
在你現有的退火溫度上各增加三度，降低三度，都去試一下先；如果雜帶的長度比目的帶長的話，就適當縮短退火和延伸時間。
PCR產物出現非特異性擴增帶的問題
PCR擴增后出現的條帶與預計的大小不一致，或大或小，或者同時出現特異性擴增帶 與非特異性擴增帶。非特異性條帶的出現，其原因：一是引物與靶序列不完全互補、或引物聚合形成二聚體。二是Mg2+離子濃度過高、退火溫度過低，及PCR循環次數過多有關。其次是酶的質和量，往往一些來源的酶易出現非特異條帶而另一
酵母雙雜是什么？
酵母雙雜交技術，它是通過利用轉錄激活因子GAL4的特性而建立的。GAL4由兩個結構域組成，一個為N端的DNA結合域（DNAbinding domain，DBD），另一個是C端的轉錄激活域（active domain，AD），二者可以從核酸一級結構上分開而獨立表達出有功能的結構域；當二者在物理空
SDSPAGE凝膠電泳凝膠的制備方法
SDS-PAGE電泳可用于分離蛋白質和核苷酸?，這里綜述了SDS-PAGE實驗原理、試劑和器材、以及實驗操作步驟。一. 實驗原理：SDS-PAGE是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法是依據混合蛋白的分子?量不同來進行分離的。SDS是一種去垢劑，可與蛋白質的疏水部
聚丙烯酰氨凝膠電泳出現鬼帶的原因分析和處理辦法
“鬼帶”就是在跑大分子構象復雜的蛋白質分子時，常會出現在泳道頂端（有時在濃縮膠中）的一些大分子未知條帶或加樣孔底部有沉淀，主要由于還原劑在加熱的過程中被氧化而失去活性，致使原來被解離的蛋白質分子重新折疊結合和亞基重新締合，聚合成大分子，其分子量要比目標條帶大，有時不能進入分離膠。但它卻于目標條帶有相
SDSPAGE為什么帶出現紋理現象？
為什么帶出現紋理現象？主要是樣品不溶性顆粒引起的。處理辦法：加樣前離心；加適量樣品促溶劑。
熒光定量pcr溶解曲線出現雜峰
用來做測試的cDNA濃度應該比較高，而正式進行定量的模板濃度應該是有高有低吧，低濃度下出現非特異性溶解峰比較正常
Western－Blot中雜帶較多有哪些原因？
1、封閉問題，可以選擇牛奶封閉，并且封閉時間可以延長，4℃過夜都是可以的。2、抗體的非特異性過高，選擇特意性強的抗體，單克隆抗體比多克隆抗體好。3、蛋白質降解。4、蛋白質亞型也一起曝出來。
Western－Blot中雜帶較多有哪些原因
1、封閉問題，可以選擇牛奶封閉，并且封閉時間可以延長，4℃過夜都是可以的。2、抗體的非特異性過高，選擇特意性強的抗體，單克隆抗體比多克隆抗體好。3、蛋白質降解。4、蛋白質亞型也一起曝出來。
Western－Blot中雜帶較多有哪些原因
1、封閉問題，可以選擇牛奶封閉，并且封閉時間可以延長，4℃過夜都是可以的。2、抗體的非特異性過高，選擇特意性強的抗體，單克隆抗體比多克隆抗體好。3、蛋白質降解。4、蛋白質亞型也一起曝出來。
PCR儀RACE的PCR結果有雜帶
RACE PCR雜帶或非特異性PCR條帶可能是由于以下原因： *GSP與其他cDNA的非特異性結合會導致在擴增目的產物時得到無關產物。 *GeneRacer引物和cDNA的非特異性結合會導致產生一端帶有GeneRacer引物序列的PCR產物。 *RNA降解。 *PCR管或試劑污染。 注
做得GST融合純化總有雜帶如何去掉
可以在平衡緩沖液里加一些鹽,0.2-0.5MNaCl，這樣可降低一些因離子作用帶來的非特異吸附。同時在平衡液里加0.5%吐溫等表面活性劑，這樣應該有些改善。此外你也可以用階段洗脫的方法,例如用5mM和10mM還原谷胱甘肽去分別去洗脫，看看有沒有什么區別。還要注意的問題是超聲破碎時注意功率和時間，避免
SDSPAGE常見問題分析
1. 配膠緩沖液系統對電泳的影響？ 在SDS－PAGE不連續電泳中，制膠緩沖液使用的是Tris－HCL緩沖系統，濃縮膠是pH6.7，分離膠pH8.9；而電泳緩沖液使用的Tris－甘氨酸緩沖系統。在濃縮膠中，其pH環境呈弱酸性，因此甘氨酸解離很少，其在電場的作用下，泳動效率低；而CL離子卻很
DNA瓊脂糖凝膠電泳出現拖尾是什么原因
電泳出現拖尾現象,英文成為smear,就是彌散.其原因,主要從以下兩個方面考慮：1、PCR產物自身原因：往往由于酶量過多或酶的質量差,dNTP濃度過高,Mg2+濃度過高,退火溫度過低,循環次數過多,而造成PCR的非特異性產物 過多.對策：①減少Taq酶的量,或調換另一來源的酶.②減少dNTP的濃度.