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  • 限制酶特點

    限制酶是識別特定的核苷酸序列,并在每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶。根據酶的功能特性、大小及反應時所需的輔助因子,限制性內切酶可分為兩大類,即I類酶和Ⅱ酶。最早從大腸桿菌中發現的EcoK、EcoB就屬于I類酶。其分子量較大;反應過程中除需Mg2+外,還需要S-腺苷-L甲硫氨酸、ATP;在DNA分子上沒有特異性的酶解片斷,這是I、Ⅱ類酶之間最明顯的差異。Ⅱ類酶有EcoR I、BamH I、Hind Ⅱ、Hind Ⅲ等。其分子量小于105道爾頓;反應只需Mg2+;最重要的是在所識別的特定堿基順序上有特異性的切點,因而DNA分子經過Ⅱ類酶作用后,可產生特異性的酶解片斷,這些片斷可用凝膠電泳法進行分離、鑒別。......閱讀全文

    限制酶特點

    限制酶是識別特定的核苷酸序列,并在每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶。根據酶的功能特性、大小及反應時所需的輔助因子,限制性內切酶可分為兩大類,即I類酶和Ⅱ酶。最早從大腸桿菌中發現的EcoK、EcoB就屬于I類酶。其分子量較大;反應過程中除需Mg2+外,還需要S-腺苷-L甲硫

    限制酶使用說明

    一、分類目前,已被發現的限制酶,根據其反應的必須因子和切斷點等特性,被分為以下三大類:類 別反應必須因子切 點酶 例????????I 型????s-腺苷基蛋氨酸、ATP、Mg2+????識別部位和切點不同,切斷部位不定????EcoB、EcoK???????II 型????Mg2+????切斷識別

    限制[性酶切]圖譜的概念

    中文名稱限制[性酶切]圖譜英文名稱restriction map定  義核酸經限制性內切酶消化成片段,用電泳等方法分離,不同的核酸形成的各自獨特的條帶圖譜。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    DNA作圖實驗——限制酶部分消化

    實驗材料DNA試劑、試劑盒限制酶緩沖液儀器、耗材電泳儀實驗步驟1. ?用低頻率切割的不同限制性內切酶分別完全消化DNA。2. ?用32P末端標記消化產物,5’末端可先用小牛腸堿性磷酸酶處理。3. ?用T4多核苷酸激酶進行標記。4. ?3’末端可先用大腸捍菌DNA聚合酶ⅠKlenow片段或T4 DNA

    DNA限制酶的功能和作用

    限制性核酸內切酶(以下簡稱限制酶):限制酶主要存在于微生物(細菌、霉菌等)中。一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列,并且能在特定的切點上切割DNA分子。是特異性地切斷DNA鏈中磷酸二酯鍵的核酸酶(“分子手術刀”)。發現于原核生物體內,現已分離出100多種,幾乎所有的原核生物都含有這種酶。是重組DN

    DNA限制性內切酶酶切分析

    一、原理限制性內切酶和基因載體是DNA重組技術中的兩個極其重要的方面。限制性內切酶是首先在大腸桿菌中發現的能夠分解外來DNA的核酸酶。與核酸外切酶相比,該酶可從DNA雙鏈內部特異的核苷酸序列處將DNA雙鏈切斷,產生帶有粘性或平頭末端的DNA片段。把要克隆的外來DNA和載體DNA用同一種限制性內切酶切

    限制性內切酶簡介

      限制性內切酶(restriction endonuclease)全稱限制性核酸內切酶,是一種能將雙股DNA切開的酶。切割方法是將糖類分子與磷酸之間的鍵結切斷,進而于兩條DNA鏈上各產生一個切口,且不破壞核苷酸與堿基。限制酶在分子生物學與遺傳工程領域有廣泛的應用。

    限制酶切割雙鏈DNA的方式

    限制酶切割雙鏈DNA的方式有兩種,產生的末端也有兩種:第一種是交錯切割,即兩條鏈的切點不在同一水平而是相隔數個堿基,故斷口產生兩小段自身互補的單鏈,這種末端容易互補連接,稱為粘性末端(cohesive terminus);第二種為平整切割。

    限制性酶切作圖的概念

    限制性酶切作圖,它是將限制性酶切位點標定在DNA分子的相對位置。最簡單的構建限制圖的方法是比較不同限制酶產生的DNA片段的大小。

    限制性酶切片段的定義

    中文名稱限制性酶切片段英文名稱restriction fragment定  義核酸被限制性內切核酸酶消化所產生的片段。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    限制酶在各種NEBuffer中的活性

    限制酶在各種NEBuffer 中的活性 (NEBuffer Activity Chart for Restriction Enzymes) 對應每一種限制性內切酶,New England Biolabs 均提供彩色蓋子的10X NEBuffer,以保

    DNA的限制性內切酶酶切反應

      [實驗目的]   通過本實驗學習DNA的限制性內切酶酶切反應的基本原理與實驗技術。   [實驗原理]   1.限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA 序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作

    限制性內切酶酶切反應實驗原理

      限制性內切酶已有百余種,每種酶有其特定的核苷酸序列識別特異性,酶的活性需Mg2+來激活。不同的酶也有許多差別:有些酶除需Mg2+外,還需ATP等其他輔助因子的激活;切割位點和識別序列間的距離不同;某些內切酶同時具有甲基化作用。根據這些差別,可將限制性內切酶分為Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型。Ⅱ型限制性內切酶只需要

    DNA的限制性內切酶酶切分析

    限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作用且依賴于ATP的存在。Ⅰ類酶結合于識別位點并隨機的切割識別位點不遠處的DNA,而Ⅲ類酶在識別位點上切割 DNA分子,

    限制性內切酶(restriction-enzyme)酶譜分析

    一、實驗目的在DNA上以限制性內切酶的酶切位點作為標記所繪制的物理圖譜就是限制性內切酶圖譜,限制性內切酶圖譜與其他相關資料聯合使用,可用于基因克隆、分離和基因功能研究。二、實驗原理(一)酶切圖譜的構建限制性內切酶在DNA上有特異的識別和切割位點,可將DNA切開而得到兩個或兩個以上的大小不同的片段,這

    限制性酶切分析的方法特點

    中文名稱限制性酶切分析英文名稱restriction analysis定  義基因組或一段核酸用限制性內切酶消化產生的片段經電泳等方法分離形成獨特的條帶圖譜,對DNA序列的特征進行的分析。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    RNA限制性酶的基本信息

    中文名稱 RNA限制性酶英文名稱 RNA restriction enzyme定  義 能對RNA分子進行選擇性、限制性切割的內切酶。包括:①一些具有內切酶活性的核酶,如L-19 RNA;②通過將RNase H與特定寡聚體共價連接而人為制造的RNA內切核酸酶。、應用學科 生物化學與分子生物學(一級學

    限制性核酸內切酶的定義

    用來識別特定的脫氧核苷酸序列,并對每條鏈中特定部位的兩個脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶

    限制性內切酶的用途

      用于DNA基因組物理圖譜的組建;基因的定位和基因分離;DNA分子堿基序列分析;比較相關的DNA分子和遺傳工程。  限制性核酸內切酶是由細菌產生的,  限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA。

    RNA限制性酶的基本信息

    中文名稱RNA限制性酶英文名稱RNA restriction enzyme定  義能對RNA分子進行選擇性、限制性切割的內切酶。包括:①一些具有內切酶活性的核酶,如L-19 RNA;②通過將RNase H與特定寡聚體共價連接而人為制造的RNA內切核酸酶。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),酶(

    限制性內切酶切割DNA

    一、實驗目的1.通過對DNA的酶切,學會設計構建體外重組DNA分子;2.根據目的基因合理選擇載體與限制性內切酶;3.掌握DNA的酶切技術。 二、實驗原理 限制性內切酶是從細菌中分離出來的一種能在特異位點切割DNA分子的核酸內切酶,目前已從多種細菌中分離出超過400種,識別各自不同

    限制酶的的重要用途的介紹

      ①首先不論DNA的來源如何,用同一種內切酶切割后產生的粘性末端很容易重新連接,因此很容易將人和細菌或人和質粒任何兩個DNA片段連接在一起,即重新組合,這是重組DNA技術的基礎。  ②人類的基因組很大,不切割無法分析其中的基因。限制酶能把基因組在特異的部位切開,即切割不是隨機的,因而從每個細胞的基

    限制酶所識別的序列有什么特點

    并非必須是偶數但是必須反向對稱,你把它想得簡單一點就好,因為他識別序列的只是一種序列,比方說gaattc,那么他就只能識別它并且切開,如果一條鏈是一種序列,另一條是另一種序列,那么是無法切開的。

    限制性核酸內切酶的命名

    1、寄主菌屬名的第一個字母和種名的頭兩個字母組成3個斜體字母的略語表示酶來源的菌種名稱,如大腸桿菌Escherichia coli 表示為Eco , 流感嗜血菌Haemophilus influenzae 表示為Hin;2、用一個正體字母表示菌株的類型,比如EcoR、Hind;3、如果一種特殊的寄主

    限制性核酸內切酶的分類

    限制性核酸內切酶的分類分為I型、II型和III型。

    限制性核酸內切酶及其應用

    (一)限制性核酸內切酶的發現當λ(k)噬菌體侵染E.coliB時,由于其DNA中有EcoB核酸酶特異識別的堿基序列,被降解掉。而E.coliB的DNA中雖然也存在這種特異序列,但可在EcoB甲基化酶的作用下,催化S-腺苷甲硫氨酸(SAM)將甲基轉移給限制酶識別序列的特定堿基,使之甲基化。 EcoB核

    限制性核酸內切酶的來源

    一般是以微生物屬名的第一個字母和種名的前兩個字母組成,第四個字母表示菌株(品系)。例如,從Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性內切酶稱為Bam H,在同一品系細菌中得到的識別不同堿基順序的幾種不同特異性的酶,可以編成不同的號,如HindⅡ、HindⅢ,HpaI、H

    限制[性酶切]圖的表達形式

    中文名稱限制[性酶切]圖英文名稱restriction map定  義基因組物理圖的一種。標明DNA分子上的限制位點、數目、限制片段大小及其排列順序的圖譜。應用學科遺傳學(一級學科),基因組學(二級學科)

    質粒DNA的限制性內切酶酶切分析

    實驗目的學習和掌握限制性內切酶的特性掌握對重組質粒進行限制性內切酶酶切的原理和方法并理解限制性內切酶是DNA重組技術的關鍵工具。相關基礎知識限制性核酸內切酶:是一類能識別雙鏈DNA分子特異性核酸序列的DNA水解酶。它是基因工程中用于體外剪切基因片段的重要工具酶。上世紀七十年代,當人們在對噬菌體的宿主

    DNA的限制性內切酶酶切反應技術

    限制性核酸內切酶(restriction endonuclease)是指識別并切割特異的雙鏈DNA序列的一種內切核酸酶。本實驗是掌握DNA的限制性內切酶的酶切技術。DNA的限制性內切酶酶切反應技術[實驗原理]1. 限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA 序列之內或其附近的特異位

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