分子印跡技術和基本介紹
將各種生物大分子從凝膠轉移到一種固定基質上的過程稱為印跡技術(blotting)。 Southern在1975年首先提出了分子印漬的概念。他將瓊脂糖凝膠電泳分離的 DNA片段在凝膠中進行變性使其成為單鏈,然后將一張硝酸纖維素(nitrocellulose, NC)膜放在凝膠上,上面放上吸水紙巾,利用毛細管作用原理使凝膠中的DNA片段轉移到 NC膜上,使之成為固相化分子。載有DNA單鏈分子的 NC膜就可以在雜交液與另一種帶有標記的 DNA或RNA分子(即探針)進行雜交,具有互補序列的RNA或DNA結合到存在于NC膜的 DNA分子上,經放射自顯影或其他檢測技術就可以顯現出雜交分子的區帶。由于這種技術類似于用吸墨紙吸收紙張上的墨跡,因此稱為“blotting”,譯為“印跡技術”。 生物大分子印跡技術發展極為迅速,己廣泛用于 DNA、RNA、蛋白質的檢測。通常人們將DNA印跡技術稱為Southern blotting,將RNA印......閱讀全文
分子印跡技術和基本介紹
將各種生物大分子從凝膠轉移到一種固定基質上的過程稱為印跡技術(blotting)。 Southern在1975年首先提出了分子印漬的概念。他將瓊脂糖凝膠電泳分離的 DNA片段在凝膠中進行變性使其成為單鏈,然后將一張硝酸纖維素(nitrocellulose, NC)膜放在凝膠上,上面放上吸水紙巾
關于分子印跡技術的原理和步驟的介紹
基本原理 當模板分子(印跡分子)與聚合物單體接觸時會形成多重作用點,通過聚合過程這種作用就會被記憶下來,當模板分子除去后,聚合物中就形成了與模板分子空間構型相匹配的具有多重作用點的空穴,這樣的空穴將對模板分子及其類似物具有選擇識別特性。 基本步驟 1.在一定溶劑(也稱致孔劑)中,模板分子與
分子印跡技術的分類相關介紹
目前,根據模板分子和聚合物單體之間形成多重作用點方式的不同,分子印跡技術可以分為兩類: 1.共價鍵法(預組裝方式) 聚合前印跡分子與功能單體反應形成硼酸酷、西夫堿、亞胺、縮醛等衍生物,通過交聯劑聚合產生高分子聚合物,用水解等方法除去印跡分子即得到共價結合型分子印跡聚合物。 2.非共價鍵法(
關于分子印跡技術的應用相關介紹
1.用于化學仿生傳感器 由于MIPS對于印跡分子的高選擇性,故可以作為仿生傳感器的分子識別元件;這種分子識別作用可以通過信號轉化器(壓電晶體、電極、電阻等)輸出,然后通過各種電、熱、光等手段轉換成可測信號,可定量分析各種小分子有機化合物。 2.色譜分離 MIPS最廣泛的應用之一是利用其特異
分子印跡分離技術概述
分子印跡分離技術是指獲得在空間結構和結合位點上與某一分子(印跡分子)完全匹配的聚合物的過程。1、分子印跡分離技術的原理:當印跡分子與聚合物單體接觸時會形成多重結合位點,通過聚合過程這種作用被記憶下來,當除去印跡分子后,聚合物中形成了與印跡分子空間結構完全匹配的具有多重結合位點的空穴,這樣的空穴將對印
分子印跡技術的原理
當模板分子(印跡分子)與聚合物單體接觸時會形成多重作用點,通過聚合過程這種作用就會被記憶下來,當模板分子除去后,聚合物中就形成了與模板分子空間構型相匹配的具有多重作用點的空穴,這樣的空穴將對模板分子及其類似物具有選擇識別特性。
分子印跡分離技術概述
? ??分子印跡分離技術是指獲得在空間結構和結合位點上與某一分子(印跡分子)完全匹配的聚合物的過程。1、分子印跡分離技術的原理:??????? 當印跡分子與聚合物單體接觸時會形成多重結合位點,通過聚合過程這種作用被記憶下來,當除去印跡分子后,聚合物中形成了與印跡分子空間結構完全匹配的具有多重結合位點
什么是分子印跡技術
第八章 分子印跡技術將各種生物大分子從凝膠轉移到一種固定基質上的過程稱為印跡技術(blotting)。Southern在1975年首先提出了分子印漬的概念。他將瓊脂糖凝膠電泳分離的 DNA片段在凝膠中進行變性使其成為單鏈,然后將一張硝酸纖維素(nitrocellulose, NC)膜放在凝膠上,上面
分子印跡技術的分類
目前,根據模板分子和聚合物單體之間形成多重作用點方式的不同,分子印跡技術可以分為兩類: 1.共價鍵法(預組裝方式) 聚合前印跡分子與功能單體反應形成硼酸酷、西夫堿、亞胺、縮醛等衍生物,通過交聯劑聚合產生高分子聚合物,用水解等方法除去印跡分子即得到共價結合型分子印跡聚合物。 2.非共價鍵法(
分子印跡技術的概況
Southern在1975年首先提出了分子印漬的概念。他將瓊脂糖凝膠電泳分離的 DNA片段在凝膠中進行變性使其成為單鏈,然后將一張硝酸纖維素(nitrocellulose, NC)膜放在凝膠上,上面放上吸水紙巾,利用毛細管作用原理使凝膠中的DNA片段轉移到 NC膜上,使之成為固相化分子。載有DN
分子印跡技術有哪些特點?
1.預定性,即它可以根據不同的目的制備不同的MIPs,以滿足各種不同的需要。 2.識別性,即MIPS是按照模板分子定做的,可專一地識別印跡分子。 3.實用性,即它可以與天然的生物分子識別系統如酶與底物、抗原與抗體、受體與激素相比擬,但由于它是由化學合成的方法制備的,因此又有天然分子識別系統所
分子印跡技術的應用舉例
1.用于化學仿生傳感器由于MIPS對于印跡分子的高選擇性,故可以作為仿生傳感器的分子識別元件;這種分子識別作用可以通過信號轉化器(壓電晶體、電極、電阻等)輸出,然后通過各種電、熱、光等手段轉換成可測信號,可定量分析各種小分子有機化合物。2.色譜分離MIPS最廣泛的應用之一是利用其特異的識別功能去分離
分子印跡聚合物的基本原理介紹
分子印跡技術是在仿生科學和模擬自然界中酶與底物及受體與抗體作用的基礎之上發展來的一項技術。分子印跡是通過以下方法實現的:(1)使印跡分子與功能單體(functional monomer)之間通過共價鍵(covalent)或Π和非共價鍵(non-covalent)結合,形成主客體配合物(Host-
分子印跡微萃取技術的研究進展
微萃取技術是一種將分析物高效萃取富集于微體積的聚合物或有機溶劑中,集采樣、萃取、濃縮、進樣于一體的無(少)溶劑、易于與其他技術在線聯用的樣品前處理方法。分子印跡聚合物是一種具有強大分子識別功能的材料,具有高效的選擇特異性,可從復雜樣品中選擇性分離富集目標分析物,在微萃取技術中得到了廣泛的應用。本文綜
核酸分子雜交技術的基本介紹
由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。 (1)靈敏度高、特異性強; (2)用于 DNADNA和RNARNA的定性、定量檢測。
食品檢測樣品預處理分子印跡技術(MIP)
分子印跡(molecularly imprinted polymer,MIP)技術源于免疫學的發展,20世紀40年代,著名的諾貝爾獎獲得者 Paining 提出了以抗原為模板來合成抗體的理論。1949年,Dickey 首先提出了“分子印跡”這一概念,但是直到1972年德國的 Wuff 研究小組首次報
Southern印跡技術原理和操作步驟
實驗原理:Southern印跡是將DNA片斷從電泳凝膠上直接轉移至膜支持物(如硝酸纖維素膜、尼龍膜)上,使DNA片斷固定的技術。先將DNA經限制性內切酶消化成一系列片段,進行瓊脂糖凝膠電泳,各片段因分子量不同而彼此分開,然后經堿處理凝膠,使DNA的片段被變性、中和并通過毛細作用在高鹽緩沖液中在原位將
免疫印跡技術和免疫斑點技術
免疫印跡技術又稱Western印跡法,它將凝膠電泳與固相免疫結合,首先通過蛋白質電泳技術將需要區分的蛋白質轉移至固相載體如NC膜等上,再借助酶免疫、放射免疫等技術進行測定。該法能分離分子大小不同的蛋白質并確定其分子質量,常用于檢測多種病毒抗體或抗原。免疫印跡技術又稱Western印跡法,它將凝膠電泳
關于DNA印跡法的基本介紹
Southern印跡法(Southern Blot)是將基因組 DNA經限制性內切酶酶解、瓊脂糖凝膠電泳分離,使DNA片段按分子量大小排列在瓊脂糖凝膠上。經堿處理凝膠使DNA變性(使雙鏈DNA變成單鏈),通過具有一定鹽離子濃度溶液的毛細管作用,將凝膠中變性的單鏈DNA片段原位地吸印到硝酸纖維素濾
分子雜交技術的基本信息介紹
互補的核苷酸序列通過Walson-Crick堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。 雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DNA或總RNA。根據使用
關于核酸分子雜交技術的基本介紹
由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。
Southern印跡技術
實驗原理:Southern印跡是將DNA片斷從電泳凝膠上直接轉移至膜支持物(如硝酸纖維素膜、尼龍膜)上,使DNA片斷固定的技術。先將DNA經限制性內切酶消化成一系列片段,進行瓊脂糖凝膠電泳,各片段因分子量不同而彼此分開,然后經堿處理凝膠,使DNA的片段被變性、中和并通過毛細作用在高鹽緩沖液中在原位將
電印跡法的技術方法介紹
中文名稱電印跡法英文名稱electroblotting定 義將經凝膠電泳分離的蛋白質、DNA或RNA條帶通過電泳按原位轉移到另外的固體支持物上形成印跡的方法。此法比靠毛細管作用的印跡法效率高,速度快。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
Southern印跡法的技術方法介紹
Southern印跡法(Southern Blot)是將基因組 DNA經限制性內切酶酶解、瓊脂糖凝膠電泳分離,使DNA片段按分子量大小排列在瓊脂糖凝膠上。經堿處理凝膠使DNA變性(使雙鏈DNA變成單鏈),通過具有一定鹽離子濃度溶液的毛細管作用,將凝膠中變性的單鏈DNA片段原位地吸印到硝酸纖維素濾膜或
免疫印跡法的原理和基本步驟
免疫印跡法分三個階段進行.第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE):抗原等蛋白樣品經SDS處理后帶陰電荷,在聚丙烯酰胺凝膠中從陰極向陽極泳動,分子量越小,泳動速度就越快.此階段分離效果肉眼不可見(只有在染色后才顯出電泳區帶).第二階段為電轉移:將在凝膠中已經分離的條帶轉移至硝酸纖維素
印跡法(blotting)基本原理和應用
印跡法(blotting)即轉移電泳,是20世紀70年代發展起來的一種新方法。Southern于1975年建立了檢測特異DNA片段的DNA- RNA雜交法,稱作Southern印跡法。1977年Alwine等把此方法應用到RNA的研究方面,稱作Nouthern印跡法。1979年Towbin等則把
Northern印跡的制備和Northern印跡
Northern印跡的制備 預備: 1.按下述步驟,每泳道加10~20μg總RNA或 0.5~1μgpoly(A)+RNA進行甲醛/ 瓊脂糖凝膠電泳,將凝膠放在紫外線透照儀上,旁邊置一標尺進行拍照。 a. 總RNA(10~20μg)用下列溶液在65℃溫育5min:
綠色分子印跡技術“雙碳”下海岸污染防治新思路
海岸帶是關乎人類社會發展的地球關鍵帶。隨著人類活動的加劇,大量污染物通過多種途徑被排放到海岸帶中,高強度人類活動引起的環境污染導致海岸帶這一地球關鍵帶功能退化。海岸帶的生態化學要素尤其污染物等的監測和治理極為重要,然而,海岸帶區域環境基質復雜,污染物等種類繁多且通常含量很低,亟需開發高選擇、低成
關于分子雜交技術的基本信息介紹
互補的核苷酸序列通過Walson-Crick堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。 雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DNA或總RNA。根據使用
免疫印跡法的技術特點和應用
免疫印跡法 (Western Blot) 是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學分析技術相結合的雜交技術。免疫印跡法具有分析容量大、敏感度高、特異性強等優點,是檢測蛋白質特性、表達與分布的一種最常用的方法,如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質量測定及病毒的抗體或抗原檢測等。免疫印跡法 (immunob