浙大聯合課題組發現干細胞癌變機理
人體中的癌細胞是從哪里來的?這個問題,全世界每天都有數萬的科學家在苦苦探尋答案,真相正在被一點一點地揭示出來。最近,浙大王英杰教授和沈炳輝教授的聯合課題組在干細胞研究中發現,當兩種關鍵蛋白質“失控”發生越位碰撞后,就會引發一系列變化,將一個正常的干細胞變成腫瘤干細胞。美國當地時間10月4日,這項揭示干細胞癌變重要機制的研究成果在生命科學領域國際頂尖雜志《Cell》子刊《Molecular Cell》(分子細胞)上在線公布。 醫學界稱干細胞為“萬用細胞”,因為它有兩大特點,即能多向分化和自我更新。“多潛能干細胞有一項‘特權’,就是它可以根據需要分化成不同類型的體細胞,源源不斷地供應各種組織細胞的更替與修復。 這一特性使它被廣泛地應用于再生醫學。” 王英杰說,干細胞就像上帝在生物體內撒下的神奇的“永生之種”,它可以通過不對稱分裂,在形成一個子代分化細胞的同時,克隆出一個和母體干細胞幾乎相同的子代干細胞,確保其分......閱讀全文
蛋白質磷酸化
Tyrosine Kinase Assay Using Synthetic Peptides?(T. Miller)Small synthetic peptide substrates are especially well suited for applications such as assay
胚胎干細胞
胚胎干細胞當受精卵分裂發育成囊胚時,內層細胞團(Inner Cell Mass)的細胞即為胚胎干細胞。胚胎干細胞具有 全能性,可以自我更新并具有分化為體內所有組織的能力。早在1970年Martin Evans已從小鼠中分離出胚胎干細胞并在體外進行培養。而人的胚胎干細胞的體外培養才獲得成功。 進
透化細胞和退化細胞器蛋白質磷酸化—懸浮培養細胞透化
實驗材料懸浮培養物試劑、試劑盒胞外緩沖液ATP 儲存液實驗步驟1. 約在實驗開始前 1 小時,用 50 ml 滅菌試管以 1000 g 離心懸浮培養物 5 分鐘,用 40 ml 左右胞外緩沖液清洗細胞兩次。用預熱至 37℃ 的胞外緩沖液重懸細胞至 107?細胞/ml。于 37℃ 輕輕搖動 15~30
透化細胞和退化細胞器蛋白質磷酸化—單層培養細胞透化
實驗材料細胞培養物試劑、試劑盒HEPES儀器、耗材培養基實驗步驟1. 約在實驗開始前 1 小時,將細胞培養物換上含有預熱(37℃)的 20 mmol/L HEPES(pH 7.2)的培養基,繼續培養。讓細胞在實驗前與新培養基達成平衡。2. 將所需數量的有細胞的培養基放在一個絲網托盤上,放入 37℃
透化細胞和退化細胞器中蛋白質的磷酸化實驗
試劑的制備單層培養細胞的透化懸浮培養細胞的透化用分離的亞細胞組分分析蛋白質的磷酸化用分離的亞細胞組分進行激酶分析試劑、試劑盒胞外緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?胞內緩沖液 ? ? ? ? ? ?
透化細胞和退化細胞器中蛋白質的磷酸化實驗
試劑的制備 單層培養細胞的透化 懸浮培養細胞的透化 用分離的亞細胞組分分析蛋白質的磷酸化 用分離的亞細胞組分進行激酶分析 ? ? ? ? ? ?
細胞外囊泡中磷酸化蛋白質組學研究
蛋白磷酸化水平的變化可指針疾病的變化,但卻鮮有磷酸化蛋白被開發成為疾病診斷標記物。細胞外囊泡是由膜封閉的微環境,不受外界蛋白酶和其他酶的影響。這使得細胞外囊泡在體液中高度穩定,為開發磷酸化蛋白應用于醫學診斷提供了契機。今天為大家介紹一篇細胞外囊泡中磷酸化蛋白相關的文章:Phosphoproteins
科學家探究干細胞癌變之謎
干細胞可以分化成不同類型的體細胞,是生物體中的“永生之種”。但是,其一旦變成腫瘤干細胞,則由“天使”變成了“魔鬼”,使癌癥久治不愈。 最近,科學家找到了干細胞癌變的重要機制,為癌癥治療提供了新的思路和技術基礎。 一提到癌癥,映入很多人腦海中的第一個詞便是“不治之癥”。癌細胞讓人膽寒的
Dev-Cell丨同濟王平組揭示腫瘤干細胞調控新機制
腫瘤干細胞是導致腫瘤產生耐藥性、潛伏及轉移的關鍵因素,因此靶向腫瘤干細胞是治療癌癥的有效策略。轉錄因子NANOG(源于 Tir Nan Og 凱爾特語,意即永恒青春之地【1,2】)對維持腫瘤細胞的干性至關重要,可作為多種癌癥惡性程度和預后不良的標志。因此,闡明NANOG的表達調控機制有助于找到靶
我國首個胚胎干細胞產品標準《人胚胎干細胞》標準發布
2月26日,《人胚胎干細胞》團體標準新聞發布會在北京舉行。該標準是我國首個針對胚胎干細胞的產品標準,由中國細胞生物學學會干細胞生物學分會組織制訂。記者從此次發布會上獲悉,該標準綜合考慮了科研、臨床、產業、行業等因素,系統規定了胚胎干細胞的基本質量屬性、質量控制的技術準則,以及產品使用和流通的相
透化細胞和退化細胞器中蛋白質的磷酸化實驗—試劑制備
試劑、試劑盒胞外緩沖液胞內緩沖液透化緩沖液標準裂解緩沖液裂解緩沖液SDS-PAGE 加樣緩沖液雙向-PAGE 裂解緩沖液實驗步驟這些試劑在后面許多地方要用到,應在進行下述實驗前配好。1. 胞外緩沖液(pH 7.2,37℃)110 mmol/L NaCl10 mmol/L KCI1 mmol/L Mg
蛋白質磷酸化的測定實驗
代謝標記 X射線片放射自顯影檢測32P標記的蛋白質 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
首張腫瘤細胞蛋白質圖譜繪就
日前繪制的首張癌癥蛋白質相互作用圖譜涵蓋了以前被忽視的突變,而這些突變可能成為治療的目標。 美國加州大學圣地亞哥分校的Trey Ideker和同事完成的這幅圖譜,研究了幾十種常見癌癥蛋白質在乳腺癌和頭頸癌中的相互作用。“癌癥基因并不是單獨起作用的。”Ideker說,“就像任何機器的部件一樣,它們
胚胎干細胞的優勢
1、胚胎干細胞能永生化,可以傳代建系,且增殖能力強,來源充沛。2、雖然成體干細胞具有向多系分化的能力,但這種分化的“效率”尚不理想。通過體外的擴增培養能提高轉化效率,但是體外的轉化是否會引起成體干細胞遺傳變化還有待證實,而且這種分化是否是成體干細胞多系分化的結果尚無法肯定。即使是成體干細胞多系分化的
胚胎干細胞培養
Media and Solution required for ES Cell Culture?(Bowtell Lab)???Routine Culturing of ES Cells?(Bowtell Lab)??Routine Splitting and freezing of cells?(
胚胎干細胞的定義
胚胎干細胞(Embryonic stem cells,ES細胞或ESCs)是來源于囊胚內細胞團的多能干細胞,而囊胚是胚胎植入前早期的一個階段。人類胚胎在受精后4-5天到達囊胚期,此時的胚胎由50-150個細胞組成。分離胚結或內細胞團(ICM)會導致囊胚的破壞,這一過程會引發倫理問題,包括植入前階段的
胚胎干細胞的鑒定
胚胎干細胞可以通過細胞集落或細胞本身的形態初步鑒定;除此之外,還可以從分子標記和分化潛能等兩方面對胚胎干細胞進行鑒定。各基因的表達情況隨細胞不同而異。因此,可以用一些在細胞中特異性表達的蛋白質對胚胎干細胞進行鑒定。上述特異性表達的蛋白質又分為兩種類型:細胞內的蛋白質以及細胞表面特異性的蛋白質(細胞表
胚胎干細胞的定義
胚胎干細胞(Embryonic stem cell,ESCs,簡稱ES、EK或ESC細胞)是早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性腺中分離出來的一類細胞,它具有體外培養無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內環境,ES細胞都能被誘導分化為機體幾乎所有的細胞類型。
胚胎干細胞的功能
胚胎干細胞具有多能性(Pluripotency),特點是可以通過細胞分化(Cellulardifferentiation)成多種組織(所有組織,包括生殖系細胞)的能力,但無法獨自發育成一個個體(利用四倍體融合技術可以得到完全由所用ES細胞發育而來的個體)。它可以發育成為外胚層、中胚層及內胚層三種
胚胎干細胞的介紹
胚胎干細胞(embryonic stem cell,ESCs,簡稱ES或EK細胞)是早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性腺中分離出來的一類細胞,它具有體外培養無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內環境,胚胎干細胞都能被誘導分化為機體幾乎所有的細胞類型[1]。胚胎干細胞研究最早開始于1
胚胎干細胞的優勢
1、胚胎干細胞能永生化,可以傳代建系,且增殖能力強,來源充沛。2、雖然成體干細胞具有向多系分化的能力,但這種分化的“效率”尚不理想。通過體外的擴增培養能提高轉化效率,但是體外的轉化是否會引起成體干細胞遺傳變化還有待證實,而且這種分化是否是成體干細胞多系分化的結果尚無法肯定。即使是成體干細胞多系分化的
上海藥物所發現抗腫瘤藥物可維持胚胎干細胞自我更新
激活LIF-STAT通路或抑制TGFb/ERK等促進分化的通路可以有效促進胚胎干細胞的自我更新,并使得胚胎干細胞的體外培養得以實現。8月22日,Cell Research 在線發表了中國科學院上海藥物研究所謝欣研究組關于胚胎干細胞的自我更新及體細胞重編程的最新研究成果。 謝欣研究組發現即使在L
浙大聯合課題組發現干細胞癌變機理
人體中的癌細胞是從哪里來的?這個問題,全世界每天都有數萬的科學家在苦苦探尋答案,真相正在被一點一點地揭示出來。最近,浙大王英杰教授和沈炳輝教授的聯合課題組在干細胞研究中發現,當兩種關鍵蛋白質“失控”發生越位碰撞后,就會引發一系列變化,將一個正常的干細胞變成腫瘤干細胞。美國當地時間10月4日,這項
用分離的亞細胞組分分析蛋白質的磷酸化
實驗材料樣品試劑、試劑盒胞內緩沖液透化緩沖液儀器、耗材離心管實驗步驟1. 分離細胞器。2. 于 4℃ 用胞內緩沖液清洗細胞器樣品 3 次,將相當于 1 mg 蛋白質的樣品轉至帶螺帽的小離心管,放入冰盒。3. 離心,吸去上清,加 200 μl 預熱至 37℃ 的透化緩沖液,輕輕混勻,放入 37℃ 水浴
STAP細胞丑聞:STAP細胞或為胚胎干細胞
今年4月,調查委員會宣布STAP細胞丑聞初步結論。 雖然一個長時間運行的干細胞研究慘敗,但日本理化學研究所(RIKEN)另一個調查委員會近日在東京發布了新報告。報告稱,所謂的刺激觸發采集功能(STAP)干細胞以及可能衍生自這些細胞的嵌合體小鼠和畸胎瘤,“都來源于受污染的(胚胎干)細胞培養,這個真相
蛋白質磷酸化位點怎么確定
鑒定了磷酸化肽后,還要進一步確定磷酸化肽中修飾了磷酸化位點的哪個殘基.用于確定磷酸化肽中磷酸化位點的質譜方法基于兩種不同原理,第一種方法取決于磷酸酯鍵的化學穩定性,如在ESI質譜儀的碰撞室或離子源中,或在MALDI-MS的PSD過程中.磷酸化肽可通過磷酸酯鍵斷裂產生的碎片離子鑒定.第二種方法基于肽段
蛋白質磷酸化位點怎么確定
鑒定了磷酸化肽后,還要進一步確定磷酸化肽中修飾了磷酸化位點的哪個殘基.用于確定磷酸化肽中磷酸化位點的質譜方法基于兩種不同原理,第一種方法取決于磷酸酯鍵的化學穩定性,如在ESI質譜儀的碰撞室或離子源中,或在MALDI-MS的PSD過程中.磷酸化肽可通過磷酸酯鍵斷裂產生的碎片離子鑒定.第二種方法基于肽段
蛋白質磷酸化最重要的機制
蛋白質磷酸化是調節和控制蛋白質活力和功能的最基本、最普遍,也是最重要的機制。蛋白質磷酸化主要發生在兩種氨基酸上,一種是絲氨酸(包括蘇氨酸),另一種是酪氨酸。這兩類酸磷酸化的酶不一樣,功能也不一樣,但也有少數雙功能的酶可以同時作用于這兩類氨基酸,如MEK(促絲裂原活化蛋白激酶激酶mitogen-a
Western-Blot蛋白質磷酸化操作小貼士
WB 是檢測和定量磷酸化蛋白質的重要實驗方法,然而大家一直都說磷酸化蛋白 WB 不好做!WB 磷酸化蛋白曝不出條帶的時候,會特別沮喪。 Azure君在此給大家列出幾點小建議,希望能幫助您改善一下實驗結果。 1、樣本是否表達: 查閱資料或通過預實驗確定。 2、對照設置:
Western-Blot蛋白質磷酸化操作小貼士
WB 是檢測和定量磷酸化蛋白質的重要實驗方法,然而大家一直都說磷酸化蛋白 WB 不好做!WB 磷酸化蛋白曝不出條帶的時候,會特別沮喪。在此給大家列出幾點小建議,希望能幫助您改善一下實驗結果。1、樣本是否表達:查閱資料或通過預實驗確定。2、對照設置:陽性和陰性對照。總蛋白抗體對照,對于特定時間的特定樣