離子交換層析(IonExchangeChromatography,IEC)(2)
(2)離子交換劑的電荷基團根據與基質共價結合的電荷基團的性質，可以將離子交換劑分為陽離子交換劑和陰離子交換劑。陽離子交換劑的電荷基團帶負電，可以交換陽離子物質。根據電荷基團的解離度不同，又可以分為強酸型、中等酸型和弱酸型三類。它們的區別在于它們電荷基團完全解離的pH 范圍，強酸型離子交換劑在較大的pH 范圍內電荷基團完全解離，而弱酸型完全解離的pH 范圍則較小，如羧甲基在pH小于6時就失去了交換能力。一般結合磺酸基團(-SO3H)，如磺酸甲基(簡寫為SM)、磺酸乙基(SE)等為強酸型離子交換劑，結合磷酸基團(-PO3H2)和亞磷酸基團(-PO2H)為中等酸型離子交換劑，結合酚羥基(-OH)或羧基(-COOH)，如羧甲基(CM)為弱酸型離子交換劑。一般來講強酸型離子交換劑對 H 離子的結合力比Na+離子小，弱酸型離子交換劑對H 離子的結合力比Na+離子大。陰離子交換劑的電荷基團帶正電，可以交換陰離子物質。同樣根據電荷基......閱讀全文
離子交換層析實驗離子交換層析技術
離子交換層析實驗可應用于：（1）分離純化蛋白質；（2）分離氨基酸；（3）分離核酸、核苷酸及其它帶電荷的生物分子。實驗方法原理離子交換層析（Ion Exchange Chromatography簡稱為IEC）是以離子交換劑為固定相，依據流動相中的組分離子與交換劑上的平衡離子進行可逆交換時的結合力大小的
離子交換層析
離子交換層析利用含有能與周圍介質進行離子交換的不穩定離子的不溶 性基質來分離分離物質。 1、離子交換基質Adams 和Holnes 有1935 年通過酚、甲醛和磺酸縮 聚成不溶性樹脂，制成了第一個人工合成的離子交換材料。從此以后，人工 合成的離子交換樹脂日見增多（多數是從芳香族化合物合成
離子交換層析實驗離子交換層析介質和層析柱的選擇
實驗步驟1. ?離子交換凝膠的選擇依據：（1）根據蛋白質的pH只穩定范圍。蛋白質在等電點pI以上pH穩定時選擇陰離子交換凝膠介質，在pI以下pH的穩定時，則選用陽離子交換凝膠介質。（2）根據特分離蛋白質的分子大小。分子量在10 000~100 000 0 Da 的蛋白，選用如DEAE-Sephace
離子交換層析實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 離子交換緩沖液儀器、耗材 離子交換層析柱梯度混合器電導表實驗步驟 1. ?配制離子交換層析緩沖液，安裝好層析柱，但以離子交換層析緩沖液取代其中的凝膠過濾緩沖液。?2. ?用起始梯度的緩沖液溶解含蛋白質混合物的樣品。3. ?棄去柱床上部的大部分緩沖液，并將樣品加在凝膠的頂
離子交換層析法
離子交換層析法是以具有離子交換性能的物質作固定相，利用它與流動相中的離子能進行可逆的交換性質來分離離子型化合物的一種方法。⒈ 離子交換劑預處理和裝柱 對于離子交換纖維素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的顆粒，以保證有較好的均勻度，對于已溶脹好的產品則不必經這一步驟。溶脹的交換劑使用前要用稀酸或稀堿處
離子交換層析實驗
基本方案 離子交換層析介質和層析柱的選擇 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑
離子交換層析法
離子交換層析法（ion exchange chromatography，簡稱IEC）是從復雜的混合物中，分離性質相似大分子的方法之一，依據的原理是物質的酸堿性、極性，也就是所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質，對管柱上的離子交換劑有不同的親和力，改變沖洗液的離子強度和pH值，物質就能依次從層析柱中分離
離子交換層析實驗
離子交換層析技術 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 離子交換層析（Ion Exchange Chromatography簡稱為IEC）是以離子交換劑為固定相，依據流動相中的組分離
離子交換層析的概述
離子交換層析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提純中得到最廣泛應用的方法之一。 離子交換層析分離蛋白質是根據在一定pH 條件下，蛋白質所帶電荷不同而進行的分離方法。常用于蛋白質分離的離子交換劑有弱酸型的羧甲基纖維素(CM纖維素) 和弱堿型的二乙基
離子交換層析的發展
1848年，Thompson等人在研究土壤堿性物質交換過程中發現離子交換現象。上世紀40年代，出現了具有穩定交換特性的聚苯乙烯離子交換樹脂。50年代，離子交換層析進入生物化學領域，應用于氨基酸的分析。離子交換層析是生物化學領域中常用的一種層析方法，廣泛的應用于各種生化物質如氨基酸、蛋白、糖類、核
離子交換層析簡要概述
離子交換層析（IEX）基于特定pH下的凈電荷差異分離生物分子。蛋白電荷取決于可電離氨基酸側鏈基團的數量和類型。每個蛋白具有等電點（pI），即負電荷和正電荷的總數為零的pH。在低于蛋白pI的緩沖溶液中，蛋白帶正電并將結合陽離子交換樹脂的帶負電荷的官能團。在高于蛋白pI的緩沖液中，蛋白是帶負電荷的，
離子交換層析的應用
離子交換層析技術已廣泛用于各學科領域。在生物化學及臨床生化檢驗中主要用于分離氨基酸、多肽及蛋白質，也可用于分離核酸、核苷酸及其它帶電荷的生物分子。
離子交換層析法原理
離子交換層析法（ionexchangechromatography，簡稱IEC）是從復雜的混合物中，分離性質相似大分子的方法之一，依據的原理是物質的酸堿性、極性，也就是所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質，對管柱上的離子交換劑有不同的親和力，改變沖洗液的離子強度和pH值，物質就能依次從層析柱中分離出來
離子交換層析的概念
離子交換層析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提純中得到最廣泛應用的方法之一。離子交換層析分離蛋白質是根據在一定pH 條件下，蛋白質所帶電荷不同而進行的分離方法。常用于蛋白質分離的離子交換劑有弱酸型的羧甲基纖維素(CM纖維素) 和弱堿型的二乙基氨基乙基
離子交換層析的原理
離子交換層析法是從復雜的混合物中，分離性質相似大分子的方法之一，依據的原理是物質的酸堿性，極性，所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質，對管柱上的離子交換劑有不同的親和力，改變沖洗液的離子強度和pH值，物質就能依次從層析柱中分離出來。層析開始前，功能基團與反離子穩定結合，就與反離子發生可逆交換，與層析劑
離子交換層析實驗（四）
六、實例: 復雜蛋白質混合物的分離采用離子交換層析分離復合蛋白質混合物的一個典型例子就是從乳清中分離蛋白質。它可以進行一定程度的工業化放大，但也可作為一個廉價的檢測體系用于離子交換劑的評價。實際上, 我們也已經通過這種蛋白質混合物來比較不同供應商所提供的離子交換劑的吸附能力（Hahnetal.，
離子交換層析小知識
離子交換層析利用含有能與周圍介質進行離子交換的不穩定離子的不溶 性基質來分離分離物質。 1、離子交換基質Adams 和Holnes 有1935 年通過酚、甲醛和磺酸縮 聚成不溶性樹脂，制成了第一個人工合成的離子交換材料。從此以后，人工 合成的離子交換樹脂日見增多（多數是從芳香族化合物合成的），
離子交換層析的原理
離子交換層析法是從復雜的混合物中，分離性質相似大分子的方法之一，依據的原理是物質的酸堿性，極性，所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質，對管柱上的離子交換劑有不同的親和力，改變沖洗液的離子強度和pH值，物質就能依次從層析柱中分離出來。層析開始前，功能基團與反離子穩定結合，就與反離子發生可逆交換，與層析劑
離子交換層析實驗（三）
五、離子交換層析柱的操作以下是離子交換層析柱操作的一般性步驟。此外還需要一些專用步驟以確保離子交換劑在使用時保持穩定。這些步驟如下：’(1) 加載鹽溶液；(2) 平衡層析柱；(3) 蛋白質上樣；(4) 洗去未結合物質；(5) 洗脫；(6) 再生；(7) 消毒處理。一般操作條件如表 22.2 所 TK
離子交換層析實驗（一）
一、實驗原理離子交換層析用于蛋白質分離的原理的最簡單解釋是，基于帶相反電荷分子間的相互吸引力。蛋白質表面所帶的電荷取決于其 Pl 和環境 PH。構成離子交換劑的基礎介質通常為多孔珠形式，可以為蛋白質的吸附提供足夠大的表面積。固定于基礎介質上的帶電配基可以帶正電荷也可以帶負電荷。為提高介質的結
陰離子交換層析介紹
中文名稱陰離子交換層析英文名稱anion exchange chromatography定 義一種含陰離子交換劑的層析系統，根據樣品混合物中各成分所含負電荷數量的不同，從而對陰離子交換劑結合的強度不同而得以分離。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
離子交換層析法簡介
離子交換層析法(Ion Exchange Chromatography簡稱為IEC)是以離子交換劑為固定相,依據流動相中的組分離子與交換劑上的平衡離子進行可逆交換時的結合力大小的差別而進行分離的一種層析方法。常用的離子交換劑有:離子交換纖維素、離子交換葡聚糖和離子交換樹脂 。
離子交換層析實驗（二）
三、結合條件根據離子交換平衡的一般性原理，很顯然，應在很低的鹽濃度條件下對蛋白質進行上樣 (圖 22.1)。鹽濃度也必須適當地調節，這具體取決于離子交換劑配體的密度。通常推薦的鹽濃度為 1 〇?100_〇 l/L 的緩沖液，其電導率相應為 1?4mS/cm。來源于細菌培養物的一般性原料或細胞
陽離子交換層析介紹
中文名稱陽離子交換層析英文名稱cation exchange chromatography定 義利用不同分子在所設計的條件(如pH、離子強度等)下，攜帶電荷情況不同，與陽離子交換劑結合的強度不同，可以用不同的條件洗脫出不同的組分的一種層析法。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二
離子交換凝膠柱層析
原理 在植物生理生化的研究中，往往要從一個組分復雜的混合物中，將性質很相近的生物大分子分離，這是研究工作中一個很關鍵的問題，需要一種具有高度分辨力的技術，才能滿足這一要求。離子交換層析就是這樣的技術，能夠分離只有很小差異的物質（例如僅有一個氨基酸不同的兩種蛋白質），是分離生物大分子的一
離子交換柱層析分離核苷酸實驗_離子交換層析法
本實驗以酵母RNA 為材料, 將RNA 用堿水解成單核苷酸,再用離子交換柱層析進行分離, 最后采用紫外吸收法進行鑒定。旨在了解并掌握RNA 堿水解的原理和方法，掌握離子交換柱層析的分離原理和方法，熟練掌握紫外吸收分析方法。實驗方法原理本實驗以酵母RNA 為材料, 將RNA 用堿水解成單核苷酸,再用離
離子交換柱層析法（層析實驗簡介）概略
一、??? 原理：有些高分子物質含有一些可以分離的基因，例如-SO3H，-COOH等，因此可以和溶液中的離子產生交換反應。如：R-SO3H＋M+ ———— R-S3M＋H+或R-NH3OH＋CL－? —————? R-NH3CL＋OH－這類高分子物質通稱離子交換劑，其中使用最普遍的是離子交換樹脂。由
層析技術概念、原理、分類（凝膠層析和離子交換層析）
一．概念利用混和物中各組分理化性質（吸附力、分子形狀、大小、分子極性、分子親和力以及分配系數）的差異，在物質經過兩相中進行分離的一種技術。本世紀初（1903年），俄國植物學家M.C.Jber發現并使用這一技術證明了植物的葉子中不僅有葉綠素，還含有其他色素，實際上他使用的吸附層析。現在層系法已成為生化
離子交換柱層析原理
離子的半徑電荷等差異會影響它在離子交換柱上的移動速度，進而實現層析。
離子交換層析的基本概述
離子交換層析中，基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。帶有正電荷的稱之陰離子交換樹脂；而帶有負電荷的稱之陽離子樹脂。離子交換層析同樣可以用于蛋白質的分離純化。由于蛋白質也有等電點，當蛋白質處于不同的pH條件下，其帶電狀況也不同。陰離子交換基質結合帶有負電荷的蛋白質，所以這類蛋白質被留在柱子上，然后