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  • mRNA的S1作圖實驗

    實驗材料 mRNA試劑、試劑盒 瓊脂糖電泳緩沖液ATP寡聚核苷酸引物多核苷酸激酶緩沖液T4儀器、耗材 離心機分光光度計搖床實驗步驟一、圖片簡介 二、實驗步驟 1. 用1×堿性制膠緩沖液制備1.2%的低融點瓊脂糖,并將凝固好的膠在1×堿性電泳緩沖液中浸泡過夜。 2. 將以下試劑混合以制備磷酰化的寡聚核苷酸:(1)20 μl [γ-32P]ATP(10 mCi/ml,共200 μCi)(2)1 μl 100 μg/ml 寡聚核苷酸引物(3)25 μl 10×多核苷酸激酶緩沖液(4)4 U T4多核苷酸激酶(5)30℃反應30 min 后,65℃加熱5 min 滅火激酶。3. 將溶于55 μl 水的18 μg 單鏈模板DNA和9 μl 10×TM緩沖液加入已磷酸化的寡聚核苷酸中,40℃雜交15 min。 4. ......閱讀全文

    mRNA的S1作圖實驗

    M13模板 雙鏈模板 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 mRNA 試劑、試劑盒

    mRNA的S1作圖實驗

    實驗材料 mRNA試劑、試劑盒 瓊脂糖電泳緩沖液ATP寡聚核苷酸引物多核苷酸激酶緩沖液T4儀器、耗材 離心機分光光度計搖床實驗步驟一、圖片簡介?二、實驗步驟?1. ?用1×堿性制膠緩沖液制備1.2%的低融點瓊脂糖,并將凝固好的膠在1×堿性電泳緩沖液中浸泡過夜。?2. ?將以下試劑混合以制備磷酰化的寡

    mRNA的S1作圖實驗——雙鏈模板

    實驗材料mRNA試劑、試劑盒NaOHEDTA乙酸銨儀器、耗材離心機蒸發器實驗步驟1. ?對于18 μg DNA溶液,加入10×NaOH/EDTA溶液至1×的濃度,在室溫放置5 min。2. ?加入1.5倍體積的1.5 mol/l pH4.5乙酸銨緩沖液中和。3. ?加2.5倍體積乙醇-70℃沉淀15

    mRNA的S1作圖實驗——M13模板

    S1作圖能用以確定RNA的5’端和內含子邊界。實驗材料mRNA試劑、試劑盒瓊脂糖電泳緩沖液ATP寡聚核苷酸引物多核苷酸激酶緩沖液T4儀器、耗材離心機分光光度計搖床實驗步驟一、圖片簡介?二、實驗步驟?1. ?用1×堿性制膠緩沖液制備1.2%的低融點瓊脂糖,并將凝固好的膠在1×堿性電泳緩沖液中浸泡過夜。

    用S1核酸酶對RNA作圖

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 三種不同的核酸酶——S1 核酸酶、RNA 酶、外切核酸酶Ⅶ被用來進行 RNA 定量,確定內含子位置,以及用來鑒定在克隆的 DNA 模板上的 mRNA 的 5' 端和 3' 端的位置。當檢測 RNA 被雜交到

    用S1核酸酶對RNA作圖

    三種不同的核酸酶——S1 核酸酶、RNA 酶、外切核酸酶Ⅶ被用來進行 RNA 定量,確定內含子位置,以及用來鑒定在克隆的 DNA 模板上的 mRNA 的 5' 端和 3' 端的位置。當檢測 RNA 被雜交到 DNA 模板上時,用核酸酶 S1 進行保護試驗的分析;當檢測 RNA 被雜交

    用S1核酸酶對RNA作圖

    實驗方法原理?三種不同的核酸酶——S1 核酸酶、RNA 酶、外切核酸酶Ⅶ被用來進行 RNA 定量,確定內含子位置,以及用來鑒定在克隆的 DNA 模板上的 mRNA 的 5' 端和 3' 端的位置。當檢測 RNA 被雜交到 DNA 模板上時,用核酸酶 S1 進行保護試驗的分析;

    S1核酸酶作圖的方法和原理

    三種不同的核酸酶——S1核酸酶、RNA酶、外切核酸酶Ⅶ被用來進行RNA定量,確定內含子位置,以及用來鑒定在克隆的DNA模板上的mRNA 5′端和3′端的位置。當檢測RNA被雜交到DNA模板上時,用核酸酶S1進行保護試驗的分析;當檢測RNA被雜交到來自DNA模板的RNA上時用RNA酶。外切核酸酶Ⅶ有更

    DNA作圖實驗

    實驗材料?DNA試劑、試劑盒?限制酶緩沖液儀器、耗材?電泳儀實驗步驟 ? 用低頻率切割的不同限制性內切酶分別完全消化DNA。2.? 從每個反應取小份樣品作電泳分析,用已知的分子量標準作對照。剩余的樣品置于冰浴。3.? 比較分子量標準估算出DNA片段的長度,推導出每種限制性內切酶的酶切位點數目。4.?

    DNA作圖實驗

    多種酶消化 限制酶部分消化 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 應用遺傳學技術構建能顯示基因以及其他序列待征在基因組上位置的圖。

    減數分裂作圖實驗

    實驗材料酵母菌株試劑、試劑盒消解酶 100T儀器、耗材毛細吸管頭強力膠水光學玻璃纖維YPD平板YPD培養管實驗步驟第 1 天顯微針的制備四分體解剖針可以通過手工拉制細玻璃絲或使用「技術和方案 23, 制備四分體解剖針」中描述的光學纖維玻璃絲來制備。將會演示針的準備過程并且提供給你一些必需品,以便你可

    DNA作圖實驗——多種酶消化

    主要用于顯示基因以及其他序列待征在基因組上位置的圖。實驗方法原理應用遺傳學技術構建能顯示基因以及其他序列待征在基因組上位置的圖。實驗材料DNA試劑、試劑盒限制酶緩沖液儀器、耗材電泳儀實驗步驟1. ?用低頻率切割的不同限制性內切酶分別完全消化DNA。?2. ?從每個反應取小份樣品作電泳分析,用已知的分

    減數分裂作圖實驗

    實驗材料?酵母菌株試劑、試劑盒?消解酶 100T儀器、耗材?毛細吸管頭強力膠水光學玻璃纖維YPD平板YPD培養管實驗步驟 第 1 天顯微針的制備四分體解剖針可以通過手工拉制細玻璃絲或使用「技術和方案 23, 制備四分體解剖針」中描述的光學纖維玻璃絲來制備。將會演示針的準備過程并且提供給你一些必需品,

    DNA作圖實驗——限制酶部分消化

    實驗材料DNA試劑、試劑盒限制酶緩沖液儀器、耗材電泳儀實驗步驟1. ?用低頻率切割的不同限制性內切酶分別完全消化DNA。2. ?用32P末端標記消化產物,5’末端可先用小牛腸堿性磷酸酶處理。3. ?用T4多核苷酸激酶進行標記。4. ?3’末端可先用大腸捍菌DNA聚合酶ⅠKlenow片段或T4 DNA

    mRNA-的分離實驗

    oligo(dT)-纖維素親和層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 ?哺乳動物細胞的絕大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly(A)尾,因此可以

    mRNA-的分離實驗

    實驗方法原理?哺乳動物細胞的絕大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纖維素親和層析法從大量的細胞RNA中分離mRNA。實驗步驟1.? 用0.1?mol/L NaOH懸浮0.5~1.0 goligo(dT)-纖維素。?2. ?將懸浮液裝入滅菌的一次性層

    mRNA的提取及純化實驗

    磁珠法 親和柱層析法 親和柱層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 mRNA

    單細胞mRNA差異顯示實驗

    目前有幾種方法可以顯示生理刺激下組織樣本中未知基因的表達水平變化。然而, 很多組織內的細胞又存在形態和功能上的異質性,因此常常需要從單個細胞水平研究基因表達的差異。現在,我們介紹一種新方法,它常規用來在單細胞水平考察未知基因的差異性表達。現代神經科學研究技術作者:U.Windhorst?&?H. J

    mRNA的提取及純化實驗

    實驗材料 mRNA試劑、試劑盒 mRNA分離試劑盒異丙醇NaAC儀器、耗材 儀器水浴離心機取液器分光光度計實驗步驟 一、生物素標記的Oligo(dT)探針與mRNA的煺火1. ?在DEPC處理過的1.5 ml Eppendof管中,加入0.2-1 mg 的總RNA和無RNase的水至終體積為0.5

    mRNA-的-PCR-差異顯示實驗

    對應于 mRNA 的 DNA 序列,可以被回收、克隆、測序,可以用作雜交或篩庫的探針。來源:《精編分子生物學實驗指南(第五版)》實驗材料人的細胞總 RNA 或 poly(A)+ RNA試劑、試劑盒人胎盤 RNase 抑制劑DNase ITris·ClKClMgCl23:1 (V V) 苯酚 氯仿乙酸

    單細胞mRNA差異顯示實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 ##流程圖 試劑、試劑盒 溶液和緩沖液 儀器、耗材

    mRNA-的-PCR-差異顯示實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 人的細胞總 RNA 或 poly(A)+ RNA 試劑、試劑盒

    單細胞mRNA差異顯示實驗

    實驗方法原理 ##流程圖試劑、試劑盒 溶液和緩沖液儀器、耗材 水浴槽PCR熱循環儀微量離心機塑料制品和濾器實驗步驟 一、RNA 的分離收集對照組和實驗組細胞,放入含 45ul2 mmol/L DTT 的 1.5 ml 微量離心管中。95℃ 水浴熱解 2 min。每管加入以下物質:37℃ 溫育 30

    mRNA-的-PCR-差異顯示實驗

    實驗方法原理 實驗材料 人的細胞總 RNA 或 poly(A)+ RNA試劑、試劑盒 人胎盤 RNase 抑制劑DNase ITris·ClKClMgCl23:1 (V V) 苯酚 氯仿乙酸鈉乙醇DEPC 處理的水簡并錨定 oligo(dT) 引物組合MoMuLV 逆轉錄酶緩沖液DTT4dN

    免疫學實驗血清前S1蛋白介紹

      血清前S1蛋白介紹:   血清前S1蛋白:前S1蛋白(preS1)是構成乙型肝炎病毒衣殼蛋白的重要成分,它含有肝細胞膜受體,在HBV感染肝細胞和機體免疫應答反應中起重要作用。采用ELISA法對患者HBsAg陽性標本進行了preS1和血清標志物檢測。   血清前S1蛋白正常值:   前S1蛋

    什么是轉錄作圖?

    中文名稱轉錄作圖英文名稱transcription mapping定  義標明轉錄物序列在基因組上的位置。應用學科遺傳學(一級學科),基因組學(二級學科)

    什么是基因作圖?

    基因作圖(英文gene mapping)是一種遺傳學作圖,用來定位染色體中特定的DNA片段。是基因組研究的成果之一,主要分為以重組率為定位依據的遺傳輿圖,以及以DNA片段實際位置為依據的物理輿圖,兩這各有不同用途與優缺點。

    什么是RNA作圖?

    中文名稱RNA作圖英文名稱RNA mapping定  義對RNA分子在基因上的定位分析。將RNA與相應的DNA雜交后,用單鏈特異性核酸酶(常用的如S1核酸酶)切去不發生雜交的單鏈部分,用以分析RNA與相應DNA的關系,包括確定RNA的5′和3′端、外顯子和內含子在DNA上的相應位置等。應用學科生物化

    糖作圖的概念

    中文名稱糖作圖英文名稱carbohydrate mapping定  義利用各種分析方法(如層析、電泳、質譜、核磁共振等)研究糖的組成時所得到結果的圖示化。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    粒度分析的作圖

    粒度分析的結果,可按表6-3所示的格式整理,然后作出直方圖、頻率曲線圖、累積曲線圖和概率累積曲線圖(圖6-5,圖6-6)。圖的橫坐標表示顆粒大小,縱坐標表示百分數或累積百分數。直方圖是廣泛使用的一種粒度分布的圖解形式,以并排高低不同的矩形表示各粒級百分比。如果把每個矩形頂連點連接成一平滑曲線,即成頻

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