細胞培養基本技術概述（六）
抗生素 1. 細胞庫之細胞培養基不加抗生素 1.1. 培養自ATCC 引進之細胞株，培養基中不加抗生素。 1.2. 培養自其它實驗室引進之細胞株，制作token freeze 前培養基須添加抗生素，待token freeze 通過污染測試后，大量培養時則不加抗生素。 2. 寄送活細胞時，須將培養液充滿整個flask 時，則須添加抗生素(penicillin 100 units/ml +streptomycin 100 ug/ml)。 3. 若要檢測mycoplasma，則培養基內不可添加gentamicin，因gentamicin 會抑制mycoplasma 生長。 4. 去除細菌污染之抗生素混合配方: penicillin 250 units/ml, streptomycin 250 ug/ml, neomycin250 ug/ml, bacitracin 2.5 units/ml，注意混合使用后藥物毒性會增強。 5. 抗生素......閱讀全文
細胞培養基本技術概述（六）
抗生素 1. 細胞庫之細胞培養基不加抗生素 1.1. 培養自ATCC 引進之細胞株，培養基中不加抗生素。 1.2. 培養自其它實驗室引進之細胞株，制作token freeze 前培養基須添加抗生素，待token freeze 通過污染測試后，大量培養時則不加抗生素。 2. 寄送活細胞時，須將培養液充
細胞培養基本技術概述（三）
血清 ?1. 血清必須貯存于–20 ～ -70 oC，若存放于4 oC，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將40～45 ml 分裝于無菌50 ml 離心管中，由于血清結凍時體積會增加約10 %，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發生污染或容器凍裂之情形。 ?2. 一般廠商提供之血清為無菌，不需再
細胞培養基本技術概述（五）
實驗用品 1. 種類︰ 1.1. 細胞培養實驗用品均為無菌，除了玻璃容器與pasteur pipet 外，其它均為塑料無菌 制品。 1.2. TC 級培養盤表面均有coating 高分子物質以讓細胞吸附，培養容器種類有Tflask, plates, dishes, roller bottle 等，依
細胞培養基本技術概述（二）
培養基 ?1. 液體培養基貯存于4 oC 冰箱，避免光照，實驗進行前放在37 oC 水槽中溫熱。 2. 液體培養基(加血清) 存放期為六個月，期間glutamine 可能會分解，若細胞生長不佳，可以再添加適量glutamine。 ?3. 粉末培養基配制(以1 升為例)： ?3.1. 細胞培
細胞培養基本技術概述（一）
無菌操作基本技術 ?1. 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 %ethanol 擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失誤混淆或
細胞培養基本技術概述（七）
冷凍細胞活化 1. 冷凍細胞之活化原則為快速解凍，以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害，導致細胞之死亡。 2. 細胞活化后，約需數日，或繼代一至二代，其細胞生長或特性表現才會恢復正常(例如產生單株抗體或是其它蛋白質)。 3. 材料 3.1 37 oC 恒溫水槽 3.2 新鮮培養基 3.3 無菌吸管/
細胞培養基本技術概述（四）
細胞傳代培養 ?1. 細胞生長至高密度時，即須分殖至新的培養瓶中，一般稀釋比例為1:3 至1:6，依細胞種類而異。 ?2. 材料： ?2.1. 無菌磷酸生理緩沖液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline, Ca++/Mg++ free, D-PBS,GibcoBRL
概述細胞培養的基本原理與技術
現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術，而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系，特別是在醫藥領域的發展，細胞培養更具有特殊的作用和價值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產過程中很多是通過細胞培養來實現的。基因工程乙肝疫苗很多是以CHO細胞作為載體；細胞工程
細胞培養基本技術
實驗概要無菌操作基本技術?1. 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 % ethanol 擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失
細胞培養的基本技術
一、清洗新采用和重新使用的培養器皿，都要嚴格清洗，以防各種有害物質對培養細胞損害。培養用的塑料器皿目前主要依靠進口，均已無菌密封包裝，可直接使用。對于塑料瓶蓋或膠塞等，可水中浸泡后用2％NaOH煮沸10～20min，自來水中浸泡和蒸餾水漂洗2～3次，晾干備用。細胞培養中的絕大部分器皿系玻璃制品，清洗
實驗技術：細胞培養基本技術
一、操作規程：1.實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70％酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風機運轉10分鐘后,才可開始實驗操作.每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染.實驗結束后,將實驗物品帶出工作臺。如需要繼續進行下一個實驗,則用70％酒精擦拭無菌操作臺面,再
實驗技術：細胞培養基本技術
細胞培養 一、操作規程： 1.實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70％酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風機運轉10分鐘后,才可開始實驗操作.每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染.實驗結束后,將實驗物品帶出工作臺。如需要繼續進行下一個實驗,則用
概述動物細胞培養的基本過程
取動物胚胎或幼齡動物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個細胞，將處理后的細胞移入培養基中配成一定濃度的細胞懸浮液。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。當貼壁細胞分裂生長到互相接觸時，細胞就會停止分裂增殖，出現接觸抑制。此時需要將出現接觸
植物細胞培養（plant－cell－culture）技術概述
植物細胞培養技術就是為了某種目的而在細胞水平上對離體植物細胞或原生質體進行的一系列生物工藝學操作。它包括分離、培養、再生以及一系列相關的操作。就有用化合物的生產來說，它主要是指在無菌條件下通過懸浮培養植物細胞生產有用化合物的過程。理論與技術基礎：植物細胞全能性、微生物液體深層發酵系統、遺傳工程
真菌基本檢驗技術概述
真菌檢驗基本上可分為培養技術和非培養技術兩大類。非培養技術又分為顯微鏡檢查技術、生化免疫檢查技術和分子生物學技術。前者是直接觀察真菌形態，其中組織病理學檢查為侵襲性真菌感染診斷的金標準；后者是檢測真菌的抗原、抗體和核酸。這些技術的綜合使用可大大地提高侵襲性真菌感染診斷的準確性。圖1為常見的真菌檢驗技
細胞培養搖床概述
?細胞培養搖床特點如下：1、采用微電腦控制溫度和頻率，帶有定時功能，進口壓縮機和風扇，環保型制冷劑。2、箱體內膽及振動臺面均采用不銹鋼材料，便于清洗。3、隨意設定報警溫度，使樣品得到可靠保護。4、設有門開關：箱門開啟時系統停止工作，關閉時系統啟動。5、控制轉速的電路能確保搖床平穩啟動和停止，并能防止
細胞培養的基本原理與技術
現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術，而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系，特別是在醫藥領域的發展，細胞培養更具有特殊的作用和價值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產過程中很多是通過細胞培養來實現的。基因工程乙肝疫苗很多是以CHO細胞作為載體；細胞工程中更
細胞培養的基本方法細胞分離技術（二）
1.懸浮細胞 ●計數將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數生長期。以大約200～400g離心5分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。 ●以1×107到5×107細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養基中再次懸浮細胞，或者以0.5×107到1×107在無血清培養基中，再次懸浮細胞。 ●
細胞分離技術是細胞培養的基本方法
從原代組織中分離細胞 將組織塊分離（散）成細胞懸液的方法有多種，最常用的是機械解離細胞法、酶學解離細胞法以及螯合劑解離細胞法。從原代組織中獲得單細胞懸液的一般方法是酶解聚。細胞暴露在酶中的時間要盡可能的短，以保持最大的活性。下列步驟可以解聚整個組織，獲得較高產量的有活性細胞。1.胰蛋白酶 (Tryp
細胞培養的基本方法細胞分離技術（一）
細胞分離技術一、從原代組織中分離細胞 將組織塊分離（散）成細胞懸液的方法有多種，最常用的是機械解離細胞法、酶學解離細胞法以及螯合劑解離細胞法。從原代組織中獲得單細胞懸液的一般方法是酶解聚。細胞暴露在酶中的時間要盡可能的短，以保持最大的活性。下列步驟可以解聚整個組織，獲得較高產量的有活性細胞。1.胰蛋
懸浮細胞培養系統概述
懸浮細胞培養系統是一種用于水產學領域的分析儀器，于2018年11月30日啟用。 1技術指標 1、主體材質采用高硼硅酸鹽玻璃材質。2、頂蓋開口包含16個開口以上。3、可實現數據的傳輸，導出，打印，數據儲存，曲線比較，跟蹤。4、溶氧控制采用自適應PID控制模式。 2、主要功能 主要用于水產動
血型與輸血概述（六）
（二）Rh抗原及亞型 1．Rh抗原到目前已發現40多種Rh抗原，與臨床關系最密切為D、E、C、c\e種，這5種抗原中D的抗原性最強，對臨床吏為重要。雖然臨床習慣地稱含D抗原的紅細胞為Rh 陽性，不含D的為陰性，但從血清學角度看，Rh陰性只有一種，即ccdee。 正常紅細胞上每個Rh抗原位點數
微生物學檢驗基本技術（六）
二、沉淀反應可溶性抗原(如細菌的培養濾液、含細菌的患者血清、腦脊液及組織浸出液等)與相應抗體相混合，在比例適合和適量電解質的存在等條件下，形成肉眼可見的沉淀物，稱沉淀反應。利用沉淀反應進行血清學試驗的方法稱為沉淀試驗。沉淀反應有環狀、絮狀和瓊脂擴散法3種基本類型。1．環狀沉淀試驗將已知的抗血清加于內
細胞培養技術
實驗概要細胞培養是指從體內組織取出細胞摹擬體內出現環境，在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下，使期生長繁殖，并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物為單個細胞或細胞群。主要設備細胞培養設施和基本條件 1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染
細胞實驗技術及細胞培養基本知識3
三、神經膠質細胞培養神經細胞（神經元）不易培養，只有在適宜情況下，如接種在膠原底層上，或加入神經生長因子和膠質細胞因子時，可出現一定程度的分化，長出突起等現象，但很難使之增值。而神經膠質細胞是神經組織中比較容易培養的成分。人、鼠等腦組織即可用于神經膠質細胞培養，不僅能獲得生長的膠質細胞，也可形成能傳
代做實驗|細胞培養技術的基本原理
細胞培養是用酶消化法將組織碎塊分離成單個細胞，用培養基制成細胞懸液，在體外適宜條件下，使細胞生長繁殖，并保留其一定的結構和功能特性。細胞培養與組織培養、器官培養主要不同點在于原始培養的對象不同。細胞培養使用的是單個細胞懸液，組織培養使用的是組織塊（0.5~1立方毫米）或薄片（厚0.2毫米），而器官培
代做實驗|細胞培養技術的基本原理
細胞培養是用酶消化法將組織碎塊分離成單個細胞，用培養基制成細胞懸液，在體外適宜條件下，使細胞生長繁殖，并保留其一定的結構和功能特性。細胞培養與組織培養、器官培養主要不同點在于原始培養的對象不同。細胞培養使用的是單個細胞懸液，組織培養使用的是組織塊（0.5~1立方毫米）或薄片（厚0.2毫米），而
細胞實驗技術及細胞培養基本知識1
細胞培養技術細胞周期的測定一、原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。 單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法，但它不能代表細胞群體的周期，故現多采用其他方法測群體周期。 測定細胞周期的方法很多，有同位素標記法、細胞計數法
ncm460細胞細胞培養的基本技術（二）消毒
、消毒1. 包裝 器材經清洗烤干或晾干后，先應嚴格包裝，然后再行消毒滅菌處理，以防止消毒滅菌后再次遭受污染。包裝材料常用包裝紙、牛皮紙、硫酸紙、棉布、鋁飯盒、玻璃或金屬制吸管筒、紙繩等。2. 消毒 消毒滅菌隨物品的不同，而采用不同的方法。（1）紫外線：主要用于消毒實驗室空氣、工作臺面和一些不能使用其
細胞實驗技術及細胞培養基本知識2
（二）人類淋巴母細胞建株方法1、4ml肝素抗凝血于離心管中，加入2ml RPMI 1640。 2、混勻后沿管壁緩慢加到預置有4ml淋巴細胞分離液的液面上靜置30min。 3、1500rpm，15min，吸取白細胞層（第二層）于另一離心管中。 4、加RPMI 1640 5ml洗滌白細胞兩次。