多種β淀粉樣肽的SPE/LC/MS/MS定量測定方法(二)
質譜分析 質譜分析在正離子模式下進行,因為4+前體的CID產生了幾種與固有的特異性b序列離子相對應的不同產物離子(典型光譜如圖2所示)。負離子模式下的 MS/MS出現了明顯的水分流失。圖3給出了關于兩種方法特異性區別的一個示例。雖然對于溶劑標準品時使用負離子模式的總體靈敏度較高,但在基質存在時負離子模式的靈敏度優勢減弱,而正離子模式下的特異度和信噪比的提高對于腦脊液樣品中的準確定量具有決定性作用。 超高效液相色譜分析 圖4顯示了對這三種β淀粉樣肽的分離情況。雖然流動相中NH4OH的精確百分比對負離子靈敏度具有關鍵作用,但ESI+模式下的信號經證實對流動相構成的細微變化更具穩健性,可使液相色譜/自動取樣器至少在24小時以上的時間段中保持穩定。與此相反,50%或以上的ESI-信號在10-12小時后因流動相中NH4OH濃度的自然變化(揮發)而損失。這進一步強調了ESI+MS方法的穩健性。 固相萃取......閱讀全文
AD診斷標尺β淀粉樣肽(Aβ)純度標準物質出爐!
阿爾茨海默癥診斷標尺-β淀粉樣肽(Aβ)純度標準物質出爐!學者簡介:李紅梅:研究員,中國計量科學研究院化學所所長。享受國務院政府特殊津貼,全國“三·八”紅旗手榮譽稱號獲得者馮流星:研究員,中國計量科學研究院化學所無機化學研究室主任?????中國計量科學研究院李紅梅、馮流星團隊近期在Analytica
多種β淀粉樣肽的SPE/LC/MS/MS定量測定方法(二)
質譜分析 質譜分析在正離子模式下進行,因為4+前體的CID產生了幾種與固有的特異性b序列離子相對應的不同產物離子(典型光譜如圖2所示)。負離子模式下的 MS/MS出現了明顯的水分流失。圖3給出了關于兩種方法特異性區別的一個示例。雖然對于溶劑標準品時使用負離子模式的總體靈敏度較高
多種β淀粉樣肽的SPE/LC/MS/MS定量測定方法(一)
引言 β淀粉樣肽(Aβ)的不溶性聚集物在腦中沉積/形成被看作為早老性癡呆病(AD)的一個關鍵事件。治療策略集中于用以減少β淀粉樣肽生成或提高其清除水平的小分子抑制劑或免疫療法。因此,找到能對腦脊液中的淀粉樣肽進行高靈敏且穩定可靠的定量分析方法以確定其與AD關系對很多研究者來說至關重要。然而
用于腦脊液中多種β淀粉樣肽的SPE/LC/MS/MS定量測定方法-二
樣品預處理用5M鹽酸胍以1:1的比例稀釋200μL腦脊液(人腦脊液、猴腦脊液或加標人工腦脊液+5%大鼠血漿),并在室溫下振搖45分鐘。然后,用200μL 的4%H3PO4水溶液進一步稀釋樣品。?注意:對于加標樣品而言,在加標后、用鹽酸胍稀釋前,可在室溫下讓樣品平衡30分鐘。?固相萃取(SPE)基于μ
用于腦脊液中多種β淀粉樣肽的SPE/LC/MS/MS定量測定方法-三
線性、準確度和精確度對每種肽均使用了N15標記型內標。對于0.1-10ng/mL人工腦脊液+5%大鼠血漿的等分樣本,三種β淀粉樣肽的標準曲線均呈線性。β淀粉樣1-38肽的典型標準曲線如圖5所示。淀粉樣肽的基線水平根據同時使用過量加標的人腦脊液和“人工腦脊液+5%大鼠血漿”而得到的兩條標準曲線進行定量
用于腦脊液中多種β淀粉樣肽的SPE/LC/MS/MS定量測定方法-四
β淀粉樣1-38肽過量加標濃度ng/mL質控品濃度平均計算濃度標準偏差% CV重復檢測的合格次數平均準確度0.21.491.3550.07153/390.90.82.091.8430.11863/388.223.293.2870.319103/399.967.297.7010.47863/3105.
用于腦脊液中多種β淀粉樣肽的SPE/LC/MS/MS定量測定方法-一
Erin Chambers1、Mary E. Lame2、Diane M. Diehl2、Sarah Grimwood2和Yanhua Zhang31沃特世公司,美國馬薩諸塞州米爾福德,01757;2輝瑞制藥公司神經科學研究部,美國康涅狄格州格羅頓,06340;3輝瑞制藥公司PDM部,美國康涅狄格州
一種設計淀粉樣聚集肽的阻斷器的研究方法介紹
許多蛋白質含有僅在自締合或與相互作用伙伴結合時才變得有序的片段,例如淀粉樣蛋白Aβ42、tau蛋白、血清淀粉樣蛋白A1等蛋白質中發現的淀粉樣蛋白生成序列。這些區域可通過鏈-鏈相互作用聚集形成淀粉樣原纖維,并與中樞神經系統疾病相關。針對這些淀粉樣蛋白生成片段設計結合劑可用作診斷、治療和研究工具。盡管已
關于淀粉樣變病和淀粉樣關節病的簡介
淀粉樣變性(amyloidosis)是多種原因引起的一組臨床癥候群,不是一個臨床獨立病種,而是一組由組織結構推動的蛋白沉積病。本病最早由Wirchow于1854年發現,近20年來隨著淀粉樣物質從各種疾病患者的組織中提取,其相應的化學成分得以進一步分析及了解,診斷率亦顯著提高,實際上淀粉樣變病臨床
簡述淀粉樣變病和淀粉樣關節病的治療原則
淀粉蛋白形成機制的研究進展,為更有效治療系統性淀粉樣提了更多的理論基礎和治療策略(表4)。治療的主要目標是抑制致淀粉樣變前體蛋白的產生,增加其清除。已經證明這一方法,在這幾種類型的淀粉樣變(AL、AA和ATTR)是行之有效的。淀粉樣變的治療主要包括特異性治療(化療)和支持治療兩方面。
診斷淀粉樣變病和淀粉樣關節病的基本介紹
1.腎臟受累的鑒別 表現為蛋白尿者需與各種急性和慢性腎炎鑒別;表現為腎病者需與腎病綜合征,糖尿病腎病,紫癜腎病和腫瘤性腎病鑒別;表現為腎功能衰竭者需與各種慢性腎衰鑒別。 2.心臟受累的鑒別 主要與心肌病鑒別,特別是肥厚性心肌病,其他原因的心功能不全也要除外。 3.肝脾和消化道受累的鑒別 表現
簡述淀粉樣變病和淀粉樣關節病的癥狀體征
淀粉樣變的臨床表現多種多樣,主要取決于淀粉樣蛋白組織浸潤的分布,以及受累器官的功能障礙程度。 淀粉樣變的各系統損害表現 無論AL,AA還是其他類型的淀粉樣變,淀粉樣蛋白在組織的浸潤均可引起實質性細胞的損害和器官功能障礙,據文獻報道,淀粉樣變可累及心血管,腎臟,肺臟,胃腸道,肝臟,胰腺,脾臟,神
關于淀粉樣變病和淀粉樣關節病的病理介紹
淀粉樣物質主要是多糖蛋白復合體,其組織切片在光鏡下呈無定型的均勻的嗜伊紅性物質,用剛果紅染色偏光鏡下觀察可見特異的蘋果綠色熒光,電鏡下可見兩種不同的結構,主要成分為大小約10nm的原纖維,另一為切面呈五角形中空的桿狀物質(P成分),后者的化學物理特性在所有的淀粉樣變病中都是一致的,原纖維則由多
關于淀粉樣變病和淀粉樣關節病的診斷評析介紹
淀粉樣變較為少見,臨床表現多種多樣,容易漏診,因此提高對本病的認識和警覺性,熟悉本病的各種臨床表現顯得十分重要,詳細地采集病史和認真的體格檢查是正確診斷的第一步,有不明原因的腎病,心肌病,肝脾腫大,腕管綜合征,體重快速下降,巨舌,直立性低血壓,腸道吸收功能不良或眶周紫癜均要考慮本病,要仔細詢問
簡述淀粉樣變病和淀粉樣關節病的預防護理
1.消除和減少或避免發病因素,改善生活環境空間,養成良好的生活習慣,防止感染,注意飲食衛生,合理膳食調配。 2.注意鍛煉身體,增加機體抗病能力,不要過度疲勞,過度消耗,戒煙戒酒。 3.早發現早診斷早治療,樹立戰勝疾病的信心,堅持治療。
關于淀粉樣變病和淀粉樣關節病的檢查方法介紹
1.血常規及血沉 繼發性淀粉樣變病因原發病而異,可有輕度貧血,白細胞計數增加,血沉增快,原發性和家族型無異常改變,繼發于漿細胞病者,可見周圍血液有紅細胞串錢現象。 2.尿常規 有腎病者可見有蛋白尿,白細胞,紅細胞或管型。 3.免疫學檢查 血,尿的蛋白電泳和血清免疫球蛋白定量測定,若發現特殊的
簡述淀粉樣變病和淀粉樣關節病的并發癥
1.淀粉樣蛋白主要沉積在心肌和傳導系統,導致心臟舒張功能障礙,充血性心力衰竭和心律失常,包括傳導阻滯,房性和室性快速心律失常,淀粉樣蛋白在心室肌沉積引起心臟擴大,縮窄性心包炎,淀粉樣心肌病。 2.腎淀粉樣變的主要并發癥是腎病綜合征和腎功能衰竭。 3.單純性氣管支氣管結節性淀粉樣變:可有呼吸道
關于淀粉樣變病和淀粉樣關節病的病理病因分析
本病淀粉樣蛋白在血管壁及組織中的沉積原因尚不明確,各種細胞因子,生長因子及有關炎癥介質,可能起著一定的作用,蛋白沉積主要發生在細胞外,造成組織損傷和功能障礙。 1.AL淀粉樣變病 此類淀粉樣纖維蛋白是從免疫球蛋白輕鏈衍生而來,稱AL,分子量為500~2500 Dα,通常含有免疫球蛋白可變區(V
淀粉樣變性的診斷
根據上述描述的癥狀,體征可以對淀粉樣變性進行初診,只有依靠活檢才能確診。皮下腹脂肪墊抽吸術和直腸粘膜活檢是最常用的篩查方法,其他有用的活檢部位是牙齦,皮膚,神經,腎和肝臟。用剛果紅染色的組織在可極化顯微鏡下可觀察到淀粉樣變性的綠色雙折射特征,用同位素標記血清AP的閃爍試驗可以確診淀粉樣變性。
淀粉樣變性的病因
淀粉樣的產物和它在組織中沉積的原因尚不清楚,在不同的淀粉樣變性生化類型中,病因學機制可能會不同。例如,繼發性淀粉樣變性為蛋白前體的代謝障礙(急性期反應物血漿淀粉樣A),而遺傳性的淀粉樣變性會出現不同的蛋白,在原發性淀粉樣變性中,骨髓細胞的單克隆群會產生能形成淀粉樣變性的片段或整個長鏈,在光學顯微
淀粉樣變性的鑒別
現已普遍認識到三種主要的系統性臨床形式,當淀粉樣變性和疾病無關時,被稱為原發性或突發性(AL形)。當和慢性疾病有關時,被稱為繼發性。獲得性或反應性,這或為感染性(結核、支氣管擴張、骨髓炎、麻風)或為炎性(類風濕性關節炎、肉芽回腸炎),淀粉樣變性亦和多發性骨髓瘤,霍奇金病(AA),其他腫瘤及家族性
淀粉樣變性的鑒別
現已普遍認識到三種主要的系統性臨床形式,當淀粉樣變性和疾病無關時,被稱為原發性或突發性(AL形)。當和慢性疾病有關時,被稱為繼發性。獲得性或反應性,這或為感染性(結核、支氣管擴張、骨髓炎、麻風)或為炎性(類風濕性關節炎、肉芽回腸炎),淀粉樣變性亦和多發性骨髓瘤,霍奇金病(AA),其他腫瘤及家族性
淀粉樣變性的介紹
淀粉樣變性是由多種原因造成的淀粉樣物在體內各臟器細胞間的沉積,致使受累臟器功能逐漸衰竭的一種臨床綜合征。包括一組疾病。組織內有淀粉樣物質沉著稱為淀粉樣變性,也稱淀粉樣物質沉著癥。淀粉樣物質是蛋白樣物質,由于遇碘時,可被染成棕褐色,再加硫酸后呈藍色,與淀粉遇碘時的反應相似,故稱之為淀粉樣變性。淀粉
淀粉樣體指標解讀結果
正常: 可見,老年人易見到。 異常: 淀粉顆粒隨年齡而增加。如遇膽固醇結合即成前列腺結石。
淀粉樣變性的概述
由于蛋白代謝障礙出現一種生理上不存在的均質性蛋白性物質(淀粉樣物質amyloid)的疾病。淀粉樣物質有的出現于局部,但更多的是系統地出現于全身各種器官,特別是存在于脾臟、肝臟、腎臟等處的間質中,細胞雖因此受壓而萎縮,但并不出現細胞侵潤。 也稱為淀粉樣變。是指淀粉樣物質在某些器官的網狀纖維、血管
淀粉樣變性說明什么
淀粉樣變性,多提示機體有慢性疾病。比如慢性肝炎等疾病,可以導致機體的代謝障礙,出現淀粉樣物質沉積在肝臟等器官內的血管內或者是組織細胞內。進一步影響到肝臟等器官的功能,出現功能衰竭,嚴重的甚至可以危及生命。這種疾病目前沒有好的根治方法,主要是做好對癥處理,平時注意控制飲食,飲食中以高蛋白為主,需要
淀粉樣變性的診斷
根據上述描述的癥狀,體征可以對淀粉樣變性進行初診,只有依靠活檢才能確診。皮下腹脂肪墊抽吸術和直腸粘膜活檢是最常用的篩查方法,其他有用的活檢部位是牙齦,皮膚,神經,腎和肝臟。用剛果紅染色的組織在可極化顯微鏡下可觀察到淀粉樣變性的綠色雙折射特征,用同位素標記血清AP的閃爍試驗可以確診淀粉樣變性
淀粉樣變性的預防?
淀粉樣變性是一種疾病,由于蛋白質在人體內沉積而引起,目前還沒有針對淀粉樣變性的特定預防方法。但是,一些研究表明,以下措施可能有助于減少患淀粉樣變性的風險: 控制高血壓和糖尿病等慢性疾病,這些疾病與淀粉樣變性有關。 避免長期接觸某些有害物質,如重金屬、有機溶劑等。 保持健康的生活方式,包括均
淀粉樣體檢查過程
1、患者應排空大便,然后在床上取膝胸位或側臥位,施術者右手示指帶指套或乳手套,也可用避孕套代替,搽少量凡士林或石蠟油在指套上,操時先在肛門周圍按摩幾下,促使肛門肌肉放松, 2、然后將示指慢慢人肛門,指腹向下,在其下方大約3—4cm處可捫及栗子大小的列腺,中央有一淺溝。在前列腺兩側葉自外上方向內
怎樣診斷淀粉樣變性?
根據上述描述的癥狀體征可以對淀粉樣變性進行初診,只有依靠活檢才能確診,皮下腹脂肪墊抽吸術和直腸黏膜活檢是最常用的篩查方法,其他有用的活檢部位是牙齦、皮膚、神經、腎和肝臟。用剛果紅染色的組織在可極化顯微鏡下可觀察到淀粉樣變性的綠色雙折射特征。用同位素標記血清AP的閃爍試驗可以確診淀粉樣變性。