SSR標記實驗步驟
一、簡介：SSR簡單序列重復標記（Simple sequence repeat, 簡稱SSR標記），也叫微衛星序列重復，是由一類由幾個核苷酸（1-5個）為重復單位組成的長達幾十個核苷酸的重復序列，長度較短，廣泛分布在染色體上。由于重復單位的次數的不同或重復程度的不完全相同，造成了SSR長度的高度變異性，由此而產生SSR標記或SSLP標記。雖然SSR在基因組上的位置不盡相同，但是其兩端序列多是保守的單拷貝序列，因此可以用微衛星區域特定順序設計成對引物，通過PCR技術，經聚丙烯酰胺凝膠電泳，即可顯示SSR位點在不同個體間的多態性。優點：（1）標記數量豐富，具有較多的等位變異，廣泛分布于各條染色體上；（2）是共顯性標記，呈孟德爾遺傳；（3）技術重復性好，易于操作，結果可靠。缺點：開發此類標記需要預先得知標記兩端的序列信息，而且引物合成費用較高。二、操作程序：取葉片→磨樣→提取DNA→PCR擴增→電泳檢測→染色→讀帶標記。1、DNA提取......閱讀全文
RNA標記
RNA標記是將標記物（如放射性同位素、熒光素或酶）共價地連接到RNA，通過檢測標記物，進而實現對RNA鑒別和檢測的目的。RNA標記在分子探針領域應用廣泛，在疾病診斷方面也很有前景。 理想的RNA標記方法應符合以下要求： 1. ?操作簡單，靈敏度高 2. ?不影響堿基配對的特異性 3. ?不影響RN
DNA標記
DNA標記（主要內容如下）??DNA Labeling by Nick Translation??Random Primed Labeling??End-Labeling??Purification of Labeled DNA??Non-isotopic Labeling??OthersDNA L
分子標記
內容：一、遺傳標記?二、DNA分子標記?三、染色體原位雜交?四、DNA分子標記的應用?長期以來，植物育種中選擇都是基于植株的表型性狀進行的，當性狀的遺傳基礎較為簡單或即使較為復雜但表現加性基因遺傳效應時，表型選擇是有效的。但水稻的許多重要農藝性狀為數量性狀，如產量等；或多基因控制的質量性狀，如抗性等
RAPD和ISSR技術
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(Random amplified polymorphic DNA ，隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的方式以及快
RAPD和ISSR技術
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為 RAPD(Random amplified polymorphic DNA ，隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的
RAPD和ISSR技術
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(Random amplified polymorphic DNA ，隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的方式以及快
如何使用戶的驅動電路與SSR的輸入特性相匹配
一般來講，SSR的輸入控制電壓為3.2—32V。控制電流為5—30mA. 通常1—25A的SSR輸入回路不是恒流源電路，輸入控制電壓為4—16V。控制電流為5—20mA.較大額定電流的SSR輸入電路均接有恒流源電路。輸入控制電壓在3.2—32V均可。在三相電路里，如果用戶將三個SSR的輸入端串聯
關于微衛星標記的相關特點介紹
SSR 操作簡單,僅需微量組織,即可使DNA 降解,進行有效地分析鑒定。其標記帶型簡單,記錄條帶一致,客觀明確,PCR 技術的利用,使微衛星標記技術實現操作自動化。 與其它標記技術相比,具有以下特點：首先,在每個微衛星DNA 兩端的序列多是相對保守的單拷貝序列,尤其在親緣關系相近的物種間是保守
ISSR分子標記的實驗原理及操作流程
ISSR（inter-simple sequence repeat）標記是一種類似RAPD，但利用包含重復序列并在3’或5’錨定的單寡聚核酸引物對基因組進行擴增的標記系統，即用SSR引物來擴增重復序列之間的區域。其原理具體是，ISSR標記根據生物廣泛存在SSR的特點，利用在生物基因組常出現的SSR本
DNA分子標記技術研究進展（二）
2．第二代分子標記2.1 SSR標記技術??? 在真核生物基因組中存在許多非編碼的重復序列，如重復單位長度在15～65個核苷酸的小衛星DNA(Minisatellite DNA)，重復單位長度在2～6個核苷酸的微衛星DNA(Microsatellite DNA)。小衛星和微衛星DNA分布
武漢植物園在高羊茅耐高溫功能性狀關聯分析中取得新進展
高羊茅（Festuca arundinacea）又名葦狀羊茅，隸屬禾本科，是主要的冷季型牧草和草坪草，是我國使用量增長最快的優良草種，在我國北部及長江流域氣候過渡區廣泛建植應用。高羊茅地上部最適宜生長溫度是15-24℃，根系為10-18℃。近年來我國一些地區夏季經常出現異常高溫天氣，極端溫度達到
微衛星DNA分子標記及其應用（二）
3. 微衛星分子標記技術的應用 微衛星DNA 作為遺傳標記具有很大的優越性。近年來隨著研究的不斷深入,對微衛星標記的研究不僅具有重要的理論意義, 而且還具有較好的應用前景。3.1 微衛星多態性分析在自然界中,生物個體表現出來的各種遺傳變異,在本質上就是DNA 的差異,因此通過研究DNA的變異來分
花葉芋葉片關聯分析和葉綠體基因組研究獲進展
廣東省農業科學院環境園藝研究所特色花卉研究室在花葉芋葉片重要觀賞性狀關聯分析和葉綠體基因組研究方面取得新進展。相關研究分別發表于Physiologia Plantarum和Genes。 花葉芋（Caladium）是天南星科花葉芋屬多年生草本植物，被譽為“觀葉皇后”。花葉芋資源豐富，表型性狀變異豐
免疫標記技術常用的標記物介紹
常用的標記物有熒光素、酶、放射性核素及膠體金等。免疫標記技術具有快速、定性或定量甚至定位的特點，是應用最廣泛的免疫學檢測技術。 常用的免疫熒光素主要有： 1 ．異硫氰酸熒光素 (FITC) ，最大吸收光譜為 490~495nm ，最大發射光譜為 520~530nm ，呈黃綠色熒光。 2 ．
海洋所成功構建裙帶菜高密度遺傳連鎖圖譜
日前，中國科學院海洋研究所成功構建裙帶菜高密度遺傳連鎖圖譜，將為我國重要創匯水產品裙帶菜的品種選育提供重要的遺傳學研究工具。 海洋所海藻種質庫科研團隊以子一代單倍體克隆培養系為作圖群體，利用SLAF-seq技術構建了國際上第一張裙帶菜遺傳圖譜，并對性別決定位點進行了定位。該圖譜由30個連鎖群組
核酸探針標記
實驗概要核酸探針根據核酸的性質，可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針。實驗原理分子生物研究中，最常用的探針即為雙鏈DNA探針，它廣泛應用于轉基因
酶標記抗體
酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗體和酶標記SPA等。酶標記物質量的好壞直接關系到免疫酶技術的成功與否，因此被稱為關鍵的試劑。酶標記物中最常用的是酶標記抗體，它是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成。酶標記抗體的質量主要取決于純度好、活性強及親和力高的酶和抗體，其次要有良好的制備方法。目前，高質量的酶(
抗體標記方法
Biotinylation of Antibody?( Contributed by?Nanci Donacki)??Antibody labeling?(House Ear Institute)Labeling protocols using affinity markers.??Coupling
影響發光劑標記技術中標記的因素
影響標記的因素:1.發光劑的選擇。2.被標記蛋白質的性質：選用較高的純度和免疫學穩定性的抗原進行標記;抗體作為被標記物時，則要求具有較高的效價，應用提純的IgG來代替全血清。3.選擇正確的標記方法。4.原料比：IgG：發光劑：交聯劑的克分子比(mol:mol:mol)會影響結合物的發光效率。5.標記
免疫球蛋白標記技術_酶標記抗體
免疫標記技術是用特定的物質標記抗原或抗體進行的抗原抗體反應。可借助各種儀器觀察結果或進行自動化測定，可在細胞、亞細胞、超微結構及分子水平上，對抗原抗體反應進行定性和定位研究；或應用各種液相和固相免疫分析方法，對液體中的抗原、半抗原或抗體進行定性和定量測定。實驗方法原理酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗
末端標記法介紹DNA探針的標記方法
末端標記法不是將DNA進行全長標記，只在其5'端或3’端導入標記物進行部分標記。該標記方法可得到全長DNA探針，因為攜帶的標記分子較少，所以標記比活性不高。
免疫熒光標記為什么不直接標記一抗而標記二抗
因為一種一抗只識別一種底物，如果每種一抗都需要熒光標記，那這樣成本很高。而二抗既可以和一抗結合，又帶有可以被檢測出的標記（如帶熒光、放射性、化學發光或顯色基團），作用是檢測一抗，提高了通用性。一抗是針對抗原的抗體，二抗是針對一抗的抗體，即抗體也可以充當抗原刺激機體產生抗體。一抗二抗都是一種可以特異結
煙草所填補烤煙烘烤特性遺傳分析研究空白
近日，中國農業科學院煙草研究所和山東省煙草公司共同承擔的中國煙草總公司科技重點項目“烤煙烘烤特性遺傳分析及QTL定位研究”通過了由國家煙草專賣局科技司組織的項目鑒定。 鑒定委員會認為，該項目在烤煙烘烤特性遺傳效應、高密度分子遺傳連鎖圖譜構建、QTL定位及分子標記的挖掘與驗證等方面取得了創新性成
牧草DNA指紋圖譜應用前景看好
牧草品種的真假和種子質量的優劣直接關系到草業生產安全、農民增收和農(牧)區社會穩定。隨著農牧業生產對優良牧草品種需求的提高，每年進入市場的育成牧草新品種數量也在快速增加，各種優良牧草品種越來越受到青睞，種植面積越來越大。而一些不法商家在利益驅動下，在種子生產經營過程中以假亂真、以次充好，坑農害農
微衛星標記法的特點
與其它標記技術相比，具有以下特點：首先，在每個微衛星DNA?兩端的序列多是相對保守的單拷貝序列，尤其在親緣關系相近的物種間是保守的，而且在一些緊密相關的物種中其重復單位和重復次數具有一定的相似性。其次，這些小的、串聯排列的重復序列經常是通過核苷酸鏈的滑動錯配或者其它未知的過程來改變它們的長度,從而導
非熒光標記的遺傳標記分析技術
近年來，美國GENTEON公司采用激光致導的動態熒光檢測技術（Dynamic fluorescence），結合多通道毛細管電泳技術，研制出Capella 400型全自動基因分析系統。該儀器采用動態熒光檢測技術，徹底消除了傳統熒光DNA標記檢測的高成本和復雜性，可精確有效到檢測未經標記的單鏈或雙鏈核苷
放射性標記化合物的標記方法
放射性標記化合物的常用標記方法有化學合成法、同位素交換法和 生物化學法。通常是根據所需標記化合物的組成、結構及應用要求來選擇合適的放射性核素，然后再根據可提供的含有所需放射性核素的原料，結合應用要求來設計其標記路線。原料的物理化學性質不同，所采用的標記路線也不同（見放射性標記方法）。常用于標記的放射
北京林業大學棗樹遺傳育種研究成果豐碩－獲新品種授權
近日，一個名為“京林一號棗”的新品種誕生，成為北京林業大學棗樹遺傳育種項目組取得的眾多具有顯示度的新成果之一。項目組與河北省滄縣國家棗樹良種基地合作，選育出的這個三倍體棗新品種已經獲得了植物新品種授權。 據悉，這一新品種有眾多的顯著優點。它的果實大，平均單果重為24.08克，最大果重29.8克
微衛星DNA分子標記及其應用
微衛星（Microsatellite，MS）又稱短串聯重復（Short Tandem Repeats，STR）或簡單序列重復（Simple Sequnce Repeat，SSR），是指基因組中以少數幾個核苷酸（多數為2-4個）為單位多次串聯重復組成的長達幾十個核苷酸的序列。其中最常見的是雙核苷酸
概述顯性標記的應用范圍
所以，共顯性標記，在揭示遺傳多樣性方面要比顯性標記具有更大的優勢。更為重要的是，SSR引物是以外顯子保守序列為引物結合點，即以已知DNA序列為基礎所開發的引物，在基因組上具有特定的位置，所以在QTL等分析上，應用極為廣泛。 共顯性：說白了就是可以分辨出純和的跟雜合的