RAPD技術應用中的一些問題及對策
摘要：綜述了RAPD技術的一些理論性問題，包括RAPD與其它分子標記技術相比的優點，影響結果重復性的因素，顯性標記產生的原因，條帶取舍的標準等。提出在實驗中解決這些問題的一些方法：嚴格控制反應條件，采用單倍體和單劑量標記，系統學研究中要結合其它方法進行分析，定位基因時要選用合適的群體等。 1 RAPD技術原理及特點 1．1原理RAPD（Random Amplified Polymorphic DNA），即隨機擴增多態性DNA技術，是由美國科學家Wiliams和Welsh于1990年分別研究提出的，又稱任意引物PCR。它的應用是基于這樣的一個推理：對于同一模板DNA，用同一引物擴增既可能得到相同的帶譜（模板基因組間可能具有同源性），也可能得到不同的帶譜。僅在某一特定模板中出現的條帶就可作為該模板的分子標記。事實上，不同基因組DNA總是一定差異的，所以用RAPD就可以進行分子標記研究。理論上講，在一定的擴增條......閱讀全文
RAPD技術應用中的一些問題及對策
摘要：綜述了RAPD技術的一些理論性問題，包括RAPD與其它分子標記技術相比的優點，影響結果重復性的因素，顯性標記產生的原因，條帶取舍的標準等。提出在實驗中解決這些問題的一些方法：嚴格控制反應條件，采用單倍體和單劑量標記，系統學研究中要結合其它方法進行分析，定位基因時要選用合適的群體等。?1 RAP
RAPD技術
實驗概要RAPD(Random ?Amplified Polymorphic ?DNA,隨機擴增的多態性DNA)是建立于PCR實驗基礎上的檢測基因組DNA多態性的實驗技術。從1990年Williams首次應用該技術到今，短短幾年間，該技術由于具有快速、簡便、耗資相對較少，所需設備較少的特點，因此發展
RAPD分析的原理及操作技術
1 目的分子標記是一類建立在分子水平上的遺傳標記，它同樣具有遺傳標記的兩個特點，即可遺傳性和可識別性。廣義的分子標記包括同工酶和DNA分子標記兩類，狹義的分子標記則僅指后者。DNA分子標記通常是一些小分子量的DNA片段（幾十到2000bp左右），它們大量存在于真核生物的基因組內，能夠通過特定的技術和
RAPD和ISSR技術
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(Random amplified polymorphic DNA ，隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的方式以及快
RFLP和RAPD技術
RFLP和RAPD技術概 述? DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種（個體）基
RAPD和ISSR技術
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(Random amplified polymorphic DNA ，隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的方式以及快
RAPD和ISSR技術
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為 RAPD(Random amplified polymorphic DNA ，隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的
RAPD分析技術2
（2）擴增結果差，條帶模糊或難以辨認。――更換Taq聚合酶緩沖液。――檢查引物（使用另外一個引物，或者將引物末端標記，在 16% 6mol/L尿素聚丙烯酰胺膠上電泳檢測）。――檢查Taq聚合酶活性（與不同批量的酶作比較）。――改變DNA濃度。（3）高相對分子質量產物彌散狀分布>4kb。――降低DNA
RAPD標記技術
實驗概要運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(randomly ?amplifiled polymorphic ?DNA,隨機擴增的多態性DNA.)該RAPD技術建立于PCR基礎上，它是利用一系列(通常數百個)不同的隨機排列堿基順序的寡聚核苷酸單鏈(通常為十聚體)
RAPD分析技術1
1 導論聚合酶鏈式反應（PCR）以其優越性極大地影響到了分子生物學的幾乎所有領域，并以其基本程序和DGGE（denaturing gradient gel electrophoresis），開發出多種檢測核苷酸變異的方法。 RAPD（Random Amplifed Polymorphic D
植物RAPD分析技術
RAPD（Randomly Amplified Polymorphic?DNA），意為隨機擴增多態性DNA，是利用PCR技術進行隨機擴增，把擴增的DNA片段進行瓊脂糖凝膠電泳，根據DNA條帶的多態性來反應模板DNA序列上的多態性。RAPD同AFLP、SSR等分子標記一樣都基于PCR擴增，只是RAPD
RFLP技術和RAPD技術3
一個較為詳細的遺傳連鎖圖譜不僅對該物種的遺傳學基礎研究有重要意義，同時對該物種的育種研究也很有幫助。Potlethwait和Stephen 等用RAPD技術進行斑馬魚遺傳連鎖圖譜的制作。Liu把RAPD技術應用到鯰魚基因圖譜研究中。孫效文等建立了鯉魚的遺傳連鎖圖譜。圖譜有RAPD分子標記56個，
RFLP技術和RAPD技術1
第一節 概 述DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism，限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種（個體）基因組的限制性內切
RFLP技術和RAPD技術2
第三節 RAPD技術一、 材料不同來源的DNA(50ng/ul)。二、設備PCR儀，PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管，電泳裝置。三、試劑1、隨機引物(10mer) (5umol/L)：購買成品。2、Taq酶：購買成品。3、10xPCR 緩沖液：配方見第八章。4、MgCl2 ：25mm
RAPD標記技術的原理
RAPD標記（Random amplifiedpolymorphim DNA , RAPD）是由美國人Williams和Welsh等于1990年利用PCR技術發展起來的一種DNA多態性標記。它是利用隨機引物對目的基因組DNA進行PCR擴增，產物經電泳分離后顯色，分析擴增產物DNA片段的多態性，此即反
RAPD
一、 材料 不同來源的DNA(50ng/ul)。二、設備 PCR儀，PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管，電泳裝置。三、試劑 1、隨機引物(10mer) (5umol/L)：購買成品。 2、Taq酶：購買成品。 3、10xPCR 緩沖液：配方見第八章。 4、MgCl2 ：25
酶在應用中可能出現的問題與對策
1、可能出現的問題天然酶具有高效而且高度專一的催化特性,并已廣泛應用于各個領域,但它并非完善無缺,這主要體現在如下幾方面:①酶的活性專一性和作用最適條件常不能適應生產工藝的要求[2];②酶是蛋白質,容易變性失效,一般經不起高溫、強堿、強酸、有機溶劑以及時間等的考驗[2];③酶的生產成本高,不易運輸和
酶在應用中可能出現的問題與對策
1、可能出現的問題 天然酶具有高效而且高度專一的催化特性,并已廣泛應用于各個領域,但它并非完善無缺,這主要體現在如下幾方面:①酶的活性專一性和作用最適條件常不能適應生產工藝的要求;②酶是蛋白質,容易變性失效,一般經不起高溫、強堿、強酸、有機溶劑以及時間等的考驗;③酶的生產成本高,不易運輸和保存;④
超純水中TOC由來及應用對策
超純水是眾多工業需要的生產原料及產品清洗用水，本文將針對在制備超純水過程中，超純水存在的TOC由來以及解決措施進行介紹。超純水中存在的TOC由來1)原水：地表水中TOC含量很高，一般在1~2mg/L或更高，難于用其制備TOC
超純水中TOC由來及應用對策
超純水是眾多工業需要的生產原料及產品清洗用水，本文將針對在制備超純水過程中，超純水存在的TOC由來以及解決措施進行介紹。超純水中存在的TOC由來1)原水：地表水中TOC含量很高，一般在1~2mg/L或更高，難于用其制備TOC
RFLP和RAPD技術原理和操作步驟
原理：DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種（個體）基因組的限制性內切酶的酶切位點
淺談河道綜合治理中的問題及對策
引言 隨著我國城鎮化發展進程的持續性加快，城市當中人口數量不斷增多，同時污染廢水的排放也在隨之提升，如果無法及時對這一些污染物形成有效控制，必然會導致城市污染問題的持續加重，最終影響城市居民的生活質量以及城市形象。對此，在城市發展進程中，河道的綜合治理工作顯得非常重要，屬于文明城市、和諧社會建
電子天平使用中存在的問題及對策
電子天平是通過作用于物體上的重力來確定該物體質量，并采用數字指示輸出結果的計量器具。使用方便快捷，廣泛應用在工業生產，食品安全，醫療衛生，以及貿易結算等領域。秤量的準確性直接影響著數據結果的準確性，因而操作人員的正確使用對確保數據結果的準確性非常關鍵，在實際檢測工作中，最常見存在的問題有以下幾方
RAPD分子標記的實驗原理及操作流程
RAPD標記RAPD技術的全稱是隨機擴增多態性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)，此技術建立于PCR基礎之上，使用一系列具有10個左右堿基的單鏈隨機引物，對基因組的DNA全部進行PCR擴增，以檢測多態性。由于整個基因組存在眾多反向重復序列，因此須對每一隨機
我國環境監測技術存在的問題及對策
當前，隨著我國社會經濟的高速發展，環境問題逐漸凸顯，受到社會和人們的普遍關注，我國為了充分了解和掌握環境的當前狀況，采用了多種監測技術，動態跟蹤環境實際情況。但是在應用環境監測技術的同時，也存在一些問題，本文針對這些問題進行分析和闡述，并且提出相關對策，確保監測技術的可行性以及合理性，希望給予行
RAPD操作要點
一、 材料 不同來源的DNA(50ng/ul)。? 二、設備? PCR儀，PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管，電泳裝置。? 三、試劑? 1、隨機引物(10mer) (5umol/L)：購買成品。? 2、Taq酶：購買成品。? 3、10xPCR 緩沖液：配方見第八章。 4
單抗腹水制備過程中遇到的問題及對策
1，腹水少或者無腹水產生①致敏不正確，不正確的使用致敏劑，或者致敏時間與接種雜交瘤的時間相差太久，一般是7-14天，具體看小鼠的腹部情況。②雜交瘤細胞或者致敏劑的接種位置不正確，沒有打到腹腔，而是打到了皮下。③接種的雜交瘤細胞數量太少，太多或者細胞狀態不好。一般不50萬個細胞左右為宜。④建議使用母鼠
我國食品檢測體系中的問題及對策分析
摘要：我國的食品檢測主要要根據國家法律法規的相關規定對食品的衛生、質量指標等進行系統的檢測與評估，包括對食品進行質量安全檢測、市場監管和生產基地、產品貿易的監管等方面，因此，食品檢測需要有一定的技術支撐。本文主要論述食品檢測體系中存在的問題并對解決對策進行相關的討論，為完善我國食品檢測體系出謀劃
離心技術種類及在檢驗中的應用
離心技術在生化檢驗中的應用主要有兩方面：①對懸浮液中顆粒的分離，如從全血中分離血清、血漿等；②分離兩種密度不同液相，如從有機溶劑和水的混合物中分離出有機相等。1.普通離心法可用來分離細胞、細胞膜或細胞碎片。2.差速離心法（差級離心法）其原理是交替使用低速或高速離心，也可采用逐漸增加離心速度的辦法，通
離心技術種類及在檢驗中的應用
離心技術在生化檢驗中的應用主要有兩方面：①對懸浮液中顆粒的分離，如從全血中分離血清、血漿等；②分離兩種密度不同液相，如從有機溶劑和水的混合物中分離出有機相等。1.普通離心法可用來分離細胞、細胞膜或細胞碎片。2.差速離心法（差級離心法）其原理是交替使用低速或高速離心，也可采用逐漸增加離心速度的辦法，通