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  • 發布時間:2021-03-29 18:41 原文鏈接: 離心技術種類及在檢驗中的應用

    離心技術在生化檢驗中的應用主要有兩方面:

    ①對懸浮液中顆粒的分離,如從全血中分離血清、血漿等;

    ②分離兩種密度不同液相,如從有機溶劑和水的混合物中分離出有機相等。

    1.普通離心法

    可用來分離細胞、細胞膜或細胞碎片。

    2.差速離心法(差級離心法)

    其原理是交替使用低速或高速離心,也可采用逐漸增加離心速度的辦法,通過不斷增加相對離心力使一個非均勻混合液內的大小、形狀不同的粒子分部沉淀。

    適合分離大小和密度差異較大的顆粒。

    由于分辨率不高,常用于定性分離手段之前的粗制品提取。

    3.密度梯度離心法

    該法具有很高的分辨率,可以同時使樣品中的各個組分得到分離。

    做法:將樣品放在密度梯度介質中進行離心。

    常用的梯度材料有蔗糖、甘油、KBr、CsCl等。

    此法可分為:速率區帶離心法;等密度區帶離心法。

    (1)速率區帶離心法

    根據分離的粒子在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內分成一系列區帶,達到彼此分離的目的。

    一般用于分離大小相異而密度相同的物質。

    (2)等密度區帶離心法

    離心前預先配制介質的密度梯度,待分離的樣品鋪在梯度液頂部或與梯度液混合,當梯度液由于離心力作用逐漸形成底濃而管頂稀的密度梯度,同時,原來分布均勻的粒子也發生重新分布。

    此法常用于分離大小相似而密度差異較大的物質。

    4.分析性超速離心

    主要是為了研究生物大分子的沉降特性和結構,如測定大分子的相對分子量、生物大分子的純度估計、分析生物大分子中的構象變化等。


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