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  • 辛酸提取法純化多克隆抗體

    該法可用于分離提取人、兔、小鼠血清中的Ig及雜交瘤誘生的腹水和培養上清液中McAb。 【材料和試劑】 (1)正辛酸。 (2)60mmol/L,pH4.0醋酸緩沖液,PBS。 (3)透析袋。 (4)高速低溫離心機。 【操作步驟】 (1)將待提取樣品用60mmol/L,pH4.0醋酸緩沖液稀釋3~4倍,調pH至4.5,對含脂質較高的標本可采用二氧化硅粉或玻璃纖維吸附法除去脂質。 (2)在室溫下邊攪拌邊緩慢加入正辛酸,按每ml樣品中加25μl,若樣品體積小于5ml,則每ml樣品內加入30μl正辛酸,攪拌30min。 (3)10 000×g離心30min,取上清液通過定性濾紙過濾,裝人透析袋,用20倍體積的PBS,4℃透析過液,中間換液3~4次。 (4)然后每毫升混合液加0.27g硫酸銨,攪拌30min。 ......閱讀全文

    辛酸提取法純化多克隆抗體

    該法可用于分離提取人、兔、小鼠血清中的Ig及雜交瘤誘生的腹水和培養上清液中McAb。  【材料和試劑】?  (1)正辛酸。?  (2)60mmol/L,pH4.0醋酸緩沖液,PBS。?  (3)透析袋。?  (4)高速低溫離心機。?  【操作步驟】  (1)將待提取樣品用60mmol/L,pH4.0

    多克隆抗體純化實驗_辛酸提取法

    辛酸提取法可用于分離提取人、兔、小鼠血清中的Ig及雜交瘤誘生的腹水和培養上清液中McAb。實驗材料動物血清樣品試劑、試劑盒正辛酸醋酸緩沖液PBS儀器、耗材透析袋高速低溫離心機實驗步驟一、材料和試劑?1. ? 正辛酸?2. ?60 mmol/L,pH4.0醋酸緩沖液,PBS?3. ?透析袋?4. ?高

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    該法提取IgG簡便,既可小量提取,也可大量制備。?1.批量提取法 稱取DEAE-纖維素(DE32或DE52)50g,置于1000ml燒杯中,先以蒸餾水漂浮除去細顆粒,再經酸堿處理后,用0.01~0.05mol/L,pH8.0左右的磷酸鹽緩沖液(PB)平衡。將水分抽干,或用布氏濾斗(內放兩層

    DEAESephadex-A50提取法純化多克隆抗體

    DEAE-Sephadex A-50(簡稱A-50)為弱堿性陰離子交換劑,經過NaOH處理將Cl-型轉為OH-型后,可吸附酸性蛋白。γ1球蛋白屬中性蛋白,等電點為pH6.85~7.5,其余均屬酸性蛋白。在溶液為pH8.0時,酸性蛋白均被A-50 吸附。從而可分離純化IgG。?? ? 1. 批

    多克隆抗體純化實驗

    實驗材料 動物血清樣品試劑、試劑盒 正辛酸醋酸緩沖液PBS儀器、耗材 透析袋高速低溫離心機實驗步驟 一、材料和試劑?1. ? 正辛酸?2. ?60 mmol/L,pH4.0醋酸緩沖液,PBS?3. ?透析袋?4. ?高速低溫離心機?二、操作步驟?1. ?將待提取樣品用60 mmol/L,pH4.0醋

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    由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體。主要用于(1)批量提取多個抗體(2)為進一步驗證抗體的作用進行基礎操作。實驗方法原理由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗

    抽提萃取法展望

    展望編輯萃取作為分離和提純物質的重要單元過程,今后還會得到進一步的發展,其主要發展方向是:(1)研究新的萃取體系和新的萃取工藝;(2)合成和篩選高效萃取劑;(3)研究與發展新型萃取設備,重點應放在設備的自動化、連續化上;(4)開展萃取機理及理論的研究。?[2]?

    多克隆抗體的純化方法都有哪些

    純化抗體的方法較多,建議用蛋白A或蛋白G微球純化法作為最常用的方法。這種方法效率高,能為常用的實驗方法提供足夠純化的抗體,而且隨著商品化的蛋白A,和蛋白G基質的出現,能將任何來源的抗體純化。抗體的純化也可采用傳統的色譜法,在某些情況下非常有用。這些方法包括DEAE離子交換色譜法、硫酸鍍沉淀法及其他方

    親和層析法(affinity-chromatography)純化多克隆抗體

    【實驗原理】如圖所示,親和層析的高度選擇性使得從某一初始材料中純化,富集某一含量較低的目的蛋白成為可能,因此親和層析是蛋白質分離純化過程中最有效的方法之一。另外,如果配基與蛋白質的親和能力很強,也可同時進行樣品的濃縮。 雖然多數情況下不需要將抗體與其他血清蛋白分開,但如果一旦需要,蛋白A親和層析

    辛酸硫酸銨法從人血清中純化IgG

    一、實驗目的1、初步掌握從血清中提取純化IgG的方法步驟。2、了解辛酸-硫酸銨法純化IgG 的原理。二、實驗原理辛酸-硫酸銨法分兩步進行。第一步用辛酸沉淀雜蛋白,辛酸為短鏈脂肪酸,在酸性條件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白質;第二步利用硫酸銨鹽析將Ig沉淀下來,操作步驟如圖3-10所示。

    質粒DNA的抽提與純化

    目的 : 采用堿變性法,學習小規模制備質粒DNA的技術原理 : 堿變性抽提質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH值高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會完

    鹽湖提鋰的方法溶劑萃取法介紹

    老鹵脫硼后,加入FeCl3溶液形成LiFeCl4,用磷酸三丁酯(TBP)-煤油萃取體系將LiFeCl4萃取至有機相,形成LiFeCl4+2TBP萃取絡合物,酸洗、鹽酸萃取。經蒸發濃縮、焙燒、浸出、除雜,可得到無水氯化鋰,最后加入碳酸鈉生成碳酸鋰。該方法的優點是適用于從鎂鋰比相對較高的鹽湖鹵水中提取鋰

    多克隆抗體的制備、純化及免疫電泳2

    ⒊ 注射抗原?⑴ 準備兩只成年兔,將100μg抗原/兔溶入1ml磷酸緩沖溶液中待用。在1ml福氏不完全佐劑中加入分枝桿菌制成完全佐劑,并加入1ml抗原溶液,劇烈震蕩使之充分乳化,用3ml注射器抽取該乳化液,接上25G針頭,排除注射器中的氣泡。從籠中取出兔子放在平坦處,在4個不同的部位進行皮下注射

    多克隆抗體的制備、純化及免疫電泳1

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    關于索氏提取法抽提試劑的選擇介紹

      索氏提取法利用相似相溶規律,農產品中脂肪極性一般較小,可采用石油醚或乙醚作為抽提試劑。常見實驗室用石油醚有低沸程(30~60℃)和高低沸程(60~90℃)兩種,一般選用低沸程石油醚為抽提溶劑有利于縮短提取時間。若選擇乙醚為抽提試劑,則必須十分注意乙醚的安全使用。抽提室內應嚴禁有明火存在或用明火加

    細胞內cccDNA的抽提與純化

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    辛酸硫酸銨沉淀法純化單抗各個步驟的原理

    該方法純化的關鍵點為2步;第一步,辛酸——辛酸為短鏈脂肪酸,在酸性條件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白質;醋酸緩沖液,緩沖體系給予酸性條件;第二步,硫酸銨,——高濃度的鹽離子在蛋白質溶液中可與蛋白質競爭水分子,從而破壞蛋白質表面的水化膜,降低其溶解度,使之從溶液中沉淀出來。

    鹽湖提鋰工藝的方法介紹吸附法和溶劑萃取法

    1.吸附法采用無機離子吸附法。目前真正實現產業化的僅為鋁系吸附劑(氫氧化鋁)。即在氫氧化鋁中加入鋰陰離子產生的混合物,這類化合物屬于缺欠型無序結構,將成分中的鋰離子通過適當的酸溶液進行去除,而后對有規則空隙結構的無機物質進行得出,這種物質對于鋰離子有著很強的吸附作用。鋁鹽吸附劑在制造的時候,鋰離子主

    多克隆抗體

    Making Antibody·?????????Production of Polyclonal Antibody in Rabbit?(Walter Steffen)Provides detailed protocol for immunizatioin, bleeding procedure,

    plasmid-DNA的抽提?純化試劑盒MagExtractor?Plasmid

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    什么是多克隆抗體,多克隆抗體的優勢?

    天然的抗原分子中常含有多種不同的抗原表位,以該抗原刺激機體的免疫系統可同時激活多種B細胞克隆,產生的抗體中會含有多種針對不同抗原表位的抗體,因此稱之為多克隆抗體。多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優勢是:作用全面,具有中和抗原、免疫調理、補體依賴的細

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    SPA的提取、純化與鑒定(煮沸提取法和溶菌酶消化法)

    (一) SPA的提取SPA提取的方法很多,包括煮沸法、溶菌酶法、葡萄球菌溶素法、超生波法以及三氯醋酸法等。現將常用的方法介紹如下:1.煮沸提取法⑴ 將菌株接種于蛋白胨葡萄糖瓊脂培養基上,37℃培養20h~24h。⑵ 以 0.15mol/L pH5.9PB液將菌苔洗下,配成10%(V/V)的懸液。⑶

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