生物素酰化探針的檢測實驗——化學發光法
實驗材料DNA試劑、試劑盒生物素磷酸酶儀器、耗材紫外燈離心機實驗步驟1. 用夾子固定已轉印的尼龍膜的邊角于一小片干的吸水紙上，樣品面朝上，放進溫箱內12~80℃放15~30 min 或溫室晾干過夜。 2. 將帶核酸的面朝上暴露于紫外燈下，用最適的時間交聯。3. 用生物素探針與膜雜交，用適當強度的洗液洗滌。 4. 雜交后、將膜置于雜交袋中。 5. 封口，在一個角留有一小孔便于加入和排出液體。6. 加入1體積的封阻液、室溫作1 min 輕微搖動、倒干溶液。 7. 加入1 mg/ml 鏈親和素至1體積的封阻液至終濃度為1 μg/ml，在雜交袋中室溫溫育4 min，輕微搖動，倒干溶液。8. 加入10體積詵液 I，室溫洗膜4 min 輕微搖動，倒干溶液，重復1次。9. 加入生物素酰化堿性磷酸酶......閱讀全文
生物素酰化探針的檢測實驗——化學發光法
實驗材料DNA試劑、試劑盒生物素磷酸酶儀器、耗材紫外燈離心機實驗步驟1. ?用夾子固定已轉印的尼龍膜的邊角于一小片干的吸水紙上，樣品面朝上，放進溫箱內12~80℃放15~30 min 或溫室晾干過夜。?2. ?將帶核酸的面朝上暴露于紫外燈下，用最適的時間交聯。3. ?用生物素探針與膜雜交，用適當強度
生物素酰化探針的檢測實驗
比色法 化學發光法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒
生物素酰化探針的檢測實驗
實驗材料?DNA試劑、試劑盒?磷酸酶緩沖液封阻液牛血清蛋白TENBT儀器、耗材?離心機分光光度計搖床實驗步驟 1.? 用DNA稀釋緩沖液，稀釋生物素酰化標準DNA，濃度為0、1、2、5、10和20 pg/μl。以同樣稀釋液處理待測DNA。2.? 對干硝酸纖維素濾膜：每個稀釋度取1 μl 點膜，在80
生物素酰化探針的制備實驗——切口平移法
在標準的切口平移實驗體系中，生物素-11-dNTP取代了dNTP，DNA酶I 的濃度調整到可生成長100~500個核苷酸的范圍，其他生物素酰化的核苷酸也可代替生生物素-11-dNTP。實驗材料DNA試劑、試劑盒DNA聚合酶dNTP2-疏基乙醇生物素甘油NaClEDTASDS無水乙醇儀器、耗材注射器電
生物素酰化探針的制備實驗
切口平移法 隨即寡核苷酸引物合成法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑
生物素酰化探針的制備實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 DNA聚合酶dNTP2-疏基乙醇生物素甘油NaClEDTASDS無水乙醇儀器、耗材 注射器電泳儀離心機培養箱實驗步驟 1. ?混合以下物質于100 μl 反應體積：（1）10 μl ?10×大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ緩沖液（2）10 μl ?0.5 mmol/l 3dNTP
生物素酰化探針的檢測實驗——比色法
與放射性標記探針的比活不同，生物素標記探針的可檢出性在于每千堿基對中摻入的生物素分子的數量，它可用比色法檢測。實驗材料DNA試劑、試劑盒磷酸酶緩沖液封阻液牛血清蛋白TENBT儀器、耗材離心機分光光度計搖床實驗步驟1. ?用DNA稀釋緩沖液，稀釋生物素酰化標準DNA，濃度為0、1、2、5、10和20
生物素酰化探針的制備實驗——隨即寡核苷酸引物合成法
實驗材料DNA試劑、試劑盒dNTP生物素klenow酶TEEDTALiCl乙醇儀器、耗材離心機培養箱實驗步驟1. ?在1. 5 ml 離心管中加入500 ng~2 μg 模板DNA，加水至總體積為34 μl。?2. ?在沸水中變性DNA 5 min 置于冰浴5 min，稍加旋離。3. ?按順序加入下
地高辛標記探針的化學發光檢測實驗
地高辛系統是過提供的另一種非同位素標記方法，其檢測方法是通過偶聯上一種或數種熒光染料或酶的抗地高辛抗體，或用間接免疫熒光來測定。實驗材料DNA試劑、試劑盒抗體實驗步驟1. ?用地髙辛標記探針與帶DNA或RNA印跡的正電荷尼龍膜雜交。?2. ?根據廠商的推薦條件，封閉和結合抗體。3. ?對X光片曝光約
地高辛標記探針的化學發光檢測實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 抗體實驗步驟 1. ?用地髙辛標記探針與帶DNA或RNA印跡的正電荷尼龍膜雜交。?2. ?根據廠商的推薦條件，封閉和結合抗體。3. ?對X光片曝光約20 min。
地高辛標記探針的化學發光檢測實驗
化學發光法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒
雜交信號的放大實驗——生物素酰化信號
實驗材料雜交信號試劑、試劑盒生物素SSC熒光素親和素儀器、耗材離心機培養箱實驗步驟1. ?用生物素酰化探針與切片進行雜交、洗滌，進行第一輪雜交信號檢測。?2. ?如切片已承加蓋玻片并密封。可用一針頭或解剖刀片劃開密封的指甲油，移去蓋玻片， 并除去載玻片上指甲油。將玻片浸于0.1%Triton X-1
PCR法DNA探針生物素標記試劑盒產品說明
PCR法DNA探針生物素標記試劑盒產品特點：一站式，本試劑盒提供經過優化的試劑，不需要用戶自己摸索。2. 足夠10次50μl體系的常規PCR(用于制備標記反應的模板和設置對照反應)和5次50μl體系的標記反應。3.一次標記可以得到μg級的雙鏈DNA探針或約700ng的單鏈DNA探針，足夠多次雜交實驗
DNA探針檢測法的原理
原理：堿基互補配對。。探針：DNA單鏈－化學連接的標記基團探針和目標DNA（經過加熱，分成單鏈）混合，探針結合的目標DNA就會被標記
雜交探針的檢測實驗
1. ?將載玻片以膠帶固定于硬紙板或廢膠片上。2. ?將Du Pont Cronex 成像膠片（MRF 34 Clear） 輕壓在玻片上4℃曝光。3. ?當用這種膠片時，應注意以膠片的膠乳面正對樣品。
雜交探針的檢測實驗
實驗步驟 1. ?暗室中，以42~45℃水浴，溫育盛有4盎司（113.3 g）Kodak NTB-2放射自顯影膠乳瓶30 min。同時，在500 ml 三角瓶中預熱等體積的水至相同溫度。 2. ?膠乳熔化后，緩慢沿三角瓶壁（以一角度）倒入瓶中
化學發光探針檢測技術速查病原菌
吉林檢驗檢疫局建立的金標法檢測單核細胞增生性李斯特氏菌技術作為當今檢測病原體和診斷疾病方面最為敏感的免疫學技術之一，不僅操作簡便、快速、特異，更為重要的是適用于廣大基層食品監管部門的現場檢測和診斷，這些特點都是其他免疫學方法所無法比擬的。 該技術不僅具有巨大的發展潛力，而且還具
標記親和素生物素法（BAELISA）實驗——檢測未知抗原
實驗方法原理親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白，對生物素有非常高的親和力（結合常數高達1015M-1）。生物素很易與蛋白質（如抗體等）以共價鍵結合。這樣，結合了酶的親和素分子與結合有特異性抗體的生物素分子產生反應，既起到了多級放大作用，又由于酶在遇到相應底物時的催化作用而呈色，達到檢測未知抗原（
標記親和素生物素法（BAELISA）實驗——檢測未知抗體
實驗方法原理包被抗原：用0.05 mol/L pH9.6碳酸鹽緩沖液將已知的抗原作適當稀釋，于聚苯乙烯酶標板的孔中加0.1 ml，于4 ℃放置18～24 h。用洗滌緩沖液洗3次，每次3 min。?加樣：加適當稀釋的待檢樣品（未知抗體）于反應孔中，同時作空白、陰性和陽性對照孔。37 ℃孵育1 h，洗滌
原位雜交(In－Situ－Hybridization,ISH)與熒光原位雜交（六）
夾心雜交法可用濾膜和小珠固定吸附探針，使用小珠可更好地進行標準化試驗和更容易對小量樣品進行操作。Dahlen 等利用微孔板進行夾心雜交，可同時進行大量樣品檢測，他們先吸取DNA探針加到凹板中，然后用紫外線照射使其固定到塑料板上。用微孔板進行夾心雜交還可直接用于PCR技術。應用光敏生物標記探針
化學發光探針技術的操作
利用化學發光雜交保護分析的原理檢測空腸彎曲菌、單核細胞增生性李斯特氏菌、大腸桿菌O157和金黃色葡萄球菌4種致病菌特異性RNA序列，這種方法無需物理分離，利用吖啶酯標記DNA探針，通過核酸雜交保護分析法，即應用人工合成的靶DNA保守區的寡 核苷酸，在合成時引入一個烷氨基的手臂，經活化后接上吖啶酯
化學發光探針技術的原理
化學發光探針技術的原理是互補的 核酸單鏈會特異性識別并結合成穩定的雙鏈復合物。這一檢測系統利用一個標記有化學發光物的單鏈DNA探針，可以特異性的識別和結合目標微生物的核糖體RNA。微生物中的核糖體 RNA釋放出來后，化學發光標記的 DNA探針就與之結合形成穩定的DNA-RNA雜合體。標記的DNA
雜交探針的檢測實驗1
放射自顯影膠片用于檢測與細胞學樣品進行雜交的32P或35S-標記探針，并可應用于在大的器官或組織進行的實驗，欲獲得單細胞水平結果，需要用乳膠放射自顯影。實驗步驟1. ?將載玻片以膠帶固定于硬紙板或廢膠片上。2. ?將Du Pont Cronex 成像膠片（MRF 34 Clear） 輕壓在玻片上4℃
雜交探針的檢測實驗2
實驗材料膠乳試劑、試劑盒顯影劑儀器、耗材浸泡盒水浴鍋玻片架實驗步驟1. ?在42℃~45℃水浴溶化小份稀釋的膠乳10 min，將膠乳倒入或吸入潔凈的玻片包裝盒中（浸泡盒）。?2. ?將玻片緩慢并輕柔地浸入浸泡盒中，緩慢取出并垂直放置在試管架上或將玻片置于干燥器中2 h，使其干燥。3. ?將充分干燥的
雜交探針的檢測實驗3
實驗步驟1. ?暗室中，以42~45℃水浴，溫育盛有4盎司（113.3 g）Kodak NTB-2放射自顯影膠乳瓶30 min。同時，在500 ml 三角瓶中預熱等體積的水至相同溫度。2. ?膠乳熔化后，緩慢沿三角瓶壁（以一角度）倒入瓶中并混勻（輕旋1~2次，防止氣泡產生）。?3. ?分裝膠乳于尼龍
化學發光法是檢測什么
化學發光法是利用化學發光測定化學發光反應反應物、催化劑、增敏劑、抑制劑，偶合反應中的反應物、催化劑、增敏劑的方法。化學發光是物質在化學反應過程中，其物質分子吸收化學能產生光的輻射現象，如：REK-20N型化學發光定氮儀是興化睿科采用化學發光檢測原理，待測樣品被引入到高溫裂解爐后，在1050℃左右的高
非同位素標記探針的酶法檢測實驗——堿性磷酸酶檢測法
實驗材料探針試劑、試劑盒PBS鏈親和素HRPODAB雙氧水甘油二氨基聯苯胺堿性磷酸酶緩沖液儀器、耗材蓋玻片水浴鍋實驗步驟1. ?生物素酰化探針與切片雜交、洗滌、封閉，然后與鏈親和素溶液溫育（“辣根過氧化物酶法檢測”，步驟1~4）。?2. ?由0.1% Tween 20/PBS中取出玻片，吸去殘液，勿
沙門氏菌探針檢測法的檢測過程
1、樣品制備①前增菌? 在非選擇性培養基中對試樣進行前增菌使沙門氏菌開始生長。前增菌方法因產品類型而不同,但必須按 AOAC967.26A 或《細菌分析手冊》現行版執行。②選擇性增菌? 按常規培養方法分別移取培養后的前增菌的培養物1mL 轉種于裝有10mL 亞硒酸鹽胱氨酸肉湯管中(預熱至35℃)和裝
化學發光法是檢測什么的
化學發光法是利用化學發光測定化學發光反應反應物、催化劑、增敏劑、抑制劑，偶合反應中的反應物、催化劑、增敏劑的方法。化學發光是物質在化學反應過程中，其物質分子吸收化學能產生光的輻射現象，如：REK-20N型化學發光定氮儀是興化睿科采用化學發光檢測原理，待測樣品被引入到高溫裂解爐后，在1050℃左右的高
化學發光法是檢測什么的
化學發光法是檢測待測物含量的。它主要是依據化學檢測體系中待測物濃度與體系的化學發光強度在一定條件下呈線性定量關系的原理，利用儀器對體系化學發光強度的檢測，而確定待測物含量的一種痕量分析方法。化學發光法在痕量金屬離子、各類無機化合物、有機化合物分析及生物領域都有廣泛的應用。化學發光應用化學發光West