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  • 發布時間:2019-03-28 22:53 原文鏈接: 雜交探針的檢測實驗2

    實驗材料

    膠乳

    試劑、試劑盒

    顯影劑

    儀器、耗材

    浸泡盒水浴鍋玻片架

    實驗步驟

    1.  在42℃~45℃水浴溶化小份稀釋的膠乳10 min,將膠乳倒入或吸入潔凈的玻片包裝盒中(浸泡盒)。

     

    2.  將玻片緩慢并輕柔地浸入浸泡盒中,緩慢取出并垂直放置在試管架上或將玻片置于干燥器中2 h,使其干燥。

    3.  將充分干燥的載玻片放入有干燥劑的閉光玻片盒中,以黑色電工膠帶封盒,鋁箔覆蓋,于4℃曝光(勿在用于貯存32P或有機溶劑的冰箱中曝光)。 


    4.  分別加顯影液、水、和定影液于廣口瓶中,并放入15~20℃水浴,由冰箱中取出玻片使溫度與顯影液溫度相同。 


    5.  將載玻片移至玻片架上,在暗室中按以下程序進行顯影(以計時鐘準確計時):顯影液中浸泡2.5 min,水中浸泡30 s,定影液中浸泡3 min(勿劇烈攪動)。

    6.  無需避光,以柔緩的冷自來水浸洗玻片10~15 min,再以冷蒸溜水洗1次。載玻片干燥之前,以剃須刀片刮去玻片背面乳膠,然后于無塵處干燥。


    7.  按試驗要求進行玻片復染,并加蓋潔凈的蓋玻片,在暗視野顯微鏡下觀察顯影的銀顆粒顯像,在黑背景上顯像呈白色斑點。

    展開


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