關于免疫熒光技術—熒光抗體染色的基本介紹
免疫熒光技術(immunofluorescence techniques) 該法是以熒光素，如異硫氰酸熒光素(fluorescence isothiocyanate，FITC)、羅丹明等標記抗體或抗原，以檢測標本中抗原或抗體的方法。免疫熒光技術也包括兩種基本類型，即熒光抗體染色(fluorescentantiboby technique)和熒光免疫測定(fluorescein immunoassay)。 熒光抗體染色：是用熒光抗體浸染可能含有抗原的細胞或組織切片，若有相應抗原存在，則抗原與熒光抗體結合而使熒光素不被洗脫，在熒光顯微鏡下可見發光的物體，從而達到定位檢測目的，在基礎與臨床醫學的研究及疾病的診斷等方面有著廣泛用途。根據熒光抗體的不同可分直接法和間接法，前者即用熒光標記的第一抗體直接檢測標本片上的抗原，如病毒及某些蛋白質成分等；后者則在未標記的相應抗體(第一抗體)處理標本片后，覆以熒光標記的抗球蛋白抗體(第二抗體)......閱讀全文
熒光抗體技術介紹
熒光抗體技術，用熒光物標記抗體來檢測細胞或組織中相應抗原或抗體的技術。熒光物種類一般有異硫氰酸熒光素、羅丹明熒光素、二氯三嗪基氨基熒光素等。一般是將待測標本固定于玻片表面，滴加已知熒光抗體后再以緩沖液沖洗，干燥后于熒光顯微鏡下觀察陽性是可見帶熒光的抗原抗體復合物; 陰性無熒光(因為帶熒光的抗體不能與
熒光抗體的制備
1? ?熒光素與抗體結合（標記）??2? ?熒光抗體的純化??3? ?熒光抗體的鑒定??1.熒光素與抗體結合方法：? ? ⑴ 透析法：①適用于蛋白質含量低、樣品體? ?? ?? ?? ?? ?? ???積小的抗體溶液的標記? ?? ?? ?? ?? ? ②標記較均勻，非特異熒光較低??? ? ⑵ 攪
熒光抗體技術應用
熒光抗體技術在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。在細菌學檢驗中主要用于菌種的鑒定。標本材料可以是培養物、感染組織、病人分泌排泄物等。熒光間接染色法測定血清中的抗體，可用于流行病學調查和臨床回顧診斷。免疫熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用方法之一。免疫熒光技術
怎樣制備熒光抗體？
(一)抗體要求將熒光素與特異性抗體以化學共價鍵的方式結合而成。一般需經純化提取IgG后再作標記。(二)熒光素要求 異硫氰酸熒光素最常用要求：①應具有能與蛋白質分子形成共價鍵的化學基團，與蛋白質結合后不易解離，而未結合的色素及其降解產物易于清除；②熒光效率高，與蛋白質結合后，仍能保持較高的熒光效率；③
病毒免疫熒光實驗_?熒光抗體染色
實驗材料細胞小玻片標本試劑、試劑盒熒光抗體實驗步驟熒光抗體染色按不同反應機制，可有以下幾種：1.直接法 用已知特異性病毒抗體與熒光素結合，制成熒光特異性抗體，直接與細胞或組織中相應病毒抗原結合，在熒光顯微鏡下即可見病毒或病毒抗原存在部位呈現特異性熒光。此法特異簡便，但一種熒光抗體只能檢查一種抗原，特
熒光抗體技術技術特點
本法較其他鑒定細菌的血清學方法速度快、操作簡單、敏感性高，但在細菌實驗診斷中，一般只能作為一種補充手段使用，而不能代替常規診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。
熒光抗體技術的應用
熒光抗體技術在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。在細菌學檢驗中主要用于菌種的鑒定。標本材料可以是培養物、感染組織、病人分泌排泄物等。熒光間接染色法測定血清中的抗體，可用于流行病學調查和臨床回顧診斷。免疫熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用方法之一。免疫熒光
熒光抗體技術的概念
熒光抗體技術，用熒光物標記抗體來檢測細胞或組織中相應抗原或抗體的技術。熒光物種類一般有異硫氰酸熒光素、羅丹明熒光素、二氯三嗪基氨基熒光素等。一般是將待測標本固定于玻片表面，滴加已知熒光抗體后再以緩沖液沖洗，干燥后于熒光顯微鏡下觀察陽性是可見帶熒光的抗原抗體復合物;陰性無熒光(因為帶熒光的抗體不能與抗
熒光素標記抗體技術
(一) 原理 目前用于抗體標記的熒光素主要有異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或羅達明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在鹼性條件下FITC的碳酰胺鍵可與抗體賴氨酸的ε氨基共價結合，標記后的抗體仍保持與相應抗原結合的能力
流式抗體（熒光抗體）細胞染色步驟與注意
染色緩沖液（BSA）的配制：PBS含有1% FBS和0.09% NaN3，置于冰上或4度冰箱備用。準備單細胞懸液：淋巴組織、骨髓、血液或培養的細胞。用冰染色緩沖液洗細胞2次，離心細胞，用冰染色緩沖液重懸細胞，使終濃度為2×107細胞/ml。各取50ul（106細胞）細胞懸液到2個圓底的Ep管中。根據
病毒免疫熒光實驗_熒光抗體的制備
實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光色素的選擇 可以產生明亮熒光的染料物質，稱熒光色素 (fluorochrome) 。目前常用的熒光色素有以下幾種：(1) 異硫氰酸熒光素 (Fluorescein isothiocyanate, FITC): 在堿性條件下， FITC 的異硫氰酸基在水溶液
病毒免疫熒光實驗_?熒光素標記抗體
實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光標記抗體方法有直接標記法和間接標記法兩種。(1) 直接法：較為常用，具體步驟是：1) 抗體溶液的制備：用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 將待標記抗體稀釋至 20mg/ml;2) 熒光素：根據待標記抗體的總量，按 0.01mg 熒光素/mg 蛋白
熒光抗體技術的應用介紹
熒光抗體技術在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。在細菌學檢驗中主要用于菌種的鑒定。標本材料可以是培養物、感染組織、病人分泌排泄物等。熒光間接染色法測定血清中的抗體，可用于流行病學調查和臨床回顧診斷。免疫熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用方法之一。免疫熒光技術
熒光抗體技術的技術特點
本法較其他鑒定細菌的血清學方法速度快、操作簡單、敏感性高，但在細菌實驗診斷中，一般只能作為一種補充手段使用，而不能代替常規診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。
熒光抗體技術的技術特點
本法較其他鑒定細菌的血清學方法速度快、操作簡單、敏感性高，但在細菌實驗診斷中，一般只能作為一種補充手段使用，而不能代替常規診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。
熒光抗體技術的技術特點
本法較其他鑒定細菌的血清學方法速度快、操作簡單、敏感性高，但在細菌實驗診斷中，一般只能作為一種補充手段使用，而不能代替常規診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。
間接熒光抗體技術的定義
中文名稱間接熒光抗體技術英文名稱indirect fluorescence antibody technique定 義一種免疫標記技術。即應用熒光標記的二抗,通過與第一抗體結合而檢測未知抗原。應用學科免疫學（一級學科），應用免疫（二級學科），免疫學檢測和診斷（三級學科）
熒光抗體技術的技術特點
熒光抗體技術是以熒光物標記抗體進行抗原定位的技術。本技術較其他鑒定細菌的血清學方法有速度快、操作簡單、敏感性高等特點，它在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。
熒光抗體技術的技術特點
本法較其他鑒定細菌的血清學方法速度快、操作簡單、敏感性高，但在細菌實驗診斷中，一般只能作為一種補充手段使用，而不能代替常規診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。
熒光抗體技術的技術特點
熒光抗體技術是以熒光物標記抗體進行抗原定位的技術。本技術較其他鑒定細菌的血清學方法有速度快、操作簡單、敏感性高等特點，它在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。
紅外波長熒光抗體的優勢
紅外波長熒光抗體備受青睞原因你知道嗎？美國是最早實現親和素純化二抗商業化的生物公司，同時也是世界上最大的二抗和底物顯色系統的生產。DyLight系列熒光二抗是美國KPL公司的優勢產品，其一系列產品是目前市場上口碑很高的熒光二抗，并備受關注。其中，KPL公司生產的 DyLight 680（完全替代 I
熒光抗體技術的應用特點
熒光抗體技術在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。在細菌學檢驗中主要用于菌種的鑒定。標本材料可以是培養物、感染組織、病人分泌排泄物等。熒光間接染色法測定血清中的抗體，可用于流行病學調查和臨床回顧診斷。免疫熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用方法之一。免疫熒光技術
熒光抗體技術的技術應用
熒光抗體技術在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。在細菌學檢驗中主要用于菌種的鑒定。標本材料可以是培養物、感染組織、病人分泌排泄物等。熒光間接染色法測定血清中的抗體，可用于流行病學調查和臨床回顧診斷。免疫熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用方法之一。免疫熒光技術
間接熒光抗體技術的概念
中文名稱間接熒光抗體技術英文名稱indirect fluorescence antibody technique定 義一種免疫標記技術。即應用熒光標記的二抗,通過與第一抗體結合而檢測未知抗原。應用學科免疫學（一級學科），應用免疫（二級學科），免疫學檢測和診斷（三級學科）
熒光抗體技術的技術特點
本法較其他鑒定細菌的血清學方法速度快、操作簡單、敏感性高，但在細菌實驗診斷中，一般只能作為一種補充手段使用，而不能代替常規診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。
熒光抗體(fluorescent－antibody)的制備
一、熒光素與抗體結合?1、透析法?（1）概述：適用于蛋白質含量低、樣品體積小的抗體溶液的標記。標記較均勻，非特異熒光較低。?（2）步驟：將含10mg/ml的Ig溶液10ml裝入透析袋，將上述透析袋放入燒杯中，含0.1mg/ml FITC的pH9.4的碳酸鹽緩沖液100ml；4℃磁力攪拌24h，取出透
熒光抗體技術的應用介紹
熒光抗體技術在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。在細菌學檢驗中主要用于菌種的鑒定。標本材料可以是培養物、感染組織、病人分泌排泄物等。熒光間接染色法測定血清中的抗體，可用于流行病學調查和臨床回顧診斷。免疫熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用方法之一。免疫熒光技術
熒光抗體染色與結果判斷
熒光抗體與抗原反應，一般在25～37℃，30分鐘，不耐熱抗原的檢測則以4℃過夜為宜。(一)直接法：用特異熒光抗體直接滴加于標本上。本法操作簡便，特異性高，非特異熒光染色因素少；缺點是敏感度偏低，需制備特異性的熒光抗體。(二)間接法：可用于檢測抗原和抗體，普通一抗+熒光二抗。靈敏度高，僅需一種熒光抗體
熒光抗體技術的相關介紹
熒光抗體技術，用熒光物標記抗體來檢測細胞或組織中相應抗原或抗體的技術。熒光物種類一般有異硫氰酸熒光素、羅丹明熒光素、二氯三嗪基氨基熒光素等。一般是將待測標本固定于玻片表面，滴加已知熒光抗體后再以緩沖液沖洗，干燥后于熒光顯微鏡下觀察陽性是可見帶熒光的抗原抗體復合物； 陰性無熒光(因為帶熒光的抗體不
免疫熒光技術熒光抗體染色方法介紹直接法
直接法是指用特異熒光抗體直接滴加于待檢的標本上,由熒光標記的抗體與抗原發生特異結合(圖)。標本中如有相應的抗原存在,即與熒光抗體特異性結合,在鏡下可見有熒光的抗原復合物。此法的優點是操作簡單、特異性高。其缺點是檢查每種抗原均需制備相應的特異性熒光抗體,且敏感性低于間接法。