免疫沉淀的方法特點和應用
免疫沉淀是利用抗體特異性反應純化富集目的蛋白的一種方法。抗體與細胞裂解液或表達上清中相應的蛋白結合后,再與蛋白A/G(ProteinA/G)或二抗偶聯的珠子(agarose或Sepharose)孵育,通過離心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗體-目的蛋白復合物,沉淀經過洗滌后,重懸于電泳上樣緩沖液,煮沸5-10min,在高溫及還原劑的作用下,抗原與抗體解離,離心收集上清,上清中包括抗體、目的蛋白和少量的雜蛋白。......閱讀全文
免疫沉淀的方法特點和應用
免疫沉淀是利用抗體特異性反應純化富集目的蛋白的一種方法。抗體與細胞裂解液或表達上清中相應的蛋白結合后,再與蛋白A/G(ProteinA/G)或二抗偶聯的珠子(agarose或Sepharose)孵育,通過離心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗體-目的蛋白復合物,沉淀經過洗滌后,重懸于電泳上樣緩沖液,煮沸
免疫沉淀(Immunoprecipitation)實驗材料和方法
免疫沉淀是利用特異性抗體識別并分離抗原的方法。材料:上樣buffer的配方(用前現配):2ul 1.25M Tris-HCL , pH 6.835ul distilled water2.5ul 2-mercaptoethanol12.5ul 10%SDS10ul 80% glycerol2ul br
可用于免疫沉淀的抗體類型和特點介紹
有3種類型的抗體可用于免疫沉淀:多克隆抗體,混合單克隆抗體和單克隆抗體。多克隆抗體混合單克隆抗體單克隆抗體反應強度極好抗體依賴性(極差到極好)極好特異性一般良好(有時本底高)極好,但有些出現交叉反應極好,避免使用有交叉反應的抗體優點穩定,多價反應特異供應不受限制穩定,多價反應特異供應不受限制缺點本底
放射免疫沉淀法的方法特點
中文名稱放射免疫沉淀法英文名稱radioimmunoprecipitation定 義以放射性標記的抗原或抗體進行的免疫沉淀法。能大大提高檢測抗原抗體復合體的靈敏度。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
滲析方法的技術特點和應用
利用半透膜的選擇透過性來分離不同的溶質粒子(如離子)的方法稱為滲析。在電場作用下進行滲析時,溶液中的帶電的溶質粒子(如離子)通過膜而遷移的現象稱為電滲析。利用電滲析進行提純和分離物質的技術稱為電滲析法,它是20世紀50年代發展起來的一種新技術,最初用于海水淡化,現在廣泛用于化工、輕工、冶金、造紙、醫
光聚合的方法特點和應用
光聚合是指用光化學反應使單體聚合的方法。單體可以直接受光激發引起聚合,或者由光敏劑、光引發劑受光激發而引起聚合,后者又稱光敏聚合。這種方法具有聚合溫度低、反應選擇性高和易控制等特點,可以發生一般分子不能進行的反應,擴大了獲得高分子的手段。光聚合所用的光源主要是高壓或中壓汞燈(不連續光)和氙燈(連續光
免疫沉淀的方法步驟
?? 說到實驗,畢竟是“說”,重要的是動手“做”。其實我們所發布的一些過程步驟等相當于說明書,我們能夠給出的是一些知識與提醒注意,一個實驗是不能看會的,所以朋友們可通過來了解,需要的朋友們可以自己動手來實踐的。我們今天說的這個實驗呢是免疫沉淀的實驗,過程還是比較簡單的。? ? 免疫沉淀一般用于分析抗
免疫沉淀法的技術特點
免疫沉淀法(Immunoprecipitation, IP)是一種研究蛋白質間交互作用的生物技術,這種技術是將蛋白質視為抗原,并利用抗體與之進行特異性結合的特性,來進行研究。這項技術可用來將含有上千種不同蛋白質的樣品中,分離和濃縮出特定蛋白質。進行免疫沉淀法時,抗體需要和一個受質結合。
表達克隆的方法特點和應用
中文名稱表達克隆英文名稱expression cloning定 義通過進行基因表達而克隆目的基因的方法。用表達載體構建互補DNA(cDNA)或基因組DNA表達文庫,轉入細菌或細胞內進行表達,再通過特定表型進行篩選,從而獲得目的基因克隆。該方法可以對任何能表達可篩選表型的基因進行克隆。應用學科生物化
電穿孔的方法概念和應用特點
電穿孔(Electroporation)也叫電轉染,是通過高強度的電場作用,瞬時提高細胞膜的通透性,從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法,是一種有價值和有效的替代方法。
夾心法分析的方法特點和應用
中文名稱夾心法分析英文名稱sandwich assay定 義利用一種分子有兩個不同特異性反應區域所設計的分析方法。如在免疫測定中,將固相化的抗體或抗原與待測抗原或抗體結合后,再以標記的另一種抗體或抗原(識別不同部位)與之反應;分子雜交時,固相化的目標核酸分子先與連接地高辛精的探針結合,然后用帶標志
牽出試驗的技術方法和應用特點
中文名稱牽出試驗英文名稱pull down experiment定 義分子生物學中指利用分子間的相互結合特性來分離特定分子的一種技術,常用于體內和體外蛋白質的分離和分析。如將一種蛋白質沉淀分離的同時,與這種蛋白質特異結合的另一種蛋白質也帶出來,就能達到分離后者或證明兩種蛋白質能夠特異性結合的目的。
熒光分析的方法原理和應用特點
熒光分析法是指利用某些物質被紫外光照射后處于激發態,激發態分子經歷一個碰撞及發射的去激發過程所發生的能反映出該物質特性的熒光,可以進行定性或定量分析的方法。由于有些物質本身不發射熒光(或熒光很弱),這就需要把不發射熒光的物質轉化成能發射熒光的物質。例如用某些試劑(如熒光染料),使其與不發射熒光的物質
固相技術方法特點和應用
中文名稱固相技術英文名稱solid phase technique定 義將反應物固定在載體上或用其他方式使其以不溶的方式參與反應的技術。如固相雜交、固相免疫分析、固相多肽合成、固相序列測定等都是固相技術的應用,能提高效率,使操作快速、簡便、自動化。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技
液氮罐的特點、使用方法和應用
液氮罐通常包含液氮貯存罐以及液氮運輸罐兩種。室內液氮的靜置貯存主要使 貯存罐,其不適合在工作狀態下作遠距離運輸使用。液氮運輸罐作了專門的防震設計以便使運輸的條件得到滿足。液氮運輸罐不但能夠靜置貯存,而且還能夠在充裝液氮狀態下,作運輸使用,然而劇烈的碰撞和震動也需要避免。下面就讓小編帶你了解一下液氮罐
免疫共沉淀的方法特點和應用介紹
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保留了下來。當用預先固化在agaros
染色質免疫沉淀技術的應用
隨著人類基因組測序工作的基本完成,功能基因組學逐漸成為研究的熱點。而基因表達的調控又是功能基因組學的一個重要研究領域,要想提供蛋白因子直接調控的證據,需要直接檢測蛋白質-DNA的相互作用,而染色質免疫沉淀技術(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)就是一種研
免疫沉淀的實驗方法介紹
免疫沉淀的實驗過程比較簡單,一般分為3個階段;①抗原溶液的制備;②裂解物非特異性本底的預處理;③免疫復合物的形成與純化。 免疫沉淀的第一步是制備抗原溶液。任何抗原溶液均可作為免疫沉淀的材料來源,但免疫沉淀一般采用細胞或組織制備的裂解物。裂解物的制備可采用多種方法,其中首選用溫和的去污劑如非離子去污劑
基因組印記的方法特點和應用
基因組印記(genomic imprinting)是表觀遺傳學調節的一種形式。指兩個親本等位基因差異甲基化而導致的一個親本等位基因沉默而另一個親本等位基因保持活性的現象。通過對富含CpG島的印記中心的差異甲基化來作用。
核酸酶保護分析的方法特點和應用
中文名稱核酸酶保護分析英文名稱nuclease protection assay定 義當核酸(DNA、RNA)中某段序列能與其他核酸(DNA、RNA)形成互補結合或與某種蛋白特異結合后,核酸酶(如S1核酸酶)就只能降解反應系統中未結合的核酸,留下被結合的核酸段落可以定性或定量檢測出來的方法。此法可
放射免疫沉淀法的技術特點
中文名稱放射免疫沉淀法英文名稱radioimmunoprecipitation定 義以放射性標記的抗原或抗體進行的免疫沉淀法。能大大提高檢測抗原抗體復合體的靈敏度。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
放射免疫沉淀法技術特點
中文名稱放射免疫沉淀法英文名稱radioimmunoprecipitation定 義以放射性標記的抗原或抗體進行的免疫沉淀法。能大大提高檢測抗原抗體復合體的靈敏度。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
免疫沉淀(Immunoprecipitation,-IP)實驗方法
?基本實驗步驟?(1)收獲細胞,加入適量細胞IP裂解緩沖液(含蛋白酶抑制劑),冰上或者4℃裂解30min, 12,000g離心30 min后取上清;?(2) 取少量裂解液以備Western blot分析,剩余裂解液將1μg相應的抗體和10-50 μl protein A/G-beads加入到細胞裂解
流動相的特點和應用
色譜過程中攜帶待測組分向前移動的物質稱為流動相。與固定相處于平衡狀態、帶動樣品向前移動的另一相。
恒溫搖床的應用和特點
恒溫搖床,是一種溫度可控的恒溫培養箱和振蕩器相結合的生化儀器,主要適用于各大中院校、醫療、石油化工、衛生防疫、環境監測等科研部門作生物、生化、細胞、菌種等各種液態、固態化合物的振蕩培養。其主要特點:A:溫控精準數字顯示。B:開設有補氧孔、恒溫工作腔補氧充足。C:設有機械定時。D:彈簧試瓶架適合作多種
10440電池的特點和應用
10440電池是一種直徑為10mm、高度為44mm的鋰離子電池,與我們常稱為7號電池的大小相同,這種電池容量一般很小,只有幾百mAh,重要應用在迷你電子產品。例如手電筒、迷你音響、擴音器等。
基因作圖的應用和特點
基因作圖(英文gene mapping)是一種遺傳學作圖,用來定位染色體中特定的DNA片段。是基因組研究的成果之一,主要分為以重組率為定位依據的遺傳輿圖,以及以DNA片段實際位置為依據的物理輿圖,兩這各有不同用途與優缺點。
細胞工廠的特點和應用
細胞工廠因可靈活地選擇細胞培養的層數與培養面積,結構緊密,受污染風險低,使其在批量生產疫苗、單克隆抗體或制藥工業等方面應用廣泛。學習過生物學的人都知道,不論是動物、植物的細胞,還是單細胞的微生物,都是一個**的工廠。細胞中能合成生命活動必需的物質,比起化工廠來,細胞的本領要大得多。它不僅能合成簡單的
D環的特點和應用
指DNA雙鏈的局部,由具有互補性單鏈DNA與之結合所產生的環狀結構。當DNA復制開始,在原來的雙鏈中僅一方被新合成的短DNA單鏈被置換的情況下可以見到(為Displacement loop之簡稱)。可通過人工使DNA單鏈結合來制成此結構。由RNA單鏈所產生的類似結構稱為R環。
IGBT的概念和應用特點
IGBT(Insulated Gate Bipolar Transistor),絕緣柵雙極型晶體管,是由(Bipolar Junction Transistor,BJT)雙極型三極管和絕緣柵型場效應管(Metal Oxide Semiconductor,MOS)組成的復合全控型電壓驅動式功率半導體器