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  • 關于細胞雜交的方式方法介紹

    1、原代培養 (primary culture):從動物機體取出的進行培養的細胞群。原代培養的細胞生長比較緩慢,而且繁殖一定的代數后(一般10代以內)停止生長,需要從更換培養基。將細胞從一個培養瓶轉移到另外一個培養瓶即稱為傳代或傳代培養(Passage)。 2、細胞株(cell strain):從原代培養細胞群中篩選出的具有特定性質或標志的細胞群,能夠繁殖50代左右,在培養過程中其特征始終保持。 3、細胞系(cell line):從腫瘤組織培養建立的細胞群或培養過程中發生突變或轉化的細胞,在培養條件下可無限繁殖 4、克隆(clone):亦稱無性繁殖系或簡稱無性系。對細胞來說,克隆是指由同一個祖先細胞通過有絲分裂產生的遺傳性狀一致的細胞群。......閱讀全文

    關于細胞雜交的方式方法介紹

      1、原代培養 (primary culture):從動物機體取出的進行培養的細胞群。原代培養的細胞生長比較緩慢,而且繁殖一定的代數后(一般10代以內)停止生長,需要從更換培養基。將細胞從一個培養瓶轉移到另外一個培養瓶即稱為傳代或傳代培養(Passage)。  2、細胞株(cell strain)

    細胞雜交技術的方式方法

    1. 原代培養 (primary culture):從動物機體取出的進行培養的細胞群。原代培養的細胞生長比較緩慢,而且繁殖一定的代數后(一般10代以內)停止生長,需要從更換培養基。將細胞從一個培養瓶轉移到另外一個培養瓶即稱為傳代或傳代培養(Passage)。2.?細胞株(cell strain):從

    關于體細胞雜交的相關介紹

      體細胞是生物體除生殖細胞外的所有細胞。將從身體分離的體細胞做組織培養進行遺傳學研究的學科稱為體細胞遺傳學(somaticgenetics)。體外培養細胞可人為控制或改變環境條件,并可建立細胞株,長期保存,進行各種正常和病理研究。與基因定位有關的是體細胞雜交(somaticcellhybridiz

    關于完整細胞斑點雜交方法的介紹

      應用類似檢測細菌菌落的方法,可以對細胞培養物的特異序列進行快速檢測,將整個細胞點到膜上,經NaOH處理,使DNA暴露、變性和固定,再按常規方法進行雜交與檢測。有人曾用此法從105個培養細胞中檢測到至少5pg的Epstein-Barr病毒DNA。完整細胞斑點印跡法可以用于篩選大量標本,因為它使細胞

    關于體細胞雜交實驗的方法介紹

      所有操作均在超凈工作臺上進行。  1.原生質體的分離和收集。  2.將收集的兩種不同材料的原生質體分別懸浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O(pH5.8~6.2)原生質體密度調整為2×105/ml左右(用血細胞計數板統計原生質體密度)。  3.將兩種原生質體懸液等量混合。  4.用刻度吸

    關于雜交瘤細胞飼細胞的制備方法介紹

      小鼠腹腔細胞制備方法:  1.引頸處死小鼠,用酒精消毒表體。  2.切開腹部皮膚剝向兩側,暴露出腹壁。  3.用無菌 7 號針頭注射器,吸取 3ml 無血清培養液。  4.用小鑷夾起腹壁,注入 3ml 無血清培養液,用手反復輕輕揉腹壁,再反復抽吸 3~5 次。  5.收集末次吸得的細胞,注入 5

    關于Southern雜交的預雜交的介紹

      將固定于膜上的DNA片段與探針進行雜交之前,必須先進行一個預雜交的過程。因為能結合DNA片段的膜同樣能夠結合探針DNA,在進行雜交前,必須將膜上所有能與DNA結合的位點全部封閉,這就是預雜交的目的。預雜交是將轉印后的濾膜置于一個浸泡在水浴搖床的封閉塑料袋中進行,袋中裝有預雜交液,使預雜交液不斷在

    關于體細胞雜交的基本內容介紹

      植物體細胞雜交是在原生質體培養技術的基礎上,借用動物細胞融合方法發展起來的一門新型生物技術。植物體細胞雜交的過程包括原生質體的制備,原生質體融合的誘導,雜種細胞的篩選和培養,以及雜種植株的再生與鑒定等環節。下面以煙草和大豆的體細胞雜交為例,簡要介紹植物體細胞雜交的過程。  原生質體制備選取煙草植

    關于核酸的雜交介紹

      具有互補序列的不同來源的單鏈核酸分子,按堿基配對原則結合在一起稱為核酸雜交(hybridization)。雜交可發生在DNA-DNA、RNA-RNA和DNA-RNA之間。雜交是分子生物學研究中常用的技術之一,利用它可以分析基因組織的結構,定位和基因表達等,常用的雜交方法有Southern印跡法,

    關于體細胞雜交的簡介

      體細胞是生物體除生殖細胞外的所有細胞。將從身體分離的體細胞做組織培養進行遺傳學研究的學科稱為體細胞遺傳學(somaticgenetics)。體外培養細胞可人為控制或改變環境條件,并可建立細胞株,長期保存,進行各種正常和病理研究。與基因定位有關的是體細胞雜交(somaticcellhybridiz

    關于雜交瘤細胞的簡介

      雜交瘤細胞(hybridoma)是一種在制備單克隆抗體過程中,用骨髓瘤細胞和B淋巴細胞融合而成的細胞。雜交瘤細胞一般通過瘤細胞培養來制備。  雜交瘤技術是指兩個或兩個以上細胞合并形成一個細胞的現象。他可使兩個不同來源的細胞核在同一細胞中表達功能。

    體細胞雜交的雜種細胞的介紹

      新產生的融合細胞稱為雜種細胞(hybridcell),含有雙親不同的染色體。雜種細胞有一個重要的特點是在其繁殖傳代過程中出現保留嚙齒類一方染色體而人類染色體則逐漸丟失,最后只剩一條或幾條,其原因至今不明。這種僅保留少數甚至一條人染色體的雜種細胞正是進行基因連鎖分析和基因定位的有用材料。由于人和鼠

    關于核酸雜交的步驟介紹

      (1)制備樣品:首先需要從待檢測組織樣品提取DNA或RNA。DNA應先用限制性內切酶消化以產生特定長度的片段,然后通過凝膠電泳將消化產物按分子大小進行分離。一般來說DNA分子有其獨特的限制性內切酶圖譜,所以經酶切消化和電泳分離后可在凝膠上形成特定的區帶。再將含有DNA片段的凝膠進行變性處理后,直

    關于Southern雜交的步驟介紹

      1.將標記的DNA探針置沸水浴10min,迅速置冰上冷卻1-2min,使DNA變性。  2.從水浴中取出含有濾膜和預雜交液的塑料袋,剪開一角,將變性的DNA探針加到預雜交液中。  3.盡可能除取袋中的空氣,封住袋口,滯留在袋中的氣泡要盡可能地少,為避免同位素污染水浴,將封好的雜交袋再封入另一個未

    雜交瘤細胞的基本介紹

      雜交瘤抗體技術的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經抗原免疫的小鼠細胞與小鼠骨髓瘤細胞。脾淋巴細胞的主要特征是它的抗體分泌功能和能夠在選擇培養基中生長,小鼠骨髓瘤細胞則可在培養條件下無限分裂、增殖,即所謂永生性。在選擇培養基的作用下,只有b細胞與骨髓瘤細胞融合的

    體細胞雜交的方法介紹

    所用方法是:①根據雙親細胞的形態特征,用不同熒光染料標記,人工挑選或用熒光激活細胞分揀機分離。或通過顯微操作直接挑選。②在合適的選擇壓下,只允許雜種細胞生長,淘汰雙親和同源融合細胞。如生長激素自主選擇、代謝互補選擇、白化互補選擇、營養缺陷型互補選擇、藥物抗性互補選擇等。

    細胞雜交與選擇培養的介紹

      (1)融合:細胞雜交之前,要分別準備好脾臟的B細胞懸液和小鼠骨髓瘤細胞(如SP2/0—Agl4細胞株)。免疫后的小鼠脾臟在無菌條件下破碎,將B細胞懸浮在沒有血清的培養液中(通常使用RPMIl640商品配制),并洗滌3次去掉小鼠的血清。SP2/0細胞是用加有10%胎牛或小牛血清培養的,每天更換新鮮

    關于DNA雜交的雜交原理堿基互補配對的介紹

      至于怎么看出來是否雜交上,這個是要在探針上做標記(標記可以有很多種,生物的、熒光的、放射性的等等),雜交后是要洗脫的,只有這種特異性的雜交才被保留下來,再通過檢測探針上的標記來看出是否雜交上。比如上面的“鑰匙”,就像你用一串的“鑰匙”去試,但你可以先在要的那個“鑰匙”上做個標記,你不需要認識“鑰

    輻射性雜交產生體細胞雜交的方法介紹

    輻射性雜交(radiationhybridRH)制圖技術是1975年由Goss和Harris創立的一種體細胞雜交技術,適用于構建人類基因組長范圍內的高分辨率連續物理圖譜。成熟的輻射性雜交制圖技術是由CoxVR等人于1990年建立的。

    細胞雜交

    ? ? ? ? ? ? 實驗材料 PEG 試劑、試劑盒 完全培養基 無血清培養基 NaOH

    細胞雜交

    ? ? ? ? ? ? 實驗材料 PEG 試劑、試劑盒 完全培養基 無血清培養基 NaOH

    細胞雜交

    在懸浮或單層培養細胞體系中融合細胞,用 PEG 處理細胞的時間應很短,以減少細胞的死亡。通常,在使用選擇性培養基前,需給細胞 24 h 的恢復期。實驗材料PEG試劑、試劑盒完全培養基無血清培養基NaOH儀器、耗材皮氏培養皿通用容器實驗步驟PEG 1000 ( Merck):(a) 髙壓處理PEG,將

    體細胞雜交的雜交實驗

    不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合,所產生的雜種細胞,即異核體經過培養可再生新壁,分裂形成愈傷組織,進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞,故該項技術也叫體細胞雜交。原生質體融合能使有性雜交不親合的植物種間進行廣泛的遺傳重組,因而在農業育種上具有巨大的潛力。在植物遺傳操作研究

    關于旋轉蒸發器應用的方式方法

    下面由技術人員詳解旋轉蒸發器的相關知識具體,使用的方式方法如下:1、插入支持玻璃冷凝器的立桿,再旋緊兩只不銹鋼螺絲,加以固定。?2、將蒸發管套入減速箱轉軸內井旋緊壓帽。安裝平行圈、O型圈、T型圈。?3、安裝玻璃四通,將四通接口與T型圈位置適當后,旋緊大螺圈,但注意不要旋得過緊,否則會縮短O型圈的使用

    雜交瘤細胞的瘤細胞培養介紹

      骨髓瘤細胞呈懸浮或輕微附著形式生長, 如附著性生長的細胞多時, 用吸管輕輕吹打或輕輕 叩擊培養容器即可分離下來。 通常要維持細胞于指數生長期 (細胞培養時間為 15~20 小時) ,每 3~5 天取細胞 0.2~1ml 移入到 10ml 新培養液中, 其最大細胞密度不能超過 5×10 ~10 /

    關于斑點雜交的方法介紹

      斑點雜交(Dot blot)是將被檢標本點到膜上,烘烤固定。這種方法耗時短,可做半定量分析。一張膜上可同時檢測多個樣品,為使點樣準確方便,市售有多種多管吸印儀(Manifold),如MinifoldⅠ和Ⅱ、Smart Blotter(Wealtec)、Bio-Dot(Bio-Rad)和Hybri

    關于酵母單雜交的技術介紹

      酵母單雜交技術最早是1993年由Li等從酵母雙雜交技術發展而來,通過對報告基因的表型檢測,分析DNA與蛋白之間的相互作用,以研究真核細胞內的基因表達調控。由于酵母單雜交方法檢測特定轉錄因子與順式作用元件專一性相互作用的敏感性和可靠性,現已被廣泛用于克隆細胞中含量微弱的、用生化手段難以純化的特定轉

    關于核酸分子雜交的基本介紹

      雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DNA或總RNA。根據使用的方法被檢測的核酸可以是提純的,也可以在細胞內雜交,即細胞原位雜交。探針必須經過標記,以便示蹤和檢測。使用最普遍的探針標記物是同位素,但由于同位素的安全性,近年來發展了許多非同位素

    關于酵母單雜交的缺點介紹

      酵母單雜交技術是一種研究蛋白質和特定DNA序列相互作用的技術方法,主要包括四個流程即:一、篩選含有報告基因的酵母單細胞株;二、構建表達文庫;三、重組質粒轉化至酵母細胞;四、陽性克隆菌株的篩選。  由于插入的靶元件與酵母內源轉錄激活因子可能發生相互作用,或插入的靶元件不需要轉錄激活因子就可以激活報

    體細胞雜交的實驗原理介紹

    不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合,所產生的雜種細胞,即異核體經過培養可再生新壁,分裂形成愈傷組織,進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞,故該項技術也叫體細胞雜交。原生質體融合能使有性雜交不親合的植物種間進行廣泛的遺傳重組,因而在農業育種上具有巨大的潛力。在植物遺傳操作研究

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