高效液相色譜法使用的儀器高壓泵的介紹
HPLC使用的色譜柱是很細的(1~6 mm),所用固定相的粒度也非常小(幾μm到幾十μm),所以流動相在柱中流動受到的阻力很大,在常壓下,流動相流速十分緩慢,柱效低且費時。為了達到快速、高效分離,必須給流動相施加很大的壓力,以加快其在柱中的流動速度。為此,須用高壓泵進行高壓輸液。高壓、高速是高效液相色譜的特點之一。HPLC使用的高壓泵應滿足下列條件: a. 流量恒定,無脈動,并有較大的調節范圍(一般為1~10 mL/min); b. 能抗溶劑腐蝕; c. 有較高的輸液壓力;對一般分離,60×10^5Pa的壓力就滿足了,對高效分離,要求達到150~300×10^5Pa。 ⑴往復式柱塞泵 當柱塞推入缸體時,泵頭出口(上部)的單向閥打開,同時,流動相進入的單向閥(下部)關閉,這時就輸出少量的流體。反之,當柱塞向外拉時,流動相入口的單向閥打開,出口的單向閥同時關閉,一定量的流動相就由其儲液器吸入缸體中。這種泵的特點是不受整......閱讀全文
高效液相色譜法使用的儀器高壓泵的介紹
HPLC使用的色譜柱是很細的(1~6 mm),所用固定相的粒度也非常小(幾μm到幾十μm),所以流動相在柱中流動受到的阻力很大,在常壓下,流動相流速十分緩慢,柱效低且費時。為了達到快速、高效分離,必須給流動相施加很大的壓力,以加快其在柱中的流動速度。為此,須用高壓泵進行高壓輸液。高壓、高速是高效
高效液相色譜法儀器的梯度洗脫介紹
類似于GC中的程序升溫。已成為現代高效液相色譜中不可缺少的部分。梯度洗提,就是載液中含有兩種(或更多)不同極性的溶劑,在分離過程中按一定的程序連續改變載液中溶劑的配比和極性,通過載液中極性的變化來改變被分離組分的分離因素,以提高分離效果。梯度洗提可以分為兩種: a.低壓梯度(也叫外梯度):在常
高效液相色譜法儀器的進樣裝置介紹
⑴注射器進樣裝置:進樣所用微量注射器及進樣方式與 GC法一樣。進樣壓力150×10^5Pa時,必須采用停流進樣。 ⑵高壓定量進樣閥:與GC法用的流通法相似,能在高壓下進樣。
關于高效液相色譜的設備高壓泵的介紹
HPLC使用的色譜柱是很細的(1~6 mm),所用固定相的粒度也非常小(幾μm到幾十μm),所以流動相在柱中流動受到的阻力很大,在常壓下,流動相流速十分緩慢,柱效低且費時。為了達到快速、高效分離,必須給流動相施加很大的壓力,以加快其在柱中的流動速度。為此,須用高壓泵進行高壓輸液。高壓、高速是高效
關于高效液相色譜分析的高壓泵的相關介紹
HPLC使用的色譜柱是很細的(1~6 mm),所用固定相的粒度也非常小(幾μm到幾十μm),所以流動相在柱中流動受到的阻力很大,在常壓下,流動相流速十分緩慢,柱效低且費時。為了達到快速、高效分離,必須給流動相施加很大的壓力,以加快其在柱中的流動速度。為此,須用高壓泵進行高壓輸液。高壓、高速是高效
關于高效液相色譜法的發展介紹
高效液相色譜法是用微細顆粒得到高效分離的辦法,也已用于薄層層析。使用5~10微米的吸附劑制板,可得較好的分離效果,為與一般的薄層層析法相區別,稱為高效薄層層析。其優點是樣品量少(只需納克量樣品)、展開距離小、展開時間短,是薄層層析法的一個重要發展。
關于離子高效液相色譜法的介紹
用離子交換樹脂為固定相,電解質溶液為流動相。以電導檢測器為通用檢測器,為消除流動相中強電解質背景離子對電導檢測器的干擾,設置了抑制柱。試樣組分在分離柱和抑制柱上的反應原理與離子交換色譜法相同。 以陰離子交換樹脂(R-OH)作固定相,分離陰離子(如Br-)為例。當待測陰離子Br-隨流動相(NaO
谷胱苷肽的高效液相色譜法檢測介紹
原理:高效液相色譜法是由于溶質在同定相和流動相之間的分配系數、親和力、分子大小、吸附能力等不同,而進行連續分離的過程。 操作步驟: ①色譜條件 色譜柱:Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm) 。 流動相:磷酸二氫鈉和辛烷磺酸鈉混合溶液(磷酸二氫鈉3.0 g
潑尼松的測定—高效液相色譜法介紹
方法名稱潑尼松的測定—高效液相色譜法應用范圍該方法采用高效液相色譜法測定潑尼松的含量。該方法適用潑尼松。方法原理供試品和內標均制成甲醇溶液,進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長254nm處檢測潑尼松(C21H26O5)和內標乙酰苯胺的吸收值,計算出其含量。試劑1、甲醇2、水3、四
高效液相色譜法檢測苯并芘的介紹
高效液相色譜法是目前應用范圍最廣的色譜分析法,首先選取合適的液體作為流動相,采用高壓輸液系統,將流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離,再進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。目前,我國檢測動植物油中苯并芘主要采用GB/T 22509-2008(3)中規定的反相高效液相色譜法,但該
關于高效液相層析法使用儀器的介紹
典型的高效液相層析儀包括輸液系統、層析柱與檢測系統三部分。流動相用一高壓泵輸入。這種高壓泵應滿足以下條件: ①流量恒定,無脈動,并有較大的調節范圍。 ②能抗溶劑腐蝕。 ③有較高的輸出壓力,一般要達到15~300kg/c,也有的高達800kg/c。 ④泵的死體積要小。梯度洗脫裝置必須具備兩
高效液相色譜法的梯度洗脫的介紹
類似于GC中的程序升溫。已成為現代高效液相色譜中不可缺少的部分。梯度洗提,就是載液中含有兩種(或更多)不同極性的溶劑,在分離過程中按一定的程序連續改變載液中溶劑的配比和極性,通過載液中極性的變化來改變被分離組分的分離因素,以提高分離效果。梯度洗提可以分為兩種: a.低壓梯度(也叫外梯度):在常
關于高效液相色譜法的歷史發現介紹
1903年俄國植物化學家茨維特(Tswett)首次提出“色譜法”(Chromatography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念。茨維特使用色譜法 chromatography (來自希臘字, chroma 意思是顏色, graphy 意思是記錄 ?-直譯為顏色記錄)來描述他的彩色
關于高效液相色譜法的實例說明介紹
高效液相色譜法,只要求試樣能制成溶液,而不需要氣化,因此不受試樣揮發性的限制。對于高沸點、熱穩定性差、相對分子量大(大于400以上)的有機物(這些物質幾乎占有機物總數的75%~80%)原則上都可應用高效液相色譜法來進行分離、分析。據統計,在已知化合物中,能用氣相色譜分析的約占20%,而能用液相色
谷胱甘肽的高效液相色譜法測量相關介紹
原理:高效液相色譜法是由于溶質在同定相和流動相之間的分配系數、親和力、分子大小、吸附能力等不同,而進行連續分離的過程。 操作步驟: ①色譜條件 色譜柱:Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)。 流動相:磷酸二氫鈉和辛烷磺酸鈉混合溶液(磷酸二氫鈉3.0 g、
關于谷胱甘肽的高效液相色譜法檢測介紹
一、谷胱甘肽的高效液相色譜法檢測原理:高效液相色譜法是由于溶質在同定相和流動相之間的分配系數、親和力、分子大小、吸附能力等不同,而進行連續分離的過程。 二、谷胱甘肽的高效液相色譜法檢測的操作步驟: ①色譜條件 色譜柱:Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)
高效液相色譜法正反色譜的相關介紹
正相色譜法 采用極性固定相(如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相);流動相為相對非極性的疏水性溶劑(烷烴類如正已烷、環已烷),常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調節組分的保留時間。常用于分離中等極性和極性較強的化合物(如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等)。 反相色譜法 一般用非極性固定相(如
高效液相色譜法檢測蓖麻毒素的介紹
高效液相色譜檢測將待測物質溶于流動相中,利用色譜柱固定相將流動相的組成進行分離,對檢測器收集到的峰信號轉換為待測物質濃度,進而來判定待測物質含量的一種方法,具有速度快、分辨率高、靈敏度高等特點。采用PROTEIN KW-802.5凝膠色譜柱,在柱溫25℃、流速1mL/min、進樣量10μL的條件
使用高效液相色譜法測定頭孢氨芐的含量
一、實驗資料1、檢驗藥品(1)檢驗藥品的名稱? ? 頭孢氨芐。(2)檢驗藥品的來源? ??市場購買或送檢樣品。(3)檢驗藥品的規格、批號、包裝及數量? ??根據藥品包裝確定,并記錄有關情況。2、質量標準(1)檢驗依據? ? 《中國藥典》(2010版)二部208頁“頭孢氨芐”:本品為(6R,7R)-3
使用高效液相色譜法測定頭孢氨芐的含量
一、實驗資料1、檢驗藥品(1)檢驗藥品的名稱? ? 頭孢氨芐。(2)檢驗藥品的來源? ??市場購買或送檢樣品。(3)檢驗藥品的規格、批號、包裝及數量? ??根據藥品包裝確定,并記錄有關情況。2、質量標準(1)檢驗依據? ? 《中國藥典》(2010版)二部208頁“頭孢氨芐”:本品為(6R,7R)-3
高效液相色譜法測定葉黃素的方法介紹
高效液相色譜法是一種靈敏性強、高效、快速的分離方法,能精確檢測各種組分在其樣品中的含量,是使用的最廣泛的對葉黃素進行定量分析的檢測方法。該方法具有較高的精確性、穩定性好,能夠高效、快速的檢測樣品中葉黃素的成分含量 。
阿魏酸的高效液相色譜法分析介紹
用高效液相色譜法測定阿魏酸的含量,方法簡單快速,結果準確,精密度高。文獻介紹其流動相多采用酸性系統,主要有甲醇-水-磷酸系統、甲醇-水-冰乙酸系統、甲醇-乙腈-水-冰乙酸系統等,試驗中可適當調整甲醇的用量。采用HPLC法測定復方銀杏口服液中阿魏酸的含量,流動相為甲醇:1%冰醋酸(45:55),檢
高效液相色譜法色譜柱的拖尾因子的介紹
為保證測量精度,特別當采用峰高法測量時,應檢查待測峰的拖尾因子(T)是否符合各品種項下的規定或不同濃度進樣的校正因子誤差是否符合要求。拖尾因子計算公式為: T(拖尾因子)=W0.05h/2d1式中 W(0.05h)為0.05峰高處的峰寬; d1為峰極大至峰前沿之間的距離。除另有規定外,T應在
高效液相色譜法的出現
1960年代,為了分離蛋白質、核酸等不易汽化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭、哈伯、荷瓦斯、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。高效液相色譜使用粒徑更細的固定相填充色譜柱,提高色譜柱的塔板數,以高壓驅動流動相,
高效液相色譜法的原理
高效液相色譜法的原理是以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測。高效液相色譜法有“四高一廣”的特點:①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載
高效液相色譜法的原理
高效液相色譜法的原理是以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測。高效液相色譜法有“四高一廣”的特點:①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載
高效液相色譜法的原理
高效液相色譜法的原理是以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測。高效液相色譜法有“四高一廣”的特點:①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載
高效液相色譜法的原理
高效液相色譜法的原理是以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測。高效液相色譜法有“四高一廣”的特點:①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載
高效液相色譜法的原理
高效液相色譜法的原理是以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測。高效液相色譜法有“四高一廣”的特點:①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載
高效液相色譜法的應用
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合,HPLC 所達到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體中