DNA連接酶的結構特點
DNA連接酶(DNA Ligase)也稱DNA黏合酶,在分子生物學中扮演一個既特殊又關鍵的角色,那就是連接DNA鏈一個堿基3‘-OH末端和它相鄰堿基的5’-P末端,使二者生成磷酸二酯鍵,從而把兩個相鄰的堿基連接起來。連接酶的催化作用需要消耗ATP。......閱讀全文
DNA連接酶的結構特點
DNA連接酶(DNA Ligase)也稱DNA黏合酶,在分子生物學中扮演一個既特殊又關鍵的角色,那就是連接DNA鏈一個堿基3‘-OH末端和它相鄰堿基的5’-P末端,使二者生成磷酸二酯鍵,從而把兩個相鄰的堿基連接起來。連接酶的催化作用需要消耗ATP。
DNA連接酶作用特點
1. 連接的兩條鏈必須分別具有自由3’-OH和5’-P,而且這兩個基團彼此相鄰;2. 在羥基和磷酸基團間形成磷酸二酯鍵是一種耗能過程。E.coli DNA連接酶 -連接具互補堿基黏性末端(最初研究表明),現在研究可連接平末端;需NAD+輔助因子,活性低,不常用。T 4DNA連接酶-連接具互補堿基黏性
T4DNA連接酶的結構與作用
T4DNA連接酶是ATP依賴的DNA連接酶,催化兩條DNA雙鏈上相鄰的5′磷酸基和3′羥基之間形成磷酸二酯鍵。可接雙鏈DNA的平末端、相容黏末端及其中的單鏈切口,在分子生物學中有廣泛的應用。T4DNA連接酶是經原核表達,柱層析純化獲得的高純T4DNA接酶,SDS-PAGE顯示為一條62kD的蛋白條帶
DNA連接酶(DNA-ligase)介紹
DNA連接酶是1967年在三個實驗室同時發現的。它是一種封閉DNA鏈上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA鏈的5'-PO4與另一DNA鏈的3'-OH生成磷酸二酯鍵。但這兩條鏈必須是與同一條互補鏈配對結合的(T4DNA連接酶除外),而且必須是兩條緊鄰DNA鏈才能被DNA
T4DNA連接酶的化學結構是什么?
T4DNA連接酶的化學結構屬于酶類,其具體細節需要參考專業的生物化學資料或科學文獻。 T4DNA連接酶是一種由大腸桿菌產生的牛胸腺DNA連接酶,它在分子生物學實驗中用于DNA片段的連接。根據現有信息,DNA連接酶催化反應所需的能量來源主要來自于DNA連接酶催化反應所需的能量來源主要來自于NAD+
DNA連接酶的特性
良好的熱穩定性;70℃ 2h,殘留90%活性;93℃ 2h,殘留60%活性;94℃ 2h,殘留40%活性。5’→3’聚合酶活性,對dATP有優先聚合活性;5’→3’外切酶活性;無3’→5’外切酶活性。
DNA連接酶的用途
DNA連接酶主要用于基因工程,將由限制性核酸內切酶“剪”出的粘性末端重新組合,故也稱“基因針線”。人教版高中生物選修3中提到的E·coliDNA連接酶,來源于大腸桿菌,可用于連接粘性末端;T4DNA連接酶,來源于T4噬菌體,可用于連接粘性末端和平末端,但連接效率低。
DNA-連接酶的用途
DNA連接酶主要用于基因工程,將由限制性核酸內切酶“剪”出的粘性末端重新組合,故也稱“基因針線”。人教版高中生物選修3中提到的E·coliDNA連接酶,來源于大腸桿菌,可用于連接粘性末端;T4DNA連接酶,來源于T4噬菌體,可用于連接粘性末端和平末端,但連接效率低。
DNA連接酶的用途
聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)。Taq酶擴增的PCR產物,3’末端總是帶有1個非模板依賴型的突出堿基,而這個堿基幾乎總是A,因為Taq酶對dATP具有優先聚合活性,故可用T載體克隆。
DNA連接酶的性質
大腸桿菌的DNA連接酶是一條分子量為75Ku的多肽鏈。對胰蛋白酶敏感,可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性,可以催化酶與NAD(而不是ATP)反應形成酶-AMP中間物,但不能繼續將AMP轉移到DNA上促進磷酸二酯鍵的形成。DNA連接酶在大腸桿菌細胞中約有300個分子,和DNA聚合酶Ⅰ的分子數
DNA-連接酶的性質
大腸桿菌的DNA連接酶是一條分子量為75Ku的多肽鏈。對胰蛋白酶敏感,可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性,可以催化酶與NAD(而不是ATP)反應形成酶-AMP中間物,但不能繼續將AMP轉移到DNA上促進磷酸二酯鍵的形成。DNA連接酶在大腸桿菌細胞中約有300個分子,和DNA聚合酶Ⅰ的分子數
DNA-連接酶的分類
T4DNA連接酶T4DNA連接酶是ATP依賴的DNA連接酶,催化兩條DNA雙鏈上相鄰的5′磷酸基和3′羥基之間形成磷酸二酯鍵。可接雙鏈DNA的平末端、相容黏末端及其中的單鏈切口,在分子生物學中有廣泛的應用。T4DNA連接酶是經原核表達,柱層析純化獲得的高純T4DNA接酶,SDS-PAGE顯示為一條6
DNA連接酶的缺點
無3’→5’閱讀校正功能,在PCR擴增過程可引起錯配,30次循環錯配率約0.25%。措施:選擇高保真Taq酶,如Pfu。原因:Pfu具有3’→5’外切酶活性。注意:Pfu擴增產物為平末端。
RNA連接酶與DNA連接酶的區別
RNA連接酶與DNA連接酶的區別RNA聚合酶是在轉錄的時候,以核苷酸為原料,DNA的一條鏈為模板,合成RNA的酶RNA連接酶是可以識別特定RNA序列,將兩端RNA鏈接起來的酶
RNA連接酶與DNA連接酶的區別
真核細胞RNA前體形成成熟的功能RNA分子時,需要經過剪切和連接過程.RNA連接酶可能在此過程中起連接作用.真核細胞RNA前體形成成熟的功能RNA分子時,需要經過剪切和連接過程.RNA連接酶可能在此過程中起連接作用.RNA連接酶與DNA連接酶的區別RNA聚合酶是在轉錄的時候,以核苷酸為原料,DNA的
DNA連接酶簡介
DNA 連接酶是生物體內重要的酶,其所催化的反應在DNA的復制和修復過程中起著重要的作用。DNA連接酶分為兩大類:一類是利用ATP 的能量催化兩個核苷酸鏈之間形成磷酸二酯鍵的依賴ATP的DNA 連接酶,另一類是利用煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+) 的能量催化兩個核苷酸鏈之間形成磷酸二酯鍵的依賴NAD
折回DNA的結構特點
中文名稱折回DNA英文名稱fold-back DNA定 義(1)通過變性DNA的鏈內重聯而復性的反向重復序列。(2)DNA分子的一種構象,指分子中的兩個緊鄰區域因含有反向重復序列以氫鍵相系形成的構象。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
松弛DNA的結構特點
中文名稱松弛DNA英文名稱relaxed DNA定 義呈非超螺旋狀態的環狀雙鏈DNA分子。如質粒或病毒DNA基因組,通常是超螺旋結構,在酶或者物理化學因子的作用下雙鏈核酸分子中一條單鏈出現斷裂并導致超螺旋結構破壞,形成帶切口的松弛DNA。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學
線狀DNA的結構特點
中文名稱線狀DNA英文名稱linear DNA定 義DNA的一種構象。同時具有游離3`端和5`端的線性長鏈DNA分子。應用學科遺傳學(一級學科),分子遺傳學(二級學科)
A-型-DNA的結構特點
中文名稱A 型 DNA英文名稱A-form DNA定 義一種右手雙螺旋構型的DNA。螺旋每一圈為11個核苷酸,核苷酸對的平面與雙螺旋軸傾斜20°角。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞化學(二級學科)
葉綠體DNA的結構特點
葉綠體DNA,英文chloroplast?DNA,縮寫cpDNA,存在于葉綠體內,雙鏈環狀,長度中間值通常為45微米,具有獨立基因組。一個葉綠體含有10~50個cpDNA。
α衛星DNA的結構特點
中文名稱α衛星DNA英文名稱α-satellite DNA定 義在人的每一個染色體的著絲粒中發現的含有大約170 bp序列的不同拷貝的串聯排列的DNA。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
異形DNA的結構特點
中文名稱異形DNA英文名稱anisomorphic DNA定 義在Ⅰ型單純皰疹病毒基因組連接區序列中所發現的一種非B型DNA構象。該序列的特點為前后排列的12 bp直接重復序列,富含GC且G和C分別集中在一條鏈上形成寡嘌呤和寡嘧啶雜合鏈的配對,因為負超螺旋的誘導和寡嘌呤和寡嘧啶雜合鏈的某種程度的剛
線粒體DNA的結構特點
線粒體DNA是線粒體中的遺傳物質,線粒體能為細胞產生能量(ATP),是在細胞線粒體內發現的脫氧核糖核酸特殊形態。線粒體是為細胞提供能量(ATP)的細胞器。一個線粒體中一般有多個DNA分子。
變性DNA的結構特點
中文名稱變性DNA英文名稱denatured DNA定 義由于物理(如過熱)或化學(如加入尿素)等因素的影響,使之失去生物活性的DNA分子。不再具有致密的、雙鏈的螺旋結構,而成為松散的和單鏈的結構。去除變性因素,DNA一般可以復性。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
親代DNA的結構特點
中文名稱親代DNA英文名稱parental DNA定 義在復制中作為模板的DNA分子。在復制形成的兩個子代DNA分子中各保留有一條親代DNA鏈。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
間隔DNA的結構特點
中文名稱間隔DNA英文名稱spacer DNA定 義基因組內基因間存在的一種功能未知的非編碼DNA序列。存在于真核細胞及某些病毒基因組中,通常含有高度重復的DNA。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
自在DNA的結構特點
中文名稱自在DNA英文名稱selfish DNA定 義除能復制自身外,不具有其他功能的DNA片段。泛指間隔DNA及衛星DNA。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
A型DNA的結構特點
A型DNA與B型DNA是在兩種環境下同種物質不同的形式。B型DNA:92%RH,鈉鹽,溶液和細胞中天然狀態中的DNA多以此狀態存在。A型DNA:75%RH,鈉鹽。A型DNA也是由反向的兩條多核苷酸鏈組成的雙螺旋,為右手螺旋,但螺旋體較寬而短,堿基與中心軸之傾角也不同,呈19度。
環狀DNA的結構特點
超螺旋,DNA雙螺旋本身進一步盤繞稱超螺旋,超螺旋有正超螺旋和負超螺旋兩種。當盤旋方向與DNA雙螺旋方向相同時,其超螺旋結構為正超螺旋,反之則為負超螺旋,負超螺旋的存在對于轉錄和復制都是必要的。