蛋白質芯片的原理
蛋白芯片技術的研究對象是蛋白質,其原理是對固相載體進行特殊的化學處理,再將已知的蛋白分子產物固定其上(如酶、抗原、抗體、受體、配體、細胞因子等),根據這些生物分子的特性,捕獲能與之特異性結合的待測蛋白(存在于血清、血漿、淋巴、間質液、尿液、滲出液、細胞溶解液、分泌液等),經洗滌、純化,再進行確認和生化分析;它為獲得重要生命信息(如未知蛋白組分、序列。體內表達水平生物學功能、與其他分子的相互調控關系、藥物篩選、藥物靶位的選擇等)提供有力的技術支持。......閱讀全文
蛋白質芯片的原理
蛋白芯片技術的研究對象是蛋白質,其原理是對固相載體進行特殊的化學處理,再將已知的蛋白分子產物固定其上(如酶、抗原、抗體、受體、配體、細胞因子等),根據這些生物分子的特性,捕獲能與之特異性結合的待測蛋白(存在于血清、血漿、淋巴、間質液、尿液、滲出液、細胞溶解液、分泌液等),經洗滌、純化,再進行確認和生
蛋白質芯片的技術原理
蛋白芯片技術的研究對象是蛋白質,其原理是對固相載體進行特殊的化學處理,再將已知的蛋白分子產物固定其上(如酶、抗原、抗體、受體、配體、細胞因子等),根據這些生物分子的特性,捕獲能與之特異性結合的待測蛋白(存在于血清、血漿、淋巴、間質液、尿液、滲出液、細胞溶解液、分泌液等),經洗滌、純化,再進行確認和生
蛋白質芯片的制備
固體芯片的構建常用的材質有玻片、硅、云母及各種膜片等。理想的載體表面是滲透濾膜(如硝酸纖維素膜)或包被了不同試劑(如多聚賴氨酸)的載玻片。外形可制成各種不同的形狀。Lin,SR等人引采用APTS-BS3技術增強芯片與蛋白質的結合。探針的制備低密度蛋白質芯片的探針包括特定的抗原、抗體、酶、吸水或疏水物
蛋白質芯片的種類
蛋白芯片主要有三類:蛋白質微陣列、微孔板蛋白質芯片、三維凝膠塊芯片等。
蛋白質芯片的特點
⒈ 直接用粗生物樣品(血清、尿、體液)進行分析⒉ 同時快速發現多個生物標記物⒊ 小量樣品⒋ 高通量的驗證能力⒌ 發現低豐度蛋白質⒍ 測定疏水蛋白質: 與“雙相電泳加飛行質譜”相比,除了有相似功能外,并可增加測定疏水蛋白質⒎ 在同一系統中集發現和檢測為一體 特異性高 利用單克隆抗體芯片,可鑒定未知抗原
蛋白質芯片技術固體芯片的構建方法
常用的材質有玻片、硅、云母及各種膜片等。理想的載體表面是滲透濾膜(如硝酸纖維素膜)或包被了不同試劑(如多聚賴氨酸)的載玻片。外形可制成各種不同的形狀。Lin,SR等人引采用APTS-BS3技術增強芯片與蛋白質的結合。
蛋白質芯片的種類介紹
蛋白質微陣列哈佛大學的Macbeath和SchreiberL等報道了:通過點樣機械裝置制作蛋白質芯片的研究,將針尖浸入裝有純化的蛋白質溶液的微孔中,然后移至載玻片上,在載玻片表面點上1nl的溶液,然后機械手重復操作,點不同的蛋白質。利用此裝置大約固定了10,000種蛋白質,并用其研究蛋白質與蛋白質間
蛋白質芯片的功能特點
蛋白質芯片是一種高通量的蛋白功能分析技術,可用于蛋白質表達譜分析,研究蛋白質與蛋白質的相互作用,甚至DNA-蛋白質、RNA-蛋白質的相互作用,篩選藥物作用的蛋白靶點等。
蛋白質芯片的應用介紹
基因表達的篩選AngelikaL.等人從人胎兒腦的cDNA文庫中選出92個克隆的粗提物制成蛋白質芯片,用特異性的抗體對其也進行檢測,結果的準確率在87%以上,而用傳統的原位濾膜技術準確率只達到63%。與原位濾膜相比,用蛋白質芯片技術在同樣面積上可容納更多的克隆,靈敏度可達到pg級。抗原抗體檢測在Ca
蛋白質芯片的原理、分類及一般操作步驟(四)
蛋白質芯片較傳統分析方法主要有以下優點 :1所需樣品量極少----微量化(10-100μl);2蛋白芯片上可以實現成千上萬個目標蛋白質的高通量平行分析-----高通量;3有高的信噪比,高準確性、高靈敏度(單克隆抗體);4快速、微型化和自動化;5可通過標準曲線來進行定量檢測;6在整個基因組和蛋白質組水
蛋白質芯片的原理、分類及一般操作步驟(三)
根據載體分類 1玻片芯片?(圖為Raybiotech 公司的一種玻片芯片,共有16個子陣列,每個陣列可以檢測多個指標.可用于定量檢測。)?? 2膜芯片(用PVDF,或NC膜作為載體)?(圖為1個子陣列的膜芯片)蛋白芯片一般的操作步驟 :(以抗體芯片為例)? 整個操作流程包括:1.從組織或細胞、體液中
蛋白質芯片的原理、分類及一般操作步驟(二)
樣品標記法原理圖:? 樣品中的蛋白用生物素標記,然后與捕獲抗體一起孵育,對照蛋白加入到樣品中來監測整個反應過程,包括生物素標記和標準化。結合在芯片上的蛋白利用HRP-鏈霉親和素來檢測,最后采用化學光或者HiLyte?Fluor 555-鏈霉親和素來檢測信號。?一般分類 :根據應用分類:??? 1.蛋
蛋白質芯片的原理、分類及一般操作步驟(一)
概述?蛋白質芯片亦被稱為蛋白質微陣列, 蛋白芯片的技術最早由Roger Ekin在上世紀80年代就已提出,它是將大量蛋白質分子按預先設置的排列固定于一種載體表面形成微陣列, 根據蛋白質分子間特異性結合的原理, 構建微流體生物化學分析系統, 以實現對生物蛋白分子準確、快速、大信息量的檢測, 是
液態芯片的原理
編碼微球:分別用不同配比的兩種熒光染料將直徑5.6μm的聚苯乙烯微球(Beads)染成不同的熒光色,從而獲得多達100種經熒光編碼的微球。交聯探針、抗體或抗原:把針對不同檢測物的核酸探針、抗體或抗原以共價方式結合到特定熒光編碼的微球上。檢測反應:先把針對不同檢測物的、用不同熒光色編碼的微球混合,再加
什么是蛋白質芯片?
蛋白質芯片是一種高通量的蛋白功能分析技術,可用于蛋白質表達譜分析,研究蛋白質與蛋白質的相互作用,甚至DNA-蛋白質、RNA-蛋白質的相互作用,篩選藥物作用的蛋白靶點等。
蛋白質芯片技術特點
⒈ 直接用粗生物樣品(血清、尿、體液)進行分析⒉ 同時快速發現多個生物標記物⒊ 小量樣品⒋ 高通量的驗證能力⒌ 發現低豐度蛋白質⒍ 測定疏水蛋白質: 與“雙相電泳加飛行質譜”相比,除了有相似功能外,并可增加測定疏水蛋白質⒎ 在同一系統中集發現和檢測為一體 特異性高 利用單克隆抗體芯片,可鑒定未知抗原
蛋白質芯片技術簡介
由于利用了DNA與互補的DNA或RNA結合的典型性質,?DNA?芯片在短時間內就取得了成功.?然而,?已經有關于mRNA?和蛋白質之間數量關系上的爭論,?而且實際上在細胞中參與各種不同反應的都是蛋白質.?因此,?如果能制造出蛋白質芯片而不是DNA芯片,?而且如果蛋白質表達強度和鍵合物能被發現,?就有
蛋白質芯片的概念和功能
蛋白質芯片是一種高通量的蛋白功能分析技術,可用于蛋白質表達譜分析,研究蛋白質與蛋白質的相互作用,甚至DNA-蛋白質、RNA-蛋白質的相互作用,篩選藥物作用的蛋白靶點等。
蛋白質芯片的發展方向
⑴建立快速、廉價、高通量的蛋白質表達和純化方法,高通量制備抗體并定義每種抗體的親和特異性;第一代蛋白檢測芯片將主要依賴于抗體和其他大分子,顯然,用這些材料制備復雜的芯片,尤其是規模生產會存在很多實際問題,理想的解決辦法是采用化學合成的方法大規模制備抗體。⑵ 改進基質材料的表面處理技術以減少蛋白質的非
蛋白質芯片的技術優勢
⒈ 直接用粗生物樣品(血清、尿、體液)進行分析⒉ 同時快速發現多個生物標記物⒊ 小量樣品⒋ 高通量的驗證能力⒌ 發現低豐度蛋白質⒍ 測定疏水蛋白質: 與“雙相電泳加飛行質譜”相比,除了有相似功能外,并可增加測定疏水蛋白質⒎ 在同一系統中集發現和檢測為一體 特異性高 利用單克隆抗體芯片,可鑒定未知抗原
基因芯片的原理
基因芯片(gene chip)的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法,即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法,可以用圖11-5-1來說明。在一塊基片表面固定了序列已知的八核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG,與基因芯片上對應位置
組織芯片的構建原理
TMA構建原理可以概括為以下四個步驟:1.選取待研究的組織。人們利用組織芯片技術對人體各組織均有研究,包括肝臟,前列腺,心臟,乳房等等,據相關數據顯示,在大腦組織中的應用最多。醫學上常選取一些病變器官進行研究。根據制作方法來分,微陣列主要有石蠟包埋的組織微陣列和冰凍微陣列兩種。2.經檢測后標記出待研
生物芯片的原理
基因芯片(gene chip)的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法,即通過與一組已知序列的 核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法,可以 用圖11-5-1來說明。在一塊基片表面固定了序列已知的八 核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG,與基因芯
生物芯片原理
生物芯片原理生物芯片技術是應人類基因組計劃而發展起來的一項高新技術。從1992年美國人Stephen Foder 研制出第一塊基因芯片起,生物芯片技術飛速發展:從基因芯片到蛋白質芯片、組織芯片、細胞芯片、芯片實驗室,從表達譜芯片到診斷芯片、藥物篩選芯片、生物傳感器,從寡核苷酸芯片到cDNA 芯片、基
基因芯片-原理
基因芯片(gene chip)的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法,即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法,可以基因芯片的測序原理用圖11-5-1來說明。在一塊基片表面固定了序列已知的八核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG,與
蛋白質芯片技術探針的制備方法
低密度蛋白質芯片的探針包括特定的抗原、抗體、酶、吸水或疏水物質、結合某些陽離子或陰離子的化學集團、受體和免疫復合物等具有生物活性的蛋白質。制備時常常采用直接點樣法,以避免蛋白質的空間結構改變。保持它和樣品的特異性結合能力。高密度蛋白質芯片一般為基因表達產物,如一個cDNA文庫所產生的幾乎所有蛋白質均
蛋白質芯片對于藥物篩選的應用
疾病的發生發展與某些蛋白質的變化有關,如果以這些蛋白質構筑芯片,對眾多候選化學藥物進行篩選,直接篩選出與靶蛋白作用的化學藥物,將大大推進藥物的開發。蛋白質芯片有助于了解藥物與其效應蛋白的相互作用,并可以在對化學藥物作用機制不甚了解的情況下直接研究蛋白質譜。還可以將化學藥物作用與疾病聯系起來,以及藥物
蛋白質芯片技術信號檢測分析
直接檢測模式是將待測蛋白用熒光素或同位素標記,結合到芯片的蛋白質就會發出特定的信號,檢測時用特殊的芯片掃描儀掃描和相應的計算機軟件進行數據分析,或將芯片放射顯影后再選用相應的軟件進行數據分析。間接檢測模式類似于ELISA方法,標記第二抗體分子。以上兩種檢測模式均基于陣列為基礎的芯片檢測技術。該法操作
蛋白質芯片技術生物分子反應
使用時將待檢的含有蛋白質的標本如尿液、血清、精液、組織提取物等,按一定程序做好層析、電泳、色譜等前處理,然后在每個芯池里點入需要的種類。一般樣品量只要2-10μL即可。根據測定目的不同可選用不同探針結合或與其中含有的生物制劑相互作用一段時間,然后洗去未結合的或多余的物質,將樣品固定一下等待檢測即可。
基因芯片的測序原理
基因芯片的測序原理是雜交測序方法,即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法,在一塊基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG,與基因芯片上對應位置的核酸探針產生互補匹配時,通過確定熒光強度最強的探針位置,獲得一組序列完全互補的探針序