視網膜色素上皮細胞的分離培養法相關介紹
上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別受到重視。但上皮細胞培養中常混雜有成纖維細胞,培養時生長速度往往超過上皮細胞,并難以純化,同時上皮細胞難以在體外長期生存,因此純化和延長生存時間是培養關鍵。體內上皮細胞生長在膠原構成的基膜, 因此培養在有膠原的底物上可能利于生長, 另外人或小鼠表皮細胞培養在以 3T3 細胞為飼養層(用射線照射后)時,細胞易生長并可發生一定程度的分化現象。降低 PH、Ca2+含量和溫度,向培養基中加入表皮生長因子,均有利于表皮細胞生長。以表皮細胞為例, 用皮膚表皮和真皮分離培養法可獲得純上皮細胞, 其法如下: 1、 取材:外科植皮或手術殘余皮膚小塊, 早產流產兒皮膚更好, 取角化層薄者, 切成 0.5-1 平方厘米小塊。 2、置 0.02%EDTA 中,室溫,5 分鐘。 3、換入 0.25%胰蛋白酶中,4℃過夜。 4、分離:取出皮塊,用血......閱讀全文
視網膜色素上皮細胞的分離培養法相關介紹
上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別受到重視。但上皮細胞培養中常混雜有成纖維細胞,培養時生長速度往往超過上皮細胞,并難以純化,同時上皮細胞難以在體外長期生存,因此純化和延長生存時間是培養關鍵。體內上皮細胞生長在膠原構成的基膜, 因此培
正常視網膜色素上皮細胞原代培養
實驗材料:1.??? 材料來源:人眼、兔眼或者豬眼等;2.??? 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.??? 特殊取材器械:眼球托與7-0尼龍線。以滅菌的白色橡膠反口膠塞作為眼球托;4.??? 消毒液:200IU/ml的慶大
胰腺上皮細胞分離及培養實驗
實驗方法原理從豚鼠胰腺組織分離細胞,用紗布或尼龍網過濾細胞懸液,將過濾的細胞懸液輕輕加于 BSA 液上面。通過 3 次連續離心和混懸細胞,使呈團狀的細胞分散。然后,將細胞接種于涂有膠原蛋白的培養器皿。試劑、試劑盒F12K 組織培養液含有 20% 小牛血清HBSSHBSS-DVC葡萄糖胰蛋白酶液胰蛋白
牛角質上皮細胞的分離和培養
1) 用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗滌牛眼,水漂洗,再用 70% 乙醇簡單處理一下。2)用 3.5 mm 活組織鉆孔器切取眼小塊上皮組織連同其下的結締組織(最好選取枝狀角膜邊緣組織)。3)將上述組織置于干燥的聚賴氨酸包被的表面,讓其黏附全少 10 分鐘。4) 加入培養液(MEM, 含 10%FCS,
牛角質上皮細胞的分離和培養
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1) 用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗滌牛眼,水漂洗,再用 70% 乙醇簡單處理一下。2)用 3.5 mm 活組織鉆孔器切取眼小塊上皮組織連同其下的結締組織(最好選取枝狀
牛角質上皮細胞的分離和培養
實驗步驟1) 用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗滌牛眼,水漂洗,再用 70% 乙醇簡單處理一下。2)用 3.5 mm 活組織鉆孔器切取眼小塊上皮組織連同其下的結締組織(最好選取枝狀角膜邊緣組織)。3)將上述組織置于干燥的聚賴氨酸包被的表面,讓其黏附全少 10 分鐘。4) 加入培養液(MEM, 含 10%
視網膜色素變性的基本介紹
原發性視網膜色素變性(RP),也稱為毯層視網膜變性,是一種進行性、遺傳性、營養不良性退行性病變,主要表現為慢性進行性視野缺失,夜盲,色素性視網膜病變和視網膜電圖異常,最終可導致視力下降。 2018年5月11日,國家衛生健康委員會等5部門聯合制定了《第一批罕見病目錄》,視網膜色素變性被收錄其中。
葉綠體色素的分離(柱層析法)
原理 吸附劑如蔗糖、Al2 O3 、MgO、CaCO3 等對各種物質有不同的吸附力,吸附力的大小隨吸附劑的種類而異;同一吸附劑在不同的溶劑中吸附力的大小也不同。被吸附的物質由于其結構中極性基團的種類和數量不同,吸附力也不相同。各種官能團的極性大小次序為;-CH2 -CH2 -<-CH=
原代肺泡上皮細胞的體外分離培養
1、完全無血液殘留肺臟組織:2、消化肺組織:常用細胞消化酶:胰蛋白酶、彈性蛋白酶、膠原酶。經支氣管將酶灌注到完整的肺中消化,或把肺組織剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3、分離純化細胞:原代肺泡上皮細胞的分離純化主要方法:(1)密度梯度離心法:密度梯度離心分離細胞的原理是不同細胞的沉降系數不同
視網膜色素變性的功能改變介紹
(1)夜盲 為本病最早出現的癥狀,常始于兒童或青少年時期,且多發生在眼底有可見改變之前。開始時輕,隨年齡增生逐漸加重。 (2)暗適應檢查 早期錐細胞功能尚正常,桿細胞功能下降,使桿細胞曲線終末閾值升高,造成光色間差縮小。晚期桿細胞功能喪失,錐細胞閾值亦升高,形成高位的單相曲線。 (3)視野與
視網膜色素變性的臨床變異介紹
(1)單眼性原發性視網膜色素變性 非常少見。診斷為本型者,必須是一眼具有原發性視網膜色素變性的典型改變,而另眼完全正常(包括電生理檢查),經五年以上隨訪仍未發病,才能確定。此型患者多在中年發病,一般無家族史。 (2)象限性原發性視網膜色素變性 亦甚少見。特點為病變僅累及雙眼同一象限,與正常區域
牛ES細胞的分離培養相關介紹
Saito等在加有LIF的培養基中對牛ICM進行培養,分離得到牛ES細胞并進行傳代。Sims等使用與一般ES細胞分離完全不同的低密度培養法,使用BRL(buffaloratliver)條件培養基并添加亞硒酸鈉、胰島素、運鐵蛋白和50mL/L胎牛血清,培養6d~10d,得到15個ES細胞系,將其作
葉綠體色素的分離紙層析法實驗
實驗方法原理葉綠體色素中的各種色素化學結構不同,因而它們的物理化學性質如極性、吸收光譜、溶解度等也不同。葉綠素和類胡蘿卜素是酯類化合物,不溶于水僅溶于已烷、石油醚等非極性溶劑中,可利用不同色素在各種有機溶劑中的分配系數以及在吸附劑上被吸附程度的不同而將葉綠體色素分離開。儀器、耗材色層分析用濾紙 ?
葉綠體色素的分離紙層析法實驗
葉綠體色素中的各種色素化學結構不同,因而它們的物理化學性質如極性、吸收光譜、溶解度等也不同。葉綠素和類胡蘿卜素是酯類化合物,不溶于水僅溶于已烷、石油醚等非極性溶劑中,可利用不同色素在各種有機溶劑中的分配系數以及在吸附劑上被吸附程度的不同而將葉綠體色素分離開。實驗方法原理葉綠體色素中的各種色素化學結構
葉綠體色素的分離紙層析法實驗
實驗方法原理?葉綠體色素中的各種色素化學結構不同,因而它們的物理化學性質如極性、吸收光譜、溶解度等也不同。葉綠素和類胡蘿卜素是酯類化合物,不溶于水僅溶于已烷、石油醚等非極性溶劑中,可利用不同色素在各種有機溶劑中的分配系數以及在吸附劑上被吸附程度的不同而將葉綠體色素分離開。儀器、耗材?色層分析用濾紙培
方案23.7-胰腺上皮細胞分離及培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 從豚鼠胰腺組織分離細胞,用紗布或尼龍網過濾細胞懸液,將過濾的細胞懸液輕輕加于 BSA 液上面。通過 3 次連續離心和混懸細胞,使呈團狀的細胞分散。然后,將細胞接種于涂有膠原蛋白的培養器皿。
膜分離法的用途相關介紹
膜分離法的主要特點是無相變,能耗低,裝置規模根據處理量的要求可大可小,而且設備簡單,操作方便安全,啟動快,運行可靠性高,不污染環境,投資少,用途廣等優點。各種氣體分離方法的規模,經濟性,技術成熟程度,能耗和用途如下: 高分子分離膜是用高分子材料制成的具有選擇性透過功能的半透性薄層物材料。主要有
共沉淀分離法的相關介紹
當沉淀從溶液中析出時,溶液中的某些原本可溶的組分被沉淀劑沉淀下來,共同存在于沉淀物中的現象即為共沉淀現象。在沉淀分離、質量測定和材料制備中所得到的沉淀往往不是絕對純凈的,這對于分離和測定來說是不利的。但有時為了得到某些離子,可利用共沉淀進行分離富集,變不利為有利。共沉淀分離法就是加入某種離子同沉
細胞懸浮培養法的相關介紹
用液體培養基對保持良好的分散狀態的單個細胞或小的細胞聚集體于搖床上進行培養的方法,稱為細胞懸浮培養法(cell suspension culture)。依據培養目的不同,可分為淺層培養和深層培養。淺層培養是指使培養材料的一部分裸露于液體培養基表面,采用靜止培養的方式,適用于各種器官和組織的培養。
細胞平板培養法的相關介紹
將制備好的單細胞懸浮液,按照一定的細胞密度,接種于適當厚度的薄層固體培養基上進行培養的方法,稱為平板培養。 等量的單細胞培養液與等量熔化(30~50℃)的瓊脂培養基(0.6%~1%)混合,迅速鋪板于培養皿中,瓊脂冷卻凝固后,細胞分布均勻地被固定在薄層(厚度大約1mm)培養基中。培養皿用石蠟膜封
視網膜檢影法的相關疾病
早產兒視網膜病變,原發性開角型青光眼,眼外肌病及弱視,眼瞼帶狀皰疹,青光眼睫狀體炎綜合征,鈍挫傷,視網膜色素變性,斜視,先天性眼球震顫,眼球震顫阻滯綜合征
葉綠體色素的提取和分離(紙層析法)
? 原理 ? 葉綠體色素是植物吸收太陽光能進行光合作用的重要物質,主要由葉綠素a、葉綠素b、胡蘿卜素和葉黃素組成。從植物葉片中提取和分離色素是對其認識和了解的前提。利用葉綠體色素能溶于有機溶劑的特性,可用丙酮提取。 分離色素的方法有多種,紙層析是其中最簡便的一種。當溶劑不斷地從層
上皮細胞的培養
上皮細胞培養?1)表皮細胞培養?1.取材:取外科植皮或手術殘余皮膚小塊,以角化層薄者為佳,早產流產兒皮膚更好,切成0.5~1平方厘米小塊。?2.EDTA處理:先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。?3.冷消化:換入0.25%胰蛋白酶中,置4℃過夜。?4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層
乳腺上皮細胞分離培養操作步驟和注意事項
乳腺主要由腺上皮組成,早期乳汁或斷奶后的乳汁含有上皮細胞團塊,可用離心法收集上皮細胞(混雜有巨噬細胞),培養時常用人胚小腸纖維細胞作飼養層,可抑制間質細胞生長。使用優化培養基可使用上皮細胞傳代,并形成克隆,在膠原底物上要形成三維立體的復層結構。胰島素,氫化可的松,霍亂腸毒素,EGF可促進上皮細胞生長
乳腺上皮細胞分離培養操作步驟和注意事項
乳腺主要由腺上皮組成,早期乳汁或斷奶后的乳汁含有上皮細胞團塊,可用離心法收集上皮細胞(混雜有巨噬細胞),培養時常用人胚小腸纖維細胞作飼養層,可抑制間質細胞生長。使用優化培養基可使用上皮細胞傳代,并形成克隆,在膠原底物上要形成三維立體的復層結構。胰島素,氫化可的松,霍亂腸毒素,EGF可促進上皮細胞生長
薄層色譜法分離菠菜葉色素的原理
薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在移動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。 薄層層析可根據作為固定相的支持物不同,分為薄層吸附層析(吸附劑)、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子
視網膜色素變性的鑒別診斷
根據上述病史、癥狀、視功能及檢眼鏡檢查所見,診斷并無太大困難。但當與一些先天生或后天性脈絡膜視網膜炎癥后的繼發性視網膜色素變性注意鑒別。 先天性梅毒和孕婦在妊娠第3個月患風診后引起的胎兒眼底病變,出生后眼底所見與本病幾乎完全相同,ERG、視野等視功能檢查結果也難以區分。只有在確定患兒父母血清梅
視網膜色素變性的病因分析
本病為遺傳性疾病。其遺傳方式有常染色體隱性、顯性與X性連鎖隱性三種。以常染色體隱性遺傳最多;顯性次之;性連鎖隱性遺傳最小。雙基因和線粒體遺傳也有報道。 生物化學研究發現氨基乙磺酸缺乏可引起貓產生視網膜色素變性,氨基乙磺酸是一種含硫氨基酸,在視網膜中含量很高,有可能是一種神經介質因子,起保護作用
ReNeuron視網膜祖細胞治療視網膜色素變性
ReNeuron Group公司是細胞療法開發領域的全球領導者,致力于利用其獨特的干細胞技術開發“現成的(off-the-shelf)”干細胞療法,而無需免疫抑制藥物。該公司的先導臨床候選療法正開發用于治療中風所致殘疾以及致盲疾病視網膜色素變性(RP)。 近日,該公司在加拿大溫哥華舉行的第六屆
關于視網膜色素變性的治療和預防的介紹
一、治療 1.一般血管擴張劑及視神經、視網膜營養藥。 2.中醫中藥 主要是活血化淤、補腎明目類。 3.組織療法及微量元素補充。 4.基因治療 對嚴重的視網膜色素上皮變性已有研究。 5.手術治療 比如肌肉移植和色素上皮移植,療效不甚明顯。對RP的并發癥如白內障和青光眼的手術治療。