用胰酶消化貼壁細胞一般消化多長時間
因細胞而異如成纖維細胞很好消化（一分鐘），而上皮細胞對胰酶很賴受，要很長時間。心肌細胞只要0.25的酶，2-3分鐘即可，不用放入培養箱......閱讀全文
細胞消化胰酶的配制
適用于，無師兄、師姐、非細心、單獨開展細胞培養的實驗者對一般細胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100ml PBS,0.25g胰酶步驟：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl
如何選擇合適細胞的消化酶重組胰酶和動物源胰酶
培養細胞的老師們都知道細胞的生命是極其脆弱的在培養過程中有哪些行為是比較傷害細胞的呢？在培養貼壁細胞過程中消化過程在一定程度上是對細胞的一種折磨但是又不得不進行這個過程所以如何做好細胞消化善待細胞們是我們一定要了解的步驟~?胰酶的作用原理胰酶是一種蛋白酶，酶切位點是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基
細胞原代培養實驗——胰酶消化法
細胞原代培養可以：（1）為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段；（2）為傳代培養創造條件；（3）服務于臨床實踐，用于藥物篩選等。實驗方法原理將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、
細胞傳代消化時所用胰酶的濃度
細胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎？不見得！因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++,?Mg++離子和血清等因素有關。通常情況下，pH?8.0?,?溫度?37?oC?其作用能力最強。另外，鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進行傳代消化前，一定要
方案5－蛋白質的胰酶消化實驗
實驗材料凍干的目標蛋白質試劑、試劑盒CaCl2NH4HCO3苯甲基磺酰氟（PMSF)胰酶貯存液Tween-20儀器、耗材聚丙烯試管水浴箱實驗步驟1.凍干的蛋白質底物溶解在 1% 的碳酸氫銨中，控制使用盡量少的溶液體積，以達到較高的底物濃度。當蛋白質底物很微量（如小于 1mg) 時，加入 Tween-
基因重組胰蛋白酶與傳統胰酶的消化對比
胰蛋白酶（Trypsin）是一種絲氨酸蛋白水解酶。其前體為無生物活性的胰蛋白酶原（trypsinogen），產生于胰臟。隨胰液分泌到小腸中，被小腸中的腸肽酶激活后，能將蛋白質分解為多肽，進而分解成為氨基酸。其切割肽鏈的位點主要位于賴氨酸或精氨酸的羧基端。故在體外細胞培養中，胰蛋白酶被用于消化貼壁細胞
用胰酶消化貼壁細胞一般消化多長時間
因細胞而異如成纖維細胞很好消化（一分鐘），而上皮細胞對胰酶很賴受，要很長時間。心肌細胞只要0.25的酶，2-3分鐘即可，不用放入培養箱
細胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎？
不見得！因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關。通常情況下，pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力最強。另外，鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進行傳代消化前，一定要用D-Hanks液或PBS液反
細胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎
不見得！因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關。通常情況下，pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力最強。另外，鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進行傳代消化前，一定要用D-Hanks液或PBS液反
細胞傳代消化時所用胰酶濃度是否越高越好？
不見得！因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca2+,?Mg2+和血清等因素有關。通常情況下，pH?8.0?,?溫度?37 ℃ 其作用能力最強。另外，鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進行傳代消化前，一定要用D-Hanks液或PBS液反復沖洗
小鼠肝細胞原代培養實驗——胰酶消化法
小鼠肝細胞原代培養可用于：（1）用于細胞保種；（2）用于分子生物學研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。?實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEM無血清DMEM培養基胰酶PBS
大鼠星型膠質細胞培養實驗——胰酶消化法
實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒苯巴比妥解剖液胰蛋白酶DnaseDM培養液儀器、耗材離心管培養箱手術器材實驗步驟一、 取14.5d SD大鼠一只。二、 苯巴比妥0.5 ml 腹腔注射，待麻醉后置于手術臺上，酒精棉球消毒皮膚，開腹取出子宮（約12-14個），放入解剖液中，剖開子宮，取出胚胎，放入解剖液中，
大鼠肝星狀細胞原代培養實驗_胰酶消化法
大鼠肝星狀細胞原代培養可以：（1）用于細胞保種；（2）用于分子生物學研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM酶消化液
怎樣胰酶消化過久會提高細胞的凋亡率
一般說來，胰酶消化時間過長，對細胞會造成損傷，影響其活力，甚至細胞破碎。如果胰酶消化時間過長，就要注意在加入胰酶消化前先用PBS沖洗一下培養瓶，這樣可提高胰酶消化能力，縮短消化時間；另外，可以在配制胰酶時加入EDTA，這樣就更易消化細胞。如果細胞長久不貼壁，可試用下面的方法：1、將細胞接種到培養后，
胰酶
制法要求本品應從檢疫合格的豬、羊或牛胰中提取所用動物的種屬應明確,生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規范》的要求性狀本品為類白色至微黃色的粉末;微臭,但無霉敗的臭氣;有引濕性;水溶液煮沸或遇酸即失去酶活力。檢查脂肪取本品1.0g,置具塞錐形瓶中,加乙醚10ml,密塞,時時旋動,放置約2小時后,將
原代培養的細胞每次用胰酶消化去除雜細胞
可能是消化時間過長引起的。每種細胞消化時間都不一樣，得自己摸索條件。加入胰酶后，注意觀察細胞，在細胞開始收縮的適當時間里就得及時終止，否則對細胞損傷很大。
胰激肽原酶
制法要求本品應從檢疫合格的豬胰中提取,生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規范》的要求。本品來源于動物,在生產過程中應采用適宜的病毒滅活工藝等方法進行病毒安全性控制。性狀本品為白色或類白色粉末;無臭本品在水中易溶,在乙醇或乙醚中幾乎不溶鑒別(1)照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定供試品溶液
胰酶簡介
① 40—55℃時催化淀粉水解作用最大，溫度高于55℃，本身遭破壞。②PH值為6.5—7時活性很大；PH值為4時失去活力；PH值為11值活力最大，但極易被破壞。③ 溶液穩定性差，配液后穩定時間為12h。
大鼠肺成纖維細胞原代培養實驗——胰酶消化法
大鼠肺成纖維細胞培養可以：（1）用于細胞保種；（2）用于分子生物學研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法原理將大鼠的肺成纖維細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的生長培養基培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。?實驗材料Wistar乳鼠試劑、試劑盒PBS牛血
胰酶消化一個T25瓶的sf9細胞
1. 去除培養基。 2. 用2ml 1xPBS（足以覆蓋細胞表面）洗滌細胞，去除PBS。 3. 加入2ml 1x胰酶EDTA（恰好覆蓋細胞表面）。 4. 37 ℃孵育5到10分鐘。在儀器下檢測看到5分鐘后它們正在向上移動。 5. 向細胞中加入2ml 細胞培養液，移入錐形管，用2ml培養液洗瓶壁，移入
胰酶分離提取
一、原理與目的提取制備酶的經典方法，多采用硫酸銨分級沉淀，胰酶在75%飽和度硫酸銨中沉淀，其它雜蛋白一般在10%硫酸銨飽和度下被沉淀而除去。經此多次提取，最后在PH8.0硼酸緩沖液中得到結晶。胰酶在PH3.0時最穩定，可在低溫下儲存較長的時間而不失活；低與此PH酶易變性；高于PH5時，酶易自溶而失活
hela細胞用胰酶消化后會改變細胞的有絲分裂期嗎
這個要看胰酶的作用強度和作用時間了。如果控制得當，影響不大。
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養實驗_胰酶消化法1
實驗方法原理將小鼠的胚胎成纖維細胞（MEF）從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置MEF生長培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料孕鼠試劑、試劑盒PBSEDTA胰酶MEF生長培養基FBS高糖DMEM儀器、耗材眼科直剪眼科直鑷眼科彎鑷玻璃平皿3尼龍濾網離心管手術
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養實驗_胰酶消化法2
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養可應用于：（1）細胞保種；（2）分子生物學研究；（3）基因治療相關研究。實驗方法原理將小鼠的成纖維細胞（MEF）從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置MEF生長培養基培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料小鼠試劑、試劑盒PB
胰泌素促胰酶素聯合試驗
胰泌素-促胰酶素聯合試驗 【參考范圍】見臨床意義。 【影響因素】1.不同的研究采用不同劑量的胰泌素（0.25～1.OU/kg）和促胰酶素（1U/kg）組合。 2.本試驗的敏感度為74%～90%，結果受被研究者疾病的嚴重性、醫學教|育網搜集整理對照組的情況和刺激劑的劑量、用法等因素的影響。 【臨床意
胰泌素促胰酶素聯合試驗
胰泌素-促胰酶素聯合試驗【參考范圍】見臨床意義。【影響因素】1.不同的研究采用不同劑量的胰泌素（0.25～1.OU/kg）和促胰酶素（1U/kg）組合。2.本試驗的敏感度為74%～90%，結果受被研究者疾病的嚴重性、醫學教|育網搜集整理對照組的情況和刺激劑的劑量、用法等因素的影響。【臨床意義】1.用
胰凝乳蛋白酶
用 SUPHEPA 測定 用 GLUPHEPA 測定 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 α
胰凝乳蛋白酶
實驗方法原理 實驗材料 α-胰凝乳蛋白酶試劑、試劑盒 三甲醇胺-NaOH三甲醇胺-NaOHN-琥珀酰-L-苯丙氨酰對硝基苯胺儀器、耗材 分光光度計實驗步驟 實驗所需「試劑」具體見「其他」在 25℃。測定 405 nm 吸光值增加，對硝基苯胺的吸收系數為 ε405＝10.2×103 l（mol · c
胰酶的制法要求
本品應從檢疫合格的豬、羊或牛胰中提取所用動物的種屬應明確,生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規范》的要求
胰酶腸溶片
性狀本品為腸溶片,除去腸溶衣后,顯白色至淡黃色。檢查微生物限度取本品,照胰酶項下的方法檢查應符合規定。其他應符合片劑項下有關的各項規定(通則0101)。效價測定胰蛋白酶照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定供試品原液取本品5片(0.3g規格)或3片(0.5g規格),除去腸溶衣,研細,加冷至5℃以