PCR污染問題怎么監測和預防
這兩天正好看到一個“2012年全國公安司法及血液中心標準DNA實驗室裝備展覽會”的宣傳文章說這個問題，復制來給你看看吧。PCR室污染監測及防御2012年全國司法及血液中心國際標準DNA實驗室觀摩會將在明年6月于青島國際會展中心舉行，這次觀摩會秉著打造全球頂尖展會的理念，將展示具有世界一流水平，符合國際標準的DNA實驗室樣板間。并將在展示過程中向參會人員免費發放實驗室解決方案，本文就是日前由組委會展示的該系列方案中的一部分。PCR反應最大的魅力是擴增力能與高靈敏度，但易污染一直是困擾各實驗室的大問題，極微量的污染就可能造成假陽性反應，破壞試驗結果。如何監測與防止PCR污染，是現在各實驗室的重要課題。一、污染監測一個好的PCR實驗室，必須要時刻注意污染的監測，考慮是否受到污染，如有污染，是何原因造成的。通過有效地監測，采取正確的相應措施，防止或消除污染。對照試驗是監測PCR污染的重要手段。1、陰性對照：陰性對照是每次PCR實驗都必須......閱讀全文
PCR技術（四）：PCR污染與對策
PCR反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污 染，極其微量的污染即可造成假陽性的產生.一、污染原因 (一)標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于 密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提 取過程中，由
PCR污染的監測
一個正規的實驗室，要時刻注意監測實驗室的污染情況。了解實驗室有無污染，污染原因，污染程度，以便采取有效措施，防止和消除污染。一般通過陰陽性對照檢測污染情況。1、陰性對照：? ? 不將模板DNA或RNA加入到PCR試劑中，進行PCR擴增，對試劑是否污染進行監測。陰性水樣參與核酸提取和擴增監測整個試驗
PCR污染與對策
PCR反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產生.污染原因 (一)標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中，由于吸樣槍污
PCR產物污染誘因
PCR反應的zui大特點是不僅具有較大擴增能力而且還有著極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產生。污染原因（1）標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染；標本核酸模板在提取過程中，
PCR污染與對策
PCR反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產生. 一、污染原因 1、標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中，由于吸樣
如何預防PCR污染？
? 進行 PCR 反應時，遵照下列規則有助于防止 PCR 的污染。（1）PCR 的前處理和后處理在不同的房間或不同的隔離工作臺上進行。即整個 PCR 操作要在不同的隔離區（標本處理區，PCR 擴增區，產物分析區）進行，特別是陽性對照需在另一個隔離環境中貯存、加入。（2）試劑要分裝，每次取完試劑后蓋緊
PCR污染及防止污染的方法
污染原因 （一）標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中，由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散，導致彼此間的污染。 （二）PCR試劑的污染:主
PCR污染的主要污染源介紹
?(一)標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中，由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散，導致彼此間的污染。?(二)PCR試劑的污染:主要是由于
PCR的污染有哪些？
（1）PCR 反應前污染主要是樣品 DNA 的交叉污染。提取 DNA 使用的儀器上殘留的雜質 DNA 或反應管中殘留的 PCR 產物、PCR 操作者皮膚或頭發等均可引起樣品污染。其中 PCR 產物的污染，也稱殘留污染（carryover），是引起樣品交叉污染的主要因素。明膠、Taq DNA 聚合酶等
PCR污染的處理（一）
前言?一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill?Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase?chain?reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一
PCR污染的處理（三）
（二）反應液污染?可采用下列方法之一處理：1.?DNase?I法：PCR混合液（未加模板和Taq聚合酶）加入0.5U?DNase?I，室溫反應30?min后加熱滅活，然后加入模板和Taq聚合酶進行正常PCR擴增。該方法的優點是不需要知道污染DNA的序列；2.?內切酶法：選擇識別4個堿基的內切酶（如M
PCR實驗污染與對策
PCR反應的zui大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產生。一、污染原因1、標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中，由于吸樣槍
PCR污染的監測方法
1.陽性對照:在建立PCR反應實驗室及一般的檢驗單位都應設有PCR陽性對照，它是PCR反應是否成功、產物條帶位置及大小是否合乎理論要求的一個重要的參考標志。陽性對照要選擇擴增度中等、重復性好，經各種鑒定是該產物的標本，如以重組質粒為陽性對照，其含量宜低不宜高(100個拷貝以下)，但陽性對照尤其是重組
PCR污染的處理（二）
PCR污染及解決對策?PCR檢測微量感染因子時，一定要注意產物殘留污染的問題。?一．?污染的預防進行PCR操作時，操作人員應該嚴格遵守一些操作規程，最大程度地降低可能出現的PCR污染或杜絕污染的出現。（一）劃分操作區：目前，普通PCR尚不能做到單人單管，實現完全閉管操作，但無論是否能夠達到單人單管，
PCR污染及解決對策
?聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)是一種選擇性體外擴增DNA或RNA片段的方法，在微生物感染的診斷中具有重要的價值。在PCR擴增過程中，擴增的DNA產量是呈指數上升的，經過n個循環的擴增，一個DNA分子的產量便達到2n個拷貝。PCR產物一般為1013拷貝/
PCR的污染與對策
?一、污染原因 ?（一）標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于 密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提 取過程中，由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠 或形成氣溶膠而擴散，導致彼此間的污染. （二）P
PCR污染的防止方法
(一)合理分隔實驗室:將樣品的處理、配制PCR反應液、PCR循環擴增及PCR產物的鑒定等步驟分區或分室進行，特別注意樣本處理及PCR產物的鑒定應與其它步驟嚴格分開。最好能劃分①標本處理區;②PCR反應液制備區;③PCR循環擴增區;④PCR產物鑒定區。其實驗用品及吸樣槍應專用，實驗前應將實驗室用紫外線
PCR實驗室污染
在眾多的生物實驗室中，分子生物學檢測方法如PCR因其檢測靈敏度高、準確度好、操作方便、快速等優勢已經被廣泛應用。不過正是由于它的高靈敏性，實驗室中極微量的污染源都有可能導致檢測結果的假陽性，所以對環境中污染源的防控也極為重要。一旦出現實驗室環境污染，比如樣本之間交叉污染、試劑污染、儀器污染、陽性對照
PCR實驗如實預防實驗污染
進行PCR操作時，操作人員應該嚴格遵守一些操作規程，zui大程度地降低可能出現的PCR污染或杜絕污染的出現。1.劃分操作區：目前，普通PCR尚不能做到單人單管，實現完全閉管操作，但無論是否能夠達到單人單管，均要求實驗操作在三個不同的區域內進行，PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區內進行：(1)標本
PCR實驗如實預防實驗污染
進行PCR操作時，操作人員應該嚴格遵守一些操作規程，最大程度地降低可能出現的PCR污染或杜絕污染的出現。劃分操作區：目前，普通PCR尚不能做到單人單管，實現完全閉管操作，但無論是否能夠達到單人單管，均要求實驗操作在三個不同的區域內進行，PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區內進行：(1)標本處理區，
PCR簡介及污染的處理
PCR技術簡介? 前言?一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶鏈式
PCR反應污染源的排查
PCR反應污染源的排查如果PCR反應不慎發生污染，應逐一分析排查污染源。一、設立對照組：每次擴增均應設立PCR體系中各試劑的隨機對照組，即除模板DNA外應包含PCR反應所需的全部組分。若擴增結果中對照組為陽性，則表明有一種或數種試劑被污染。排查方法：將PCR反應所需各組分試劑分別置于不同的擴增反應管
PCR實驗室的污染來源
1、樣本間交叉污染：收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴外溢；不同樣本移液時忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖；移液器等實驗器具及耗材未及時消毒滅菌；不同樣本同時開蓋或樣本劇烈震蕩、反復吹吸導致氣溶膠形成擴散，相互交叉污染。2、實驗試劑污染：主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中，由于移液器、容器、陰性對照
PCR儀反應液污染處理方法
PCR儀是一種利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。因而，在PCR儀使用時對于環境要求很高，為了避免實驗未完成前可能出現的任何污染反應液的情況，應該了解關于反應液受到污染時，反應液處理方法： l ?紫外照射法：未加模板
『PCR實驗污染』的解決辦法！
PCR污染是每個實驗室都多多少少會遇到的問題。原因在于，PCR是非常靈敏的一項檢測，100個拷貝之內的靶序列就足以產生陽性擴增，從而容易出現DNA污染導致的假陽性。那么，怎樣遠離PCR的污染呢？? 圖 PCR污染之一瞥? 首先，要辨別PCR污染的來源。設立陰陽性對照，有利于檢測反應體系各成分的污
PCR實驗室污染的原因
污染原因：1）標本間交叉污染：標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染；標本核酸模板在提取過程中，由于吸樣槍污染導致標本間污染；有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散，導致彼此間的污染。2） PCR試劑的污染：主要是
細胞支原體污染的PCR檢測
支原體菌株來源：???????M.Arginini?ATCC23838?精氨酸支原體???????M.FermentaneATCC19989發酵支原體???????M.SalivariumATCC23064唾液支原體???????M.HominisATCC23114人型支原體???????M.Ora
怎么防止PCR實驗室污染
PCR實驗室污染標本間交叉污染：標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染；標本核酸模板在提取過程中，由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散，導致彼此間的污染。PCR試劑的污染：主要是由于
PCR實驗室如何避免污染？
PCR實驗室污染? ? 標本間交叉污染：標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染；標本核酸模板在提取過程中，由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散，導致彼此間的污染。?? ? P
PCR儀反應液污染處理方法
PCR儀是一種利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。因而，在PCR儀使用時對于環境要求很高，為了避免實驗未完成前可能出現的任何污染反應液的情況，應該了解關于反應液受到污染時，反應液處理方法： l ?紫外照射法：未加模板