細胞破碎方法介紹
1. 機械法 1.1 組織搗碎 將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。一般用于動物組織、植物肉質種子、柔嫩的葉芽等,轉速可高達10000rpm/M以上。由于旋轉刀片的機械切力很大,制備一些較大分子如核酸則很少使用 1.2 勻漿器 先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎。勻漿器的研缽磨球和玻璃管內壁之間間隙保持在十分之幾毫米距離。制作勻漿器的材料,除玻璃外,還可以用硬質塑料、不銹鋼、人造熒光樹脂等。 此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于量少和動物臟器組織。 存在的問題:較易造成堵塞的團狀或絲狀較小的革蘭氏陽性首以及有些亞細胞器,質地堅硬,易損傷勻漿閥,也不適合用該法處理。 1.3 研缽 多用于細菌或其他堅硬植物材料,研磨時常加入少量石英砂,玻璃粉或其他研磨劑,以提高研磨效果。 1.4 細菌磨 是一種改良......閱讀全文
細胞破碎方法介紹
1. 機械法 1.1 組織搗碎 將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。一般用于動物組織、植物肉質種子、柔嫩的葉芽等,轉速可高達10000rpm/M以上。由于旋轉刀片的機械切力很大,制備一些較大分子如核酸則很少使用 1.2
細胞破碎方法介紹
1、高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種子等。2、玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于
細胞破碎方法的介紹
自溶作用 是酶解的另一種方法,所需溶胞的酶是由微生物本身產生的。影響自溶過程的因素有溫度,時間,pH緩沖液濃度,細胞代謝途徑等。自溶法在一定程度上能用于工業規模,但是,對不穩定的微生物容易引起所需蛋白質的變性,自溶后的細胞培養液過濾速度也會降低。 滲透壓沖擊 是較溫和的一種破碎方法,將細胞
常用的幾種細胞破碎方法介紹
細胞破碎方法簡述 隨著重組DNA技術得到廣泛應用以來,生物技術發生了質的飛躍。很多基因工程產物都是胞內物質,必須將細胞破壁,使產物得以釋放,才能進一步提取,因此細胞破碎是提取胞內產物的關鍵步驟,破碎方法的得當與否,直接影響到所提取產品的產量、質量和生產成本。現將近年來常用的幾種細胞破碎方法介紹一
細胞破碎技術的主要方法介紹
機械法高壓勻漿破碎法(homogenization)高壓勻漿器是常用的設備,它由可產生高壓的正向排代泵(positive displacenemt pump)和排出閥(discharge valve)組成,排出閥具有狹窄的小孔,其大小可以調節。細胞漿液通過止逆閥進入泵體內,在高壓下迫使其在排出閥的小
細胞破碎介紹
定義:細胞破碎就是采用一定的方法,在一定程度上破壞細胞壁和細胞膜,設法使胞內產物最大程度地釋放到液相中,破碎后的細胞漿液經固液分離除去細胞碎片后,再采用不同的分離手段進一步純化.1細胞壁的組成和結構微生物細胞壁的化學組成和結構細菌,肽聚糖的網狀結構酵母菌:葡聚糖,甘露聚糖,蛋白質真菌:細胞壁更厚植物
細胞破碎的方法
機械法 主要通過機械切力的作用使組織細胞破碎的方法,常用的器械有組織搗碎機、勻漿器、研缽和研磨、壓榨器等。1.?組織搗碎機 將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至zui慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。一般用于動物組織、植物肉質種子、柔嫩的葉芽等,轉速可高達1
細胞破碎技術主要方法
樣品前處理-細胞破碎技術細胞破碎技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術,由于細菌、酵母、真菌、植物都有細胞壁,但成分不同,且同類細胞結成的網狀結構不同,因此其細胞壁的堅固程度不同,總體呈現遞增態勢。動物細胞雖沒有細胞壁,但具有細胞膜,也需要一定的細胞破碎方法來
細胞破碎方法酶解法
利用酶反應,分解破壞細胞壁上特殊的鍵,從而達到破壁的目的。優點:專一性強,發生酶解的條件溫和,缺點:酶水解費用較貴,一般只適用于小規模的實驗室研究。溶菌酶是應用最多的酶,它能專一地分解細胞壁上糖蛋白分子的α-1,4糖苷鍵,使脂多糖解離,經溶菌酶處理后的細胞移至低滲溶液中使細胞破裂。
細胞破碎方法和原理
液體剪切壓力:通過將樣品從高壓腔轉入到低壓腔時產生的快速壓力落差來破碎細胞優點:破碎快速有效,適合大體積細胞破碎缺點:可導致樣品溫度升高(操作時需要冷卻系統)超聲:通過高頻率的超聲波破碎細胞粉碎優點:操作簡單缺點:可導致樣品溫度升高,其很難通過冷卻系統降溫,剪切力有可能導致蛋白質受損,噪音較大,破碎
細胞破碎的方法有哪些
(1)酸堿處理:調節pH值,改變蛋白質的荷電性質,提高產物的溶解度。 (2)化學試劑處理:用表面活性劑或有機溶劑(甲苯)處理細胞,增大細胞壁的通透性,降低胞內產物的相互作用,使之容易釋放。 (3)酶溶:利用溶解細胞壁的酶處理菌體細胞,使細胞壁受到部分或完全破壞后,再利用滲透壓沖擊等方法破壞細胞膜,進
組織細胞的破碎方法
? 組織細胞的破碎方法很多,有機械方法、物理方法、化學方法和生物化學方法等。在破碎前,材料常需要預處理,如動物材料要除去與實驗無關甚至有妨礙的結締組織,脂肪組織和血污等,植物種子需要除殼,微生物材料需將菌體和發酵液成分分開等。 不同實驗規模、不同實驗材料和實驗要求,使用的破碎方法和條件也不同
細胞及組織的破碎方法
細胞及組織破碎的方法多種多樣,大致可以分為四類:一、機械破碎:1、研磨法。2、組織搗碎法。3、離心機分離法。4、超聲波法。5、壓榨法。6、凍融法。二、溶脹和自溶:1、溶脹:細胞膜為天然的半透膜,在低滲溶液(如低濃度的稀鹽溶液)中,由于存在滲透壓差,溶劑分子大量進入細胞,從而引起細胞膜發生脹破。2、自
組織細胞的破碎方法
組織細胞的破碎方法很多,有機械方法、物理方法、化學方法和生物化學方法等。在破碎前,材料常需要預處理,如動物材料要除去與實驗無關甚至有妨礙的結締組織,脂肪組織和血污等,植物種子需要除殼,微生物材料需將菌體和發酵液成分分開等。不同實驗規模、不同實驗材料和實驗要求,使用的破碎方法和條件也不同。一些堅韌組織
細胞破碎的方法有哪些
(1)酸堿處理:調節pH值,改變蛋白質的荷電性質,提高產物的溶解度。 (2)化學試劑處理:用表面活性劑或有機溶劑(甲苯)處理細胞,增大細胞壁的通透性,降低胞內產物的相互作用,使之容易釋放。 (3)酶溶:利用溶解細胞壁的酶處理菌體細胞,使細胞壁受到部分或完全破壞后,再利用滲透壓沖擊等方法破壞細胞膜,進
關于細胞破碎的應用介紹
細胞破碎 利用大腸桿菌、酵母等菌種進行發酵,然后經過破壁后提取細胞內酶、蛋白質等活性的產物是生物工程中的重要技術。而這些工藝中很重要的一步就是細胞破碎。 保持細胞活性 保持細胞活性的最重要參數是溫度和時間,物料在高壓均質閥內部的約0.01秒的瞬間,在高壓的作用下溫度會上升到大約10~15℃
關于細胞破碎的應用介紹
1、技術簡介 利用大腸桿菌、酵母等菌種進行發酵,然后經過破壁后提取細胞內酶、蛋白質等活性的產物是生物工程中的重要技術。而這些工藝中很重要的一步就是細胞破碎。 2、保持細胞活性 保持細胞活性的最重要參數是溫度和時間,物料在高壓均質閥內部的約0.01秒的瞬間,在高壓的作用下溫度會上升到大約10
細胞破碎的主要方法有哪些
1、高速組織搗碎 :將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種 子等。2、玻璃勻漿器勻漿 :先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為
細胞破碎的主要方法有哪些
1、高速組織搗碎將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種子等。2、玻璃勻漿器勻漿先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于量少
細胞破碎是什么?有哪些方法?
細胞破碎是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術,是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。結合重組DNA技術和組織培養技術上的重大進展,以前認為很難獲得的蛋白質現在可以大規模生產。 但是由于細菌、酵母、真菌、植物細胞壁的組成成分不同,且同類細胞結成的
關于細胞破碎的機械法介紹
1、高壓勻漿破碎法(homogenization) 高壓勻漿器是常用的設備,它由可產生高壓的正向排代泵(positive displacenemt pump)和排出閥(discharge valve)組成,排出閥具有狹窄的小孔,其大小可以調節。細胞漿液通過止逆閥進入泵體內,在高壓下迫使其在排出
高壓細胞破碎機相關介紹
基本介紹 高壓細胞破碎機利用高壓原理對細胞進行擠壓破碎,使樣品均勻并完全的碎裂,特別適用于厚壁細胞、細菌和較濃樣品的破碎,具有無噪音、溫升少、無金屬離子污染等特點。用于蛋白質研究、核酸提取及細胞破碎領域,廣泛應用于大專院校。科研單位的生物實驗室及藥廠。 技術參數 壓力裝置: 液壓系統 樣
實驗室組織細胞破碎方法
實驗室對組織細胞的破碎方法很多,有機械方法、物理方法、化學方法和生物化學方法等。在破碎前,材料常需要預處理,如動物材料要除去與實驗無關甚至有妨礙的結締組織,脂肪組織和血污等,植物種子需要除殼,微生物材料需將菌體和發酵液成分分開等。不同實驗規模、不同實驗材料和實驗要求,使用的破碎方法和條件也不同。一些
實驗室組織細胞破碎方法
實驗室對組織細胞的破碎方法很多,有機械方法、物理方法、化學方法和生物化學方法等。在破碎前,材料常需要預處理,如動物材料要除去與實驗無關甚至有妨礙的結締組織,脂肪組織和血污等,植物種子需要除殼,微生物材料需將菌體和發酵液成分分開等。不同實驗規模、不同實驗材料和實驗要求,使用的破碎方法和條件也不同。一些
實驗室常用哪些細胞破碎方法
一般用物理或者化學方法來使得細胞裂解物理法:(1)反復凍融:將細胞反復放置于-20℃冷凍以及25-30℃環境下,反復冷凍溶解10次-20次。適用于例如血細胞等大部分哺乳動物細胞。(2)煮沸法:與凍融法相反,將細胞放置于100℃沸水煮沸5-10分鐘,適用于大部分微生物細胞。(3)超聲法:將細胞放置于超
細胞的破碎
1、高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種子等。2、玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于
細胞的破碎
1、高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種子等。2、玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于
細胞破碎儀
細胞破碎儀?儀器主要使用范圍:生物學、微生物學、動物學、農學、制藥等領域。教學、科研、生產、生物化學、藥物化學、表面化學。隨著重組DNA技術得到廣泛應用以來,很多基因工程產物都是胞內物質,必須將細胞破壁,使產物得以釋放,才能進一步提取,因此細胞破碎是提取胞內產物的關鍵步驟,破碎方法的得當與否,直接影
細胞破碎技術
細胞破碎技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術,是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。?結合重組DNA技術和組織培養技術上的重大進展,以前認為很難獲得的蛋白質現在可以大規模生產。細胞破碎阻力 細菌? 幾乎所有細菌的細胞壁都是由肽聚糖(pep
細胞破碎儀的機械破碎技術
細胞破碎儀的破碎技術是怎樣的?在生物產物的分離提取中,如果目標物質為胞外產物(如霉菌產生的糖化酶等),其提取過程較簡單,只需直接進行固液分離,獲得澄清的濾液,再進行分離純化操作;如果目標物質為胞內產物或多細胞生物組織中的各種生物分子(如堿性磷酸酶等胞內酶、部分外源基因表達產業或植物細胞產物等),都需