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  • 激光掃描共聚焦熒光顯微鏡的樣品要求

    1,樣品經熒光探針標記; 2,固定的或活的組織; 3,固定的或活的貼壁培養細胞應培養在Confocal專用小培養皿或蓋玻片上; 4,懸浮細胞,甩片或滴片后,用蓋玻片封片; 5,載玻片厚度應在0.8~1.2mm之間,蓋玻片應光潔,厚度在0.17mm左右 6,標本不能太厚,如太厚激發光大部分消耗在標本下部,而物鏡直接觀察到的上部不能充分激發; 7,盡量去除非特異性熒光信號; 8,封片劑多用甘油:PBS混合液(9:1)......閱讀全文

    激光掃描共聚焦熒光顯微鏡的樣品要求

      1,樣品經熒光探針標記;  2,固定的或活的組織;  3,固定的或活的貼壁培養細胞應培養在Confocal專用小培養皿或蓋玻片上;  4,懸浮細胞,甩片或滴片后,用蓋玻片封片;  5,載玻片厚度應在0.8~1.2mm之間,蓋玻片應光潔,厚度在0.17mm左右  6,標本不能太厚,如太厚激發光大部

    共激光掃描共聚焦顯微鏡

    共激光掃描共聚焦顯微鏡(Laser scanning confocal microscope,LSCM)是一種先進的分子生物學和細胞生物學研究儀器。它在熒光顯微鏡成像的基礎上加裝激光掃描裝置,結合數據化圖像處理技術,采集組織和細胞內熒光標記圖像,在亞細胞水平觀察鈣等離子水平的變化,并結合電生理等技術

    激光掃描共聚焦熒光顯微鏡簡介

      激光掃描共聚焦熒光顯微鏡(laser scanning confocal microscopy,LSCM)是一種利用計算機、激光和圖像處理技術獲得生物樣品三維數據、目前最先進的分子細胞生物學的分析儀器。主要用于觀察活細胞結構及特定分子、離子的生物學變化,定量分析,以及實時定量測定等。

    激光掃描共聚焦熒光顯微鏡的缺點

      標記染料的光漂白:為了獲得足夠的信噪比必須提高激光的強度;而高強度的激光會使染料在連續掃描過程中迅速褪色。  光毒作用:在激光照射下,許多熒光染料分子會產生單態氧或自由基等細胞毒素。限制掃描時間、激發光強度,以保持樣品的活性。

    激光掃描共聚焦熒光顯微鏡的優點

      激光掃描共聚焦熒光顯微鏡相對普通熒光顯微鏡的優點  (1):LSCM的圖象是以電信號的形式記錄下來的,所以可以采用各種模擬的和數字的電子技術進行圖象處理:(2)LSCM利用共聚焦系統有效的排除了焦點以外的光信號干擾,提高了分辨率,顯著改善了視野的廣度和深度,使無損傷的光學切片成為可能,達到了三維

    激光掃描共聚焦熒光顯微鏡的缺點

      標記染料的光漂白:為了獲得足夠的信噪比必須提高激光的強度;而高強度的激光會使染料在連續掃描過程中迅速褪色。  光毒作用:在激光照射下,許多熒光染料分子會產生單態氧或自由基等細胞毒素。限制掃描時間、激發光強度,以保持樣品的活性。

    激光掃描共聚焦熒光顯微鏡的常用激光器

      激光掃描共聚焦顯微鏡使用的激光光源有單激光和多激光系統,常用的激光器包括以下三種類型:  半導體激光器:405nm(近紫外譜線)  氬離子激光器:457nm、477nm、488nm、514nm(藍綠光)  氦氖激光器:543nm(綠光-氦氖綠激光器)633nm (紅光—氦氖紅激光器)  UV激光

    激光掃描共聚焦熒光顯微鏡的輔助設備

      風冷、水冷冷卻系統及穩壓電源。  激光掃描共聚焦顯微鏡的基本工作原理是首先由激光器發射的一定波長的激發光,光線經放大后通過掃描器內的照明針孔光欄形成點光源,由物鏡聚焦于樣品的焦平面上,樣品上相應的被照射點受激發而發射出的熒光,通過檢測孔光欄后,到達檢測器,并成像于計算機監視屏上。這樣由焦平面上樣

    激光掃描共聚焦熒光顯微鏡的歷史發展

      ·1957年,Marvin Minsky提出了共聚焦顯微鏡技術的某些基本原理,獲得了美國的ZL。  ·1967年,Egger和Petran成功地應用共聚焦顯微鏡產生了一個光學橫斷面。  ·1977年,Sheppard和Wilson首次描述了光與被照明物體的原子之間的非線性關系和激光掃描器的拉曼光

    激光掃描共聚焦原理和樣品前期處理

      1、激光掃描共聚焦顯微鏡用途  激光掃描共聚焦顯微鏡(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代最先進的細胞生物醫學分析儀器之一。目前,激光掃描共聚焦顯微技術已用于細胞形態定位、立體結構重組、動態變化過程等研究,并提供定量熒光測定、定量圖像分析等實用研

    激光共聚焦顯微鏡的樣品要求

      1、樣品經熒光探針標記;  2、固定的或活的組織;  3、固定的或活的貼壁培養細胞應培養在Confocal專用小培養皿或蓋玻片上;  4、懸浮細胞,甩片或滴片后,用蓋玻片封片;  5、載玻片厚度應在0.8~1.2mm之間,蓋玻片應光潔,厚度在0.17mm左右  6、標本不能太厚,如太厚激發光大部

    激光掃描共聚焦熒光顯微鏡熒光顯微鏡系統簡介

      顯微鏡是LSCM的主要組件,它關系到系統的成像質量。顯微鏡光路以無限遠光學系統可方便地在其中插人光學選件而不影響成像質量和測量精度。物鏡應選取大數值孔徑平場復消色差物鏡,有利于熒光的采集和成像的清晰。物鏡組的轉換,濾色片組的選取,載物臺的移動調節,焦平面的記憶鎖定都應由計算機自動控制。  激光掃

    激光掃描共聚焦熒光顯微鏡的成像原理和基本結構

    ??? 激光掃描共聚焦熒光顯微鏡是一種利用計算機、激光和圖像處理技術獲得生物樣品三維數據、先進的分子細胞生物學的分析儀器。主要用于觀察活細胞結構及特定分子、離子的生物學變化,定量分析,以及實時定量測定等。?  成像原理?  采用點光源照射標本,在焦平面上形成一個輪廓分明的小的光點,該點被照射后發出的

    激光掃描熒光顯微鏡

    探測裝置比較典型。方法是將雜交后的芯片經處理后固定在計算機控制的二維傳動平臺上,并將一物鏡置于其上方,由氬離子激光器產生激發光經濾波后通過物鏡聚焦到芯片表面,激發熒光標記物產生熒光,光斑半徑約為5-10μm。同時通過同一物鏡收集熒光信號經另一濾波片濾波后,由冷卻的光電倍增管探測,經模數轉換板轉換為數

    聚焦激光掃描顯微鏡

    聚焦激光掃描顯微鏡(confocallaser scanning microscopy,CLSM)是生物醫學實驗室中重要的儀器設備,可以檢測細胞甚至分子水平的改變,1995年美國學者在傳統共聚焦激光掃描顯微鏡基礎上加上在體掃描裝置,實現了皮膚上的在體共聚焦成像,這是一種在皮膚原位、無創、細胞水平的成

    激光共聚焦掃描顯微境

       LCSM照片,藍色為細胞核,綠色為微管    激光共聚焦掃描顯微鏡(laser confocal scanning microscope)用激光作掃描光源,逐點、逐行、逐面快速掃描成像,掃描的激光與熒光收集共用一個物鏡,物鏡的焦點即掃描激光的聚焦點,也是瞬時成像的物點。由于激光束的波長較短,

    激光共聚焦掃描顯微境

       激光共聚焦掃描顯微鏡(laser confocal scanning microscope)用激光作掃描光源,逐點、逐行、逐面快速掃描成像,掃描的激光與熒光收集共用一個物鏡,物鏡的焦點即掃描激光的聚焦點,也是瞬時成像的物點。由于激光束的波長較短,光束很細,所以共焦激光掃描顯微鏡有較高的分辨力,

    熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡檢測細胞凋亡

      一般以細胞核染色質的形態學改變為指標來評判細胞凋亡的進展情況。  常用的DNA特異性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258),DAPI。三種染料與  DNA的結合是非嵌入式的,主要結合在DNA的A-T堿基區。紫外光激發時發射明亮的

    激光掃描共聚焦顯微鏡的掃描模塊

      掃描模塊主要由針孔光欄(控制光學切片的厚度)、分光鏡(按波長改變光線傳播方向)、發射熒光分色器(選擇一定波長范圍的光進行檢測)、檢測器(光電倍增管)組成。熒光樣品中的混合熒光進入掃描器,經過檢測針孔光欄、分光鏡和分色器選擇后,被分成各單色熒光,分別在不同的熒光通道進行檢測并形成相應的共焦圖象,同

    激光器應用——激光掃描共聚焦顯微

    iFLEX激光器應用——激光掃描共聚焦顯微1,什么是激光掃描共聚焦顯微共聚焦顯微技術是近十幾年迅速發展起來的一項高新研究技術,目前應用領域擴展到細胞學、微生物學、發育生物學、遺傳學、神經生物學、生理和病理學等學科的研究工作中,成為現代生物學微觀研究的重要工具。激光掃描共聚焦顯微鏡的主要是利用激光掃描

    掃描電鏡對樣品的要求

    掃描電鏡生物樣品制備技術大多數生物樣品都含有水分,而且比較柔軟,因此,在進行掃描電鏡觀察前,要對樣品作相應的處理。掃描電鏡樣品制備的主要要求是:盡可能

    激光掃描共聚焦顯微鏡

    激光掃描共聚焦顯微鏡(Laser scanning ConfocalMicroscopy,簡稱LSCM),在熒光顯微鏡成象的基礎上加裝激光掃描裝置,使用紫外光或可見光激發熒光,利用計算機進行圖象處理,從而得到細胞或組織內部微細結構的熒光圖象,捕捉到微弱的信號或追蹤高效的進程以及在亞細胞水平上觀察諸如

    激光共聚焦掃描顯微技術原理

    激光共聚焦掃描顯微技術(Confocal laser scanning microscopy)是一種高分辨率的顯微成像技術。普通的熒光光學顯微鏡在對較厚的標本進行觀察時,來自觀察點鄰近區域的熒光會對結構的分辨率形成較大的干擾。共聚焦顯微技術的關鍵點在于,每次只對空間上的一個點(焦點)進行成像,再通過

    激光共聚焦掃描顯微鏡

    對比激光共聚焦掃描顯微鏡與傳統光學顯微鏡在高放大倍率下的成像效果。結果顯示,激光共聚焦掃描顯微鏡在高放大倍率下,其成像景深大的優點對于獲取高質量的圖像有很大的幫助。同時通過激光共聚焦掃描顯微鏡的激光光源實現單色光成像,可以清晰觀察到濺鍍了消影層的ITO玻璃。

    關于共聚焦激光掃描顯微的簡介

      共聚焦激光掃描顯微(英語:Confocal laser scanning microscopy,CLSM,LCSM)是一項高分辨率三維光學成像技術。 [1]主要特點在于其光學分層能力,即獲得特定深度下焦點內的圖像。圖像通過逐點采集,以及之后的計算機重構而成。因此它可以重建拓撲結構復雜的物體。對于

    激光掃描共焦顯微鏡技術

    l 樣品要求:1.經熒光探劑標記(單標、雙標、三標)2.固定的或活的組織3.固定的或活的貼壁培養細胞(Confocal專用小培養皿,蓋玻片)4.懸浮細胞,甩片或滴片后,用蓋玻片封一. 組成倒置或直立熒光顯微鏡、掃描頭(照明針孔、探測針孔、熒光濾片系統、鏡掃描系統和光電倍增管)、掃描頭控制電路、計算機

    激光共聚焦顯微鏡的顯微鏡系統

    顯微鏡系統  熒光顯微鏡是激光掃描共聚焦顯微鏡的一個重要組成部分。它配備兩個光源:鹵素燈光源和汞燈光源,主要是用于預覽樣品,其中鹵素燈光源用于尋找樣品焦平面、觀察樣品位置、形態和分布;汞燈用于觀察和分辨樣品中產生熒光物質的成分和位置。對于光敏(例如淬滅)的樣品最好用鹵素燈進行預覽,以減少對樣品的刺激

    激光掃描共聚焦顯微鏡的激光共聚焦顯微鏡結構

    激光共聚焦掃描顯微鏡(Confocal laser scanning microscope,CLSM)用激光作掃描光源,逐點、逐行、逐面快速掃描成像,掃描的激光與熒光收集共用一個物鏡,物鏡的焦點即掃描激光的聚焦點,也是瞬時成像的物點。系統經一次調焦,掃描限制在樣品的一個平面內。調焦深度不一樣時,就可

    激光掃描共聚焦顯微鏡的問題

    激光掃描共聚焦顯微鏡中各種樣品串色的問題及其校正在圖 5 中顯示。圖 5( a)中的纖維原細胞, Alexa Fluor488 綠色熒光串色進入 Mito Tracker 紅色通道,當樣品用 488 激光和 543 激光同時掃描時,會產生黃色的肌動蛋白絲。序列掃描和檢測(圖 5d)消除了串色影響。同

    共聚焦激光掃描顯微鏡的應用

    膜電位?以往測定膜電位多用微電極直接插入法測量,不僅操作麻煩,而且對細胞也是一種損傷。共聚焦激光掃描顯微鏡則可利用熒光探針在細胞膜內外分布的差異測出膜電位,不但可以觀察細胞膜電位的變化結果,更重要的是可以用于連續監測膜電位的迅速變化。膜電位熒光探針根據其對膜電位變化反應速度的快慢分為快、慢兩類探針,

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