中性粒細胞堿性磷酸酶快速染色法的研究
中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)是一種胞內水解酶。測定其活性對于某些病的診斷、鑒別診斷和療效觀察有重要價值。目前國內推薦的改良Gomori鈣鈷法(簡稱改良法),其孵育時間長達4 h,試劑配制繁瑣,我們將生物化學中有關磷酸基受體緩沖液的原理應用于NAP染色,即在改良法的基礎上,以2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP)為緩沖體系,建立一種簡便快速染色法(簡稱快速法),孵育時間只需15 min,報道如下。 一、材料與方法 1.主要試劑:(1)固定液:10%甲醛甲醇溶液。(2)基質液:200 g/L β-甘油磷酸鈉溶液。(3)緩沖液(pH 9.6):1.0 mol/L AMP溶液,內含鈣離子0.03 mol/L和鎂離子0.005 mol/L(用2 mol/L鹽酸調 pH)。(4)基質緩沖液(pH 9.6):取上述基質液0.5 ml加入9.5 ml緩沖液中即可(臨用......閱讀全文
中性粒細胞堿性磷酸酶快速染色法的研究
? 中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)是一種胞內水解酶。測定其活性對于某些血液病的診斷、鑒別診斷和療效觀察有重要價值。目前國內推薦的改良Gomori鈣鈷法(簡稱改良法),其孵育時間長達4 h,試劑配制繁瑣,我們將生物化學中有關磷酸基受體緩沖液的原理應用于NAP染色,即在改良法的基礎上,以2-氨基-2-甲
中性粒細胞堿性磷酸酶快速染色法的研究
?中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)是一種胞內水解酶。測定其活性對于某些病的診斷、鑒別診斷和療效觀察有重要價值。目前國內推薦的改良Gomori鈣鈷法(簡稱改良法),其孵育時間長達4 h,試劑配制繁瑣,我們將生物化學中有關磷酸基受體緩沖液的原理應用于NAP染色,即在改良法的基礎上,以2-氨基-2-
中性粒細胞堿性磷酸酶快速染色法的研究
? 中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)是一種胞內水解酶。測定其活性對于某些血液病的診斷、鑒別診斷和療效觀察有重要價值。目前國內推薦的改良Gomori鈣鈷法(簡稱改良法),其孵育時間長達4 h,試劑配制繁瑣,我們將生物化學中有關磷酸基受體緩沖液的原理應用于NAP染色,即在改良法的基礎上,以2-氨基-2-甲
中性粒細胞堿性磷酸酶快速染色法的研究(2)
三、討論 堿性磷酸酶(ALP)催化β-甘油磷酸鈉生成甘油和無機磷酸根,AMP作為磷酸基受體,能不斷結合磷酸根,加快正向反應速度。磷酸基受體在酶上有結合位點,且遵循Michatelis-Menten動力學,在ALP的催化機理中,轉磷酸反應比磷酸水解反應擁有更高的Vmax,因此ALP更易將磷酸根轉
血細胞化學染色的染色法—中性粒細胞堿性磷酸酶染色(NAP)的介紹
(1)血細胞化學染色的染色法—中性粒細胞堿性磷酸酶染色(NAP)的原理:中性粒細胞堿性磷酸酶在pH 9.6左右環境中,能水解磷酸萘酚鈉底物釋放出萘酚,后者與重氮染料偶聯,可形成不溶性的有色沉淀(紅色顆粒),定位于細胞酶活性所在處。 (2)血細胞化學染色的染色法—中性粒細胞堿性磷酸酶染色(NAP
中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)染色
(1)參考值:成人N AP陽性率為10%~40%;積分值為40~80(分)。(2)臨床意義1)感染性疾病:急性化膿菌感染時NAP活性明顯增高,病毒性感染時其活性在正常范圍或略減低。2)慢性粒細胞白血病時NAP活性明顯減低,積分值常為0。類白血病反應時N AP活性極度增高,故可作為與慢性粒細胞白血病鑒
中性粒細胞堿性磷酸酶染色(NAP)
實驗原理偶氮偶聯法(Kaplow法):中性粒細胞胞漿中的堿性磷酸酶在pH 9.2-9.8緩沖液中,能水解磷酸萘酚鈉,并釋放出磷酸與萘酚。再以重氮鹽與萘酚偶聯成不溶性有色偶氮染料沉淀于胞漿中。實驗方法材料:1. 10%甲醛甲醇固定液甲醛 10 ml甲醇 90 ml20C ~80C避光保存。2. 丙二醇
中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)染色
一、原理:細胞內堿性磷酸酶能分解磷酸萘酚AS-BI為磷酸和芳基萘酰胺,后者與重氮鹽(固蘭BB)偶聯,形成不溶性的蘭色沉淀物。二、結果判定:正常血細胞的染色反應堿性磷酸酶主要存在于中性粒細胞,除巨噬細胞可呈陽性反應外,其他血細胞均呈陰性反應。結果應根據成熟中性粒細胞胞漿內蘭色顆粒所占胞漿面積,顆粒大小
中性粒細胞堿性磷酸酶的基本介紹
中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)是其胞質特殊顆粒釋放的一種在堿性條件(pH9.3~9.6)能催化各種醇和酚的單磷酸酯水解的非特異性水解酶。NAP主要存在于成熟階段的中性粒細胞,其他成分如嗜酸、嗜堿、淋巴、單核以及巨核細胞,血小板,漿細胞等均為陰性反應。NAP活力可反映成熟粒細胞的成熟程度和功能,隨
中性粒細胞堿性磷酸酶染色(偶氮偶聯法)
1.?實驗原理在PH9.2-9.8的緩沖溶液中,細胞中的堿性磷酸酶能將底物磷酸苯酚鈉水解,生成 α-苯酚和磷酸鈉,再以穩定的重氮鹽與酚偶聯成不溶性有色偶氮染料沉淀于胞漿中。2.?標本采集2.1?病人準備:了解病人是否對局麻藥有過敏史,凝血因子嚴重缺陷引起的出血性疾病,穿刺部位有炎癥或有畸形,晚期妊娠
中性粒細胞堿性磷酸酶染色臨床意義
中性粒細胞堿性磷酸酶活性增高可見于細菌性感染、類白血病反應、再生障礙性貧血、急慢性淋巴細胞白血病、多發性骨髓瘤等;活性下降見于慢性粒細胞白細胞、陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥、骨髓增生異常綜合征等。可用于慢性粒細胞白血病和類白血病反應的鑒別、細菌性感染與病毒性感染的鑒別、再生障礙性貧血與陣發性睡眠性血
簡述中性粒細胞堿性磷酸酶的臨床表現
增高:細菌性感染、急淋、中性粒細胞白血病、免疫性疾病等。 降低:慢粒白血病、病毒感染、急性白血病等。 NAP可用于細菌和病毒感染的鑒別:急性化膿性感染時NAP活性明顯升高,病毒性感染時其活性在正常范圍或略低。 NAP可用于慢性粒細胞白血病與類白血病反應的鑒別:慢性粒細胞白血病的NAP活性明
中性粒細胞堿性磷酸酶染色標準操作規程
1. 實驗原理在PH9.2-9.8的緩沖溶液中,細胞中的堿性磷酸酶能將底物磷酸苯酚鈉水解,生成 α-苯酚和磷酸鈉,再以穩定的重氮鹽與酚偶聯成不溶性有色偶氮染料沉淀于胞漿中。2. 標本采集2.1 病人準備:了解病人是否對局麻藥有過敏史,凝血因子嚴重缺陷引起的出血性疾病,穿刺部位有炎癥或有畸形,晚期妊娠
中性粒細胞堿性磷酸酶積分及臨床意義
人體有多種細胞內含有一種叫做堿性磷酸酶的物質。血細胞內也含有這種物質,但多數不表現出活性,即處于“沉睡”狀態,只有中性粒細胞的成熟階段表現出堿性磷酸酶活性,我們稱之為中性粒細胞堿性磷酸酶(簡稱N—ALP)。中性粒細胞堿性磷酸酶存在于成熟中性粒細胞的胞漿內,可以通過鈣—鈷方法使之著色來顯示。然后計算
中性粒細胞的臨床意義:中性粒細胞減低
中性粒細胞的臨床意義:中性粒細胞減低是檢驗主管技師考試的內容,醫學教育網搜集整理相關內容供大家參考。 當中性粒細胞絕對值低于1.5×109/L,稱為粒細胞減低癥,低于0.5×109/L時,稱為粒細胞缺乏癥。 1)某些感染:如傷寒、副傷寒、流感等。如無并發癥,WBC減低(
中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)染色及臨床意義
病情分析:白血病不能單純憑白細胞脂酶診斷的主要是要做骨髓穿刺檢查。白細胞脂酶是鑒別白血病的類型。指導意見:建議你要做血液細胞形態檢查要做骨髓穿刺檢查。
中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)染色及臨床意義
人體有多種細胞內含有一種叫做堿性磷酸酶的物質。血細胞內也含有這種物質,但多數不表現出活性,即處于“沉睡”狀態,只有中性粒細胞的成熟階段表現出堿性磷酸酶活性,我們稱之為中性粒細胞堿性磷酸酶(簡稱N—ALP)。中性粒細胞堿性磷酸酶存在于成熟中性粒細胞的胞漿內,可以通過鈣—鈷方法使之著色來顯示。然后計算出
中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)染色及臨床意義
人體有多種細胞內含有一種叫做堿性磷酸酶的物質。血細胞內也含有這種物質,但多數不表現出活性,即處于“沉睡”狀態,只有中性粒細胞的成熟階段表現出堿性磷酸酶活性,我們稱之為中性粒細胞堿性磷酸酶(簡稱N—ALP)。中性粒細胞堿性磷酸酶存在于成熟中性粒細胞的胞漿內,可以通過鈣—鈷方法使之著色來顯示。然后計算
中性粒細胞堿性磷酸酶染色臨床意義是什么
中性粒細胞堿性磷酸酶活性增高可見于細菌性感染、類白血病反應、再生障礙性貧血、急慢性淋巴細胞白血病、多發性骨髓瘤等;活性下降見于慢性粒細胞白細胞、陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥、骨髓增生異常綜合征等。可用于慢性粒細胞白血病和類白血病反應的鑒別、細菌性感染與病毒性感染的鑒別、再生障礙性貧血與陣發性睡眠性血
中性粒細胞堿性磷酸酶積分(NAP)試驗及其臨床意義
? 中性粒細胞堿性磷酸酶積分{NAP}采用偶氮偶聯法,即成熟中性堿性磷酸酶在PH9.6左右的堿性環境中,能水解基質液中的磷酸萘酚鈉底物,釋放出萘酚,后者與重氮鹽偶聯,生成不溶性的有色沉淀,定位于細胞質酶活性所在之處。不同的底物與重氮鹽的組合不同。NAP主要存在于成熟粒細胞,故中性成熟粒細胞呈陽性,其
中性粒細胞堿性磷酸酶積分(NAP)試驗及其臨床意義
中性粒細胞堿性磷酸酶積分{NAP}采用偶氮偶聯法,即成熟中性堿性磷酸酶在PH9.6左右的堿性環境中,能水解基質液中的磷酸萘酚鈉底物,釋放出萘酚,后者與重氮鹽偶聯,生成不溶性的有色沉淀,定位于細胞質酶活性所在之處。不同的底物與重氮鹽的組合不同。NAP主要存在于成熟粒細胞,故中性成熟粒細胞呈陽性,其他
一套中性粒細胞堿性磷酸酶染色的詳細流程
今天,我們繼續接著講化學染色方法之中性粒細胞堿性磷酸酶染色(偶氮偶聯法),昨天的你學到了嗎?(請耐心花2分鐘閱讀完本文,建議推薦給小伙伴一起學)一、實驗原理二、試劑(1)固定劑:10%甲醛甲醇溶液(2)Tris-Hcl緩沖液的配制:Tris粉〔三胺基甲烷〕4.85克溶于200ml蒸餾水中,加濃HCL
中性粒細胞的檢驗
中性粒細胞白細胞分為中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞。前三種因其胞質內含有嗜色顆粒,所以稱為粒細胞。白細胞是人體與疾病斗爭的“衛士”。當病菌侵入人體體內時,白細胞能通過變形而穿過毛細血管壁,集中到病菌入侵部位,將病菌包圍、吞噬。如果體內的白細胞的數量高于正常值,很可能是身體
中性粒細胞的毒性
殺菌活力降低,說明機體對感染抵抗力降低,易遭受細菌的感染。多見于先天性慢性肉芽腫病及中性粒細胞功能異常癥、糖尿病、多發性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、慢性粒細胞性白血病、髓性及淋巴性增殖病、骨髓炎、某些病毒感染、類風濕性關節炎、紅斑性狼瘡、長期應用類固醇、秋水仙堿及長春新堿、酒精中毒及吸煙者。
中性粒細胞的結構
當粘附在表面上時,中性粒細胞在外周血涂片中的平均直徑為12-15微米(μm)。在懸浮液中,人類中性粒細胞的平均直徑為8.85μm。與嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞一起,它們形成多形核細胞類別,以細胞核的多葉形狀命名(與淋巴細胞和單核細胞相比,其他類型的白細胞)。細胞核具有特征性的裂片外觀,分離的裂片由染
中性粒細胞的概述
中性粒細胞(外文名:neutrophil)是在瑞氏染色血涂片中,胞質呈無色或極淺的淡紅色,有許多彌散分布的細小的淺紅或淺紫色的特有顆粒。 中性粒細胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。中性粒細胞來源于骨髓[1],具有分葉形或桿狀的核,胞漿內含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細顆粒。
中性粒細胞的功能
趨化性中性粒細胞通過變形蟲運動經歷稱為趨化性的過程,這使它們能夠遷移到感染或炎癥部位。細胞表面受體允許中性粒細胞檢測分子的化學梯度,例如白細胞介素8(IL-8)、干擾素γ(IFN-γ)、C3a、C5a和白三烯B4,這些細胞使用這些分子來指導它們的遷移路徑。中性粒細胞具有多種特異性受體,包括補體受體、
中性粒細胞的物質含量
中性粒細胞占白細胞的60~70%,是外周血循環和免疫系統中含量最豐富的白細胞。各類白細胞百分比為:中性粒細胞60~70%,嗜酸性粒細胞0.5~5%,嗜堿性粒細胞0~1%,淋巴細胞20~40%,單核細胞3~8%。健康成人白細胞總數為4000~10,000/立方毫米。外周血涂片檢查中,中性粒細胞平均量為
中性粒細胞功能的介紹
中性粒細胞參與非特異性細胞免疫反應,具有抗感染、參與血液凝固和變態反應等功能,在感染性疾病、超敏反應中發揮重要作用。 中性粒細胞在非特異性細胞免疫中起重要作用,通過趨化、運動、吞噬、殺菌等活動抵御微生物病原體尤其是化膿性細菌入侵。中性粒細胞能釋放花生四烯酸,在酶的作用下可被轉化為血栓素和前列腺
什么是中性粒細胞?
中性粒細胞是最豐富的粒細胞類型,占人類所有白細胞的40%至70%。它們是先天免疫系統的重要組成部分,其功能在不同動物中有所不同。它們由骨髓中的干細胞形成,并分化為中性粒細胞殺手和中性粒細胞籠子的亞群。它們壽命短且移動性強,因為它們可以進入其他細胞/分子無法進入的組織部分。中性粒細胞可細分為分段中性粒