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  • 沉淀反應實驗原理、材料和實驗方法(1)

    可溶性抗原(如血清中的蛋白,組織浸出液,細胞裂解液等)與其相應的抗體在溶液中或凝膠中結合,若比例合適,可形成肉眼可見的抗原-抗體復合物,這就是免疫沉淀反應。免疫沉淀反應可以在小玻璃管中或毛細玻璃管及凝膠平板中進行。在用凝膠平板做實驗時,常用瓊脂糖凝膠做介質,有的加電流,使反應更快更靈敏。 一、環狀沉淀 【 實驗原理 】 在環狀沉淀試管中,當可溶性抗原與相應特異性抗體結合后,于兩者交界面處可形成白色沉淀環。此法系 Ascoli于1902年建立,用于檢查獸類內臟、皮毛浸液等標本中炭疽桿菌抗原,由于其較高的靈敏性和特異性,目前仍用于法醫學血跡鑒定、流行病學媒介昆蟲的吸血習性鑒定等。 【 實驗材料 】 待測血跡干燥紙片 抗人血清抗體、抗羊血清抗體和抗雞血清抗體 生理鹽水 環狀沉淀管及管架、吸管等。 【 實驗方法 】 1、取環狀沉淀管3支,分別加入抗人、抗羊和抗雞......閱讀全文

    沉淀反應實驗原理、材料和實驗方法(1)

    可溶性抗原(如血清中的蛋白,組織浸出液,細胞裂解液等)與其相應的抗體在溶液中或凝膠中結合,若比例合適,可形成肉眼可見的抗原-抗體復合物,這就是免疫沉淀反應。免疫沉淀反應可以在小玻璃管中或毛細玻璃管及凝膠平板中進行。在用凝膠平板做實驗時,常用瓊脂糖凝膠做介質,有的加電流,使反應更快更靈

    沉淀反應實驗原理、材料和實驗方法(1)

    可溶性抗原(如血清中的蛋白,組織浸出液,細胞裂解液等)與其相應的抗體在溶液中或凝膠中結合,若比例合適,可形成肉眼可見的抗原-抗體復合物,這就是免疫沉淀反應。免疫沉淀反應可以在小玻璃管中或毛細玻璃管及凝膠平板中進行。在用凝膠平板做實驗時,常用瓊脂糖凝膠做介質,有的加電流,使反應更快更靈敏。一、環狀沉淀

    沉淀反應實驗原理、材料和實驗方法(2)

    三 雙向擴散 【 實驗原理 】 雙向免疫擴散是指抗原和抗體在同一凝膠內部擴散,彼此相遇后形成特 異性的沉淀線。該反應是將抗原和抗體加入同一凝膠中兩個相隔一定間距的小孔內,使兩者進行相互擴散。當抗原和抗體濃度之比相適宜時,彼此相遇形成一白色弧型沉淀線。 【 實驗材料

    沉淀反應實驗原理、材料和實驗方法(2)

    三 雙向擴散 【 實驗原理 】 雙向免疫擴散是指抗原和抗體在同一凝膠內部擴散,彼此相遇后形成特 異性的沉淀線。該反應是將抗原和抗體加入同一凝膠中兩個相隔一定間距的小孔內,使兩者進行相互擴散。當抗原和抗體濃度之比相適宜時,彼此相遇形成一白色弧型沉淀線。 【 實驗材料

    沉淀反應實驗原理、材料和實驗方法(3)

    五 對流免疫電泳 【 實驗原理 】 當抗原和抗體在瓊脂介質中電泳時 ,抗體的 PI 比較高,在適當的 pH 值下,抗體帶正電荷而抗原帶負電荷,故在電場中抗體向陰極方向移動而抗原向陽極運動,直至相遇后形成沉淀線,其原理與雙向免疫擴散相同,但具有方法簡便,快速及一次電泳可以檢測多個樣品等特

    免疫沉淀(Immunoprecipitation)實驗材料和方法

    免疫沉淀是利用特異性抗體識別并分離抗原的方法。材料:上樣buffer的配方(用前現配):2ul 1.25M Tris-HCL , pH 6.835ul distilled water2.5ul 2-mercaptoethanol12.5ul 10%SDS10ul 80% glycerol2ul br

    沉淀反應實驗:環狀沉淀反應

    可溶性抗原與相應的抗體混合,在電解質存在的條件下,兩者比例適合,即可有沉淀物出現,叫沉淀反應(Precipitation)。由于沉淀反應抗原多系膠體溶液。沉淀物主要是由抗體蛋白所組成。為了求得抗原與抗體的適宜比例,保證有足夠的抗體,而且抗原分子小,具有較大的反應面積,因此操作上通常是稀釋抗原,不稀釋

    環狀沉淀反應實驗

    最簡單、古老的一種沉淀試驗。即在小口徑試管內加入已知抗血清,沿管壁加入待檢抗原于血清表面,若抗體與相應抗原發生反應,兩層液面交界處出現白色環狀沉淀,是為陽性,主要用于抗原的定性實驗。實驗方法原理當抗原與相應抗體形成一個接觸面時,如二者比例適當,接觸面上可形成一個乳白色的環狀物即為陽性沉淀反應。實驗材

    環狀沉淀反應實驗

    環狀沉淀反應廣泛應用于法醫學的血跡鑒別和食物摻假的測定。通常這些可疑材料作為抗原,用標準抗血清加以鑒定。它具有用材少的優點,例如衣服等物品上的血跡用生理鹽水洗下就可作為抗原進行檢查。實驗方法原理可溶性抗原例如細菌的提取物,血清、病毒溶液等與相應抗體反應,在有電解質的情況下,會產生細微的沉淀稱為沉淀反

    環狀沉淀反應實驗

    實驗方法原理 當抗原與相應抗體形成一個接觸面時,如二者比例適當,接觸面上可形成一個乳白色的環狀物即為陽性沉淀反應。實驗材料 免疫血清試劑、試劑盒 抗原生理鹽水儀器、耗材 小沉淀管毛細吸管橡皮頭實驗步驟 1. ?取小沉淀管2只,以毛細吸管吸取抗人血清約0.2毫升,加入第一管,加時注意不能有氣泡。2.

    凝集吸收實驗原理、材料和方法

    一、原理腸道桿菌中的許多細菌都有部分相同的抗原結構。因之一種細菌可與另一種細菌相應的抗血清發生交叉凝集反應。用一種過量的細菌抗原與發生交叉凝集反應的抗血清相結合。可將其共同抗體吸去,剩下抗體只能與特異性抗原起反應,這種實驗即稱凝集吸收實驗。利用凝集吸收實驗可制備單價因子血清,以進行細菌抗原結構的分析

    凝集反應實驗原理和方法(直接凝集反應和間接凝集...(1)

    凝集反應是指細菌、紅細胞等顆粒性抗原或表面覆蓋抗原的顆粒狀物質與相應抗體特異結合,在適量電解質存在的條件下,形成肉眼可見的凝集現象。一、直接凝集反應 顆粒性抗原(如細菌、紅細胞等)直接與相應特異性抗體結合,在適量電解質存在條件下,出現肉眼可見的凝集現象,稱直接凝集反應。參加凝集反應的抗原稱為凝集

    凝集反應實驗原理和方法(直接凝集反應和間接凝集...(1)

    凝集反應是指細菌、紅細胞等顆粒性抗原或表面覆蓋抗原的顆粒狀物質與相應抗體特異結合,在適量電解質存在的條件下,形成肉眼可見的凝集現象。 一、直接凝集反應 顆粒性抗原(如細菌、紅細胞等)直接與相應特異性抗體結合,在適量電解質存在條件下,出現肉眼可見的凝集現象,稱直接凝集反應。

    沉淀反應實驗:火箭電泳(rocket-electrophoresis)實驗

    火箭電泳實際是一種定量免疫電泳。其原理為:在電場作用下,抗原在含定量抗體的瓊脂介質中泳動,二者比例在合適時在較短時間內形成狀似火箭或錐形的沉淀線,而此沉淀線的高度常與抗原量成正比關系,因此本法可以測定樣品中抗原的含量。1、材料(1)診斷血清(抗體):抗人IgG或IgA免疫血清(2)待檢血清(抗原):

    沉淀反應實驗:瓊脂擴散(agar-diffusion)實驗

    瓊脂擴散實驗瓊脂擴散是抗原抗體在凝膠中所呈現的一種沉淀反應。抗體在含有電解質的瓊脂凝膠中相遇時,便出現可見的白色沉淀線。這種沉淀線是一組抗原抗體的特異性復合物。如果凝膠中有多種不同抗原抗體存在時,便依各自擴散速度的差異,在適當部位形成獨立的沉淀線,因此廣泛地用于抗原成分的分析。瓊脂擴散實驗可根據抗原

    Southern印跡雜交實驗原理和方法1

    實驗原理核酸分子雜交技術是分子生物學領域中最常用的具體方法之一。其基本原理是:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下,可按堿基互補的原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。由于核酸分子的高度特異性及檢測方法的靈敏性,綜合凝膠電泳和核酸內切限制酶分析的結果,便可繪制出DNA分子的限制圖譜。但為了進一

    沉淀反應實驗:免疫電泳(immune-electrophoresis)實驗

    免疫電泳實驗免疫電泳實驗是先將抗原物質在瓊脂凝膠中做電泳分離,然后于凝膠槽中加入抗體血清。使抗原抗體進行雙向擴散,在比例適宜部位形成特異的抗原抗體沉淀弧線。每條沉淀弧線代表一組抗原抗體復合物,故可用抗原成分分析;且可以根據其遷移率與抗體所出現的特異反應進行鑒定。1、材料(1)待檢標本(抗原):正常人

    聚合酶鏈反應[PCR]實驗原理和操作步驟(1)

    【實驗原理】聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction)即PCR技術是美國Cetus公司人類遺傳研究所的科學家K.B.Mullis于1983年發明的一種體外擴增特定基因或DNA序列的方法。PCR具有很高的特異性、靈敏度,在分子生物學、基因工程研究、某些疾病的診斷以及臨床標

    噬菌體轉導實驗原理、材料和實驗步驟(一)

    一、實驗目的 以局限性轉導為例來說明轉導的基本原理,進一步驗證 DNA是遺傳物質,并初步掌握轉導實驗的基本方法。 二、實驗原理與意義 轉導是以噬菌體為媒介將一個細胞的遺傳物質轉移給另一個細胞的過程。隨著分子遺傳學的發展,轉導已成為基因精細結構分析的常用方法。 轉導實驗中常用的是λ噬菌

    噬菌體轉導實驗原理、材料和實驗步驟(二)

    四、實驗步驟 1、噬菌體的誘導和裂解液的制備 ( 1 ) 供菌體的活化與培養:取一環供體菌,接種于盛有 5 ml 肉湯液體培養基的三角瓶中, 37 ℃培養 16 h 后,吸 0.5 ml 菌液,接種于盛有 4.5 ml 肉湯液體培養基的三角瓶中,繼續培養 4-6 h 。 (

    免疫沉淀實驗原理、儀器試劑和操作步驟

    (一)原理免疫沉淀是利用抗原抗體特異性反應純化富集目的蛋白的一種方法。抗體與細胞裂解液或表達上清中相應的蛋白結合后,再與蛋白 A/G(Protein A/G)或二抗偶聯的agaose或Sepharose珠子孵育,通過離心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗體-目的蛋白復合物,沉淀經洗滌后,重懸于電泳上

    基因的PCR擴增實驗原理、實驗材料和操作步驟

    實驗原理單鏈DNA在互補寡聚核苷酸片段的引導下,可以利用DNA聚合酶按5’→3’方向復制出互補DNA。這時單鏈DNA稱為模板DNA,寡聚核苷酸片段稱為引物(Primer),合成的互補DNA稱為產物DNA。雙鏈DNA分子經高溫變性后成為兩條單鏈DNA,它們都可作為單鏈模板DNA,在相應的引物引導下,用

    沉淀反應實驗:對流免疫電泳

    對流免疫電泳是在瓊脂擴散基礎上結合電泳技術而建立的一種簡便而快速的方法。此方法能在短時間內出現結果,故可用于快速診斷,敏感性比雙向擴散技術高10-15倍。血清蛋白在PH8.6條件下帶負電荷,所以在電場作用下都向E極移動。但由于抗體分子在這樣的PH條件下只帶微弱的負電荷,而且它的分子量又較大(為r球蛋

    免疫共沉淀的實驗原理簡介

      免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。其原理是:當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質

    免疫共沉淀實驗方法

    免疫共沉淀(co-immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。 其原理是:當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質x

    定量PCR原理、材料與實驗方法

    一.原理應用定量PCR技術,用一種標準作對照能夠估計出一種特異性靶DNA或RNA分子的相對含量。參照物:在定量 PCR 中必須加入參照物,用來作為擴增系統的陽性對照,并作為未知樣本定量的標準,且通過競爭性作用校正擴增系統內管間的擴增效率,使其具有可比性。參照物按其性質不同可分為內參照和外參照。內參照

    細菌的局限性轉導實驗原理、材料和實驗步驟

    一、實驗原理: 轉導是由噬菌體為媒介將一個細胞的遺傳物質轉移給另一個細胞的過程。隨著分子遺傳學的發展,轉導已成為基因精細結構分析的常用方法。轉導可分為局限性轉導和普遍性轉導二大類。 本實驗試圖用局限性轉導為例,用噬菌體(λ)專一性轉導半乳糖發酵基因的現象來說明轉導的基

    RNA干擾(RNAi)實驗原理與方法(1)

    近年來的研究表明,將與mRNA對應的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導入細胞,可以使mRNA發生特異性的降解,導致其相應的基因沉默。這種轉錄后基因沉默機制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被稱為RNA干擾(RNAi)。一、R

    凝集反應實驗原理和方法(直接凝集反應和間接凝集...(2)

    (一)正向間接血凝試驗 將綿羊紅細胞或人的“ O”型紅細胞用醛類固定(稱為醛化,可改變血球表面性質,使其易于吸附蛋白質類抗原,并可長期保存使用),再將可溶性抗原吸附于醛化的血細胞上,制成抗原致敏的紅細胞,當與相應的抗體結合,使紅細胞被動的聚合在一起,出現肉眼可見的凝集

    凝集反應實驗原理和方法(直接凝集反應和間接凝集...(2)

    (一)正向間接血凝試驗 ? 將綿羊紅細胞或人的“ O”型紅細胞用醛類固定(稱為醛化,可改變血球表面性質,使其易于吸附蛋白質類抗原,并可長期保存使用),再將可溶性抗原吸附于醛化的血細胞上,制成抗原致敏的紅細胞,當與相應的抗體結合,使紅細胞被動的聚合在一起,出現肉眼可見的凝集現象

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