熱點課題研究之慢病毒載體的使用與技術展望(三)
1.ORF表達克隆產品 慢病毒貨號 描述 滴度 體積及規格 慢病毒總量 LPP-貨號-載體-100 ORF/Promoter/lncRNA 慢病毒 ORF: ≥ 10^8 TU/ml * Promoter:N/A 100ul(50ul× 2管) 1×10^7 TU LPP-貨號-載體-400 400ul(50ul× 8管) 4×10^7 TU LPP-貨號-載體-A00 1000ul(50ul× 20管) 1×10^8 TU LPP-貨號-載體-A05 大包裝 5 ml (默認200ul× 25管) 5×1......閱讀全文
熱點課題研究之慢病毒載體的使用與技術展望(三)
? ? ? ?1.ORF表達克隆產品? 慢病毒貨號 描述 滴度 體積及規格 慢病毒總量 LPP-貨號-載體-100 ORF/Promoter/lncRNA 慢病毒 ORF: ≥ 10^8 T
熱點課題研究之慢病毒載體的使用與技術展望(一)
? ? ? ?在我們的課題研究中,很多小伙伴們應該都涉及到基因功能的研究。在基因功能研究過程中,我們少不了要去給這個基因進行過表達、敲除或者敲低的操作。這樣我們就需要構建表達載體(過表達,敲除或者敲低),并將構建好的表達載體轉染至我們的細胞或者實驗動物內,進而便可研究我們的基因在細胞或者生物體內
熱點課題研究之慢病毒載體的使用與技術展望(二)
? ?? 二、慢病毒載體?? ? ? ?慢病毒載體(Lentivirus)是一類改造自人免疫缺陷病毒(HIV)的病毒載體,是逆轉錄病毒的一種,基因組是RNA,其毒性基因已經被剔除并被外源性目的基因所取代,屬于假型病毒。可利用逆轉錄酶將外源基因整合到基因組中實現穩定表達,具有感染分裂期與非分裂期細
病毒包裝技術——病毒與非病毒載體
基于轉化醫學的研究理念,銳賽知道,每一項臨床疾病的致病源頭或表象最初都是由個體體內某個基因的突變導致了。所以每一項臨床疾病的研究,整體課題項目開展的最初源頭也必須從一個基因開始。銳賽在多年的轉化醫學研究中,在于各個臨床醫師的整體項目合作中,探討得出的不僅是轉化醫學臨床研究課題的整體思路,一般實驗方向
病毒包裝技術1——病毒與非病毒載體介紹
基于轉化醫學的研究理念,銳賽知道,每一項臨床疾病的致病源頭或表象最初都是由個體體內某個基因的突變導致了。所以每一項臨床疾病的研究,整體課題項目開展的最初源頭也必須從一個基因開始。 銳賽在多年的轉化醫學研究中,在于各個臨床醫師的整體項目合作中,探討得出的不僅是轉化醫學臨床研究課題的整體思路,
病毒包裝技術——腺病毒載體的制備
1 菌液的準備1.1. 取含目的質粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超凈臺用接種環劃線于氨芐抗性的平板上,37℃倒置培養12-16h。待平板長出菌落,挑選生長狀態良好的單克隆菌落。若無目的質粒的菌液,則需取庫存質粒進行轉化,然后挑單克隆搖菌。1.2. 將單克隆接種于5ml氨芐
綜述:ICPMS技術進展應用熱點及未來展望
電感耦合等離子體質譜儀(ICP-MS)及電感耦合等離子體發射光譜儀(ICP-OES)在某些領域例如地質學,始終扮演著獨具魅力的角色。時至今日,ICP-MS仍然活躍在新進展的前沿,在某些熱點領域如金屬組學和納米顆粒分析方面繼續大放異彩。
病毒包裝技術5——腺病毒載體的制備介紹
1 菌液的準備 1.1. 取含目的質粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超凈臺用接種環劃線于氨芐抗性的平板上,37℃倒置培養12-16h。待平板長出菌落,挑選生長狀態良好的單克隆菌落。若無目的質粒的菌液,則需取庫存質粒進行轉化,然后挑單克隆搖菌。 1.2. 將單
常用的基因轉染技術病毒載體介紹
1、逆轉錄病毒載體 逆轉錄病毒為RNA病毒,它們的基因組編碼在一條單鏈RNA上,病毒進入細胞通過逆轉錄作用,病毒RNA即轉變為雙鏈DNA分子,DNA進入細胞核并整合在細胞染色體中,這種整合的病毒稱為原病毒。在原病毒的兩端各有一長末端重復序列(LTR),LTR內側還有為復制所必需的其他順序,包括
腺病毒載體疫苗的制備與分離
通常來說,開發一種新型疫苗需要經過數年的艱苦過程,包括完整的生產工藝確定。這樣的模式沒辦法對一些爆發性的傳染疾病做出快速響應,而且面對一些商業潛力比較小的區域性疾病或者是某些定制化疫苗也是力有不逮。?在病毒載體家族里面,腺病毒的應用非常廣泛,它具有誘導抗體和T細胞組合反應的潛能。雖然人群中廣泛存在的
空間轉錄組技術用于免疫治療的研究與展望
腫瘤免疫治療現狀近年來,免疫療法,這種通過激活患者的免疫系統來殺死癌細胞的策略,已成為對抗癌癥的新希望。目前的免疫療法主要基于癌癥疫苗,細胞因子(例如白介素2),繼細胞轉移(ACT)和免疫檢查點抑制。基于他們的特點,特別針對程序性細胞死亡-1 /程序性細胞死亡配體1(PD-1 / PD-L1)途
RNA研究熱點技術介紹總匯
頭條消息:2019年8月16日,2019年國家自然科學基金評審結果發布,今年國自然重點資助項目743項,總金額達22.184億,北京大學、浙江大學位居前兩位,分別獲得37項和34項,總計超過1億元,而上海交通大學(30項)、復旦大學、清華大學、南京大學、中山大學、天津大學、華中科技大學、同濟大學
RNA研究熱點技術介紹總匯
頭條消息:2019年8月16日,2019年國家自然科學基金評審結果發布,今年國自然重點資助項目743項,總金額達22.184億,北京大學、浙江大學位居前兩位,分別獲得37項和34項,總計超過1億元,而上海交通大學(30項)、復旦大學、清華大學、南京大學、中山大學、天津大學、華中科技大學、同濟大學
病毒包裝技術——慢病毒載體構建及包裝流程
一、實驗流程(1和2為并列步驟)慢病毒過表達質粒載體的構建設計上下游特異性擴增引物,同時引入酶切位點,PCR(采用高保真KOD酶,3K內突變率為0%)從模板中(CDNA質粒或者文庫)調取目的基因CDS區(coding sequence)連入T載體。將CDS區從T載體上切下,裝入慢病毒過表達質粒載體。
國自然研究熱點——eccDNA的前世今生(三)
小編在這兒也給大家整理了eccDNA表達譜的研究思路,如下圖。?(2)生物標志物eccDNA優于線性DNA的生物穩定性以及獨特的分子結構特征,為迅速發展的無創活檢道路增添了新的方向,如果有較多的臨床樣本,它非常適合做生物標志物的研究。下面這篇文章是eccDNA在液體活檢方面探索的先驅文章,小編帶大家
2020年自然研究熱點——外泌體研究(三)
??2.分子標志物分子標志物思路案例1外泌體分子標志物的研究是在表達譜的基礎上進行更進一步的分析和篩選,并且通過擴大樣本驗證,來確認可以作為標志物的分子。這類研究與臨床應用聯系更緊密,近年來越來越受重視。2019年發表在Molecular Cancer(IF=10.679)上的文章Tumor-ori
2018海洋科技發展國際熱點與展望研討會在香港成功舉辦
? ? ? ? ? ? 2018年7月13-16日,由國家自然科學基金委員會(以下簡稱基金委)、香港科技大學和京港學術交流中心共同組織,香港科技大學海洋科學系承辦的2018年度“海洋科技發展的國際熱點與展望”學術研討會在香港順利召開。本次研討會旨在進一步貫徹中央“一國兩制”的方針和政策,
高通量測序技術總結與展望
第一代測序技術憑借其長的序列片段和高的準確率,適合對新物種進行基因組長距框架的搭建以及后期GAP填補,但是成本昂貴,而且難以勝任微量DNA樣品的測序工作。第二代測序技術中,454序列片段最長,比較適合對未知基因組從頭測序,搭建主體結構,但是在判斷連續單堿基重復區時準確度不高。Solexa較454
武漢病毒所在埃博拉病毒病毒載體疫苗研究方面獲進展
近期,中國科學院武漢病毒研究所研究員張波團隊在《分子治療》(Molecular Therapy)上發表了題為Rational design of self-amplifying virus-like vesicles with Ebola virus glycoprotein as vaccines
外泌體(Exosomes)的特殊性與研究性潛能展望(三)
? ?? 外泌體與免疫系統:?? ? ? ?不同的細胞來源的外泌體,包括免疫細胞(B細胞和樹突狀細胞)、癌細胞、上皮細胞和間充質細胞,釋放出帶有載體的外泌體,可影響先天免疫系統和適應性免疫系統中受體細胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+ T細胞可直接或間接地受到外泌體的影響,刺激或抑制其
簡述慢病毒載體的載體質粒
載體質粒上HIV-1的順式序列通常包括兩端的LTR、剪切位點及包裝信號Ψ等。此外,研究表明,gag基因5′端的序列可提高載體RNA的包裝效率;Rev蛋白需要與Rev反應元件(RRE)相作用,將未剪切的載體轉錄產物從細胞核轉運到胞漿。因此,Naldini等在載體上保留了gag基因5′端350bp的
構建復制缺陷型皰疹單純病毒載體實驗(三)
基本方案3 將外源基因序列插入到復制缺陷性基因組人類單純皰疹病毒(HSV)載 體實驗材料IE 基因補充細胞復制缺陷性 HSV 載體帶外源基因的質粒在24孔板中單層培養IE基因補充細胞系試劑、試劑盒完全改良的基礎培養基三羥甲基氨基甲烷緩沖鹽水DNA 抽提緩沖液苯酚 氯仿 異戊醇氯仿異丙醇乙醇總 RNA
滅活疫苗與腺病毒載體疫苗的區別
一、制備方法不同1、滅活疫苗:將培養擴增的活病毒通過理化方法,滅活以后經過系列純化技術制備的疫苗。2、腺病毒載體疫苗:采取5型腺病毒作為載體,導入新冠病毒抗原基因,通過生物反應器制成活載體疫苗。二、特點不同1、滅活疫苗:主要特點是疫苗的成份和天然的病毒結構是比較相似的,是最接近。通常免疫應答也比較強
光固化打印新技術的實用與展望
光,在人類文明史上極其重要。我們從發現光、了解光、研究光、到使用光,經歷了千百年的技術變革。3D打印也無可避免的使用了光,其無接觸式、靈活的交聯方法讓許多研究者對其趨之若鶩。本文帶您深入淺出的看懂這種技術和未來的發展空間。關于光固化打印技術基于光固化的打印技術可在精確控制的光照下固化光敏聚合物形成結
病毒包裝技術3——慢病毒載體構建及包裝流程介紹
1 菌液的準備 1.1. 取含目的質粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超凈臺用接種環劃線于氨芐抗性的平板上,37℃倒置培養12-16h。待平板長出菌落,挑選生長狀態良好的單克隆菌落。若無目的質粒的菌液,則需取庫存質粒進行轉化,然后挑單克隆搖菌。 1.2. 將單
《生態養殖研究與展望》學術研究專著出版
由中國工程院院士、中國科學院亞熱帶農業生態研究所首席研究員印遇龍擔任主編,牽頭組織全國知名養殖、生態等領域專家撰寫的《生態養殖研究與展望》學術研究專著,已正式付梓出版。《生態養殖研究與展望》出版隨著經濟社會的發展和人們生活水平的不斷提高,民眾的環保意識和對畜禽養殖業環境污染、食品安全問題的重視不斷加
《生態養殖研究與展望》學術研究專著出版
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/6/524392.shtm記者6月13日從科學出版社獲悉,由中國工程院院士、中國科學院亞熱帶農業生態研究所首席研究員印遇龍擔任主編,牽頭組織全國知名養殖、生態等領域專家撰寫的《生態養殖研究與展望》學術研究專著,
腺病毒載體的分類
第一代腺病毒載體:一般將E1或E3基因缺失的腺病毒載體稱為第一代腺病毒載體,此類型載體在未經過純化時可引發機體產生較強的炎癥反應和免疫反應,純化后可以安全使用,體內表達周期可達4周。第二代腺病毒載體:E2A或E4基因缺失的腺病毒載體被稱為第二代腺病毒載體,產生的免疫反應較弱其載體容量和安全性方面有所
武漢病毒所在流感病毒的細菌載體疫苗研究方面獲進展
流感病毒感染嚴重威脅人類健康,是全球面臨的重大公共衛生問題。現有季節性流感疫苗僅能提供針對特定毒株的有限保護,迫切需要“通用”流感疫苗來提供針對不同亞型流感病毒的有效保護。此外,目前的疫苗需要多次接種激活宿主免疫應答發揮保護效果,需要一種接種后便可提供即時保護的疫苗。近期,中國科學院武漢病毒研究所研
“食品表征屬性與品質識別新技術及設備研究”課題啟動
近日,“十二五”863計劃“現代食品工程化技術與裝備”主題項目的第七課題“食品表征屬性與品質識別新技術及設備研究”啟動會在北京召開。科技部農村司、農村中心、國家質檢總局科技司、中國檢科院有關領導和管理人員,以及項目首席專家和課題組成員參加了啟動會。 “食品表征屬性與品質識別新技術