分子生物學常用試劑的配制
1．LB(Luria-Bertani)培養液、平板的配制配制每升LB培養液，應在950ml去離子水中加入：細菌培養用酵母提取物（bacto-yeastextract）5g細菌培養用胰化蛋白胨（bacto-tryptone）10gNaCl10g搖動容器直至溶質完全溶解，用5mol/LNaOH(約0.2ml)調節pH值至7.0，加入去離子水至總體積為1L，在151bf/in2(1.034×105Pa)高壓下蒸汽滅菌20min。L瓊脂平板的配制：先按上述配方配制液體培養基，臨高壓滅菌前加入瓊脂糖15g/L，同法高壓蒸汽滅菌20min。從高壓滅菌器取出培養基時應輕輕旋動以使熔解的瓊脂糖能均勻分布于整個培養基溶液中，應使培養基降溫至50℃時，加入抗生素等不耐熱的物質。為避免產生氣泡，混勻培養基時應采取旋動的方式，然后可直接從燒瓶中傾出培養基鋪制平板。90mm直徑的培養皿約需30－50ml培養基，培養基完全凝結后，應倒置平皿并貯存于4℃備用......閱讀全文
分子生物學常用試劑配置
一、分子生物學常用貯存液的配制1、30%丙烯酰胺溶液【配制方法】將29g丙烯酰胺和1g N,N'-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之，補加水至終體積為100ml.用濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，查證該溶液的pH值應不大于7.0,置棕色瓶中保存于室溫。【注意】丙烯
分子生物學實驗常用試劑配置
常用貯液與溶液1mol/L亞精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亞精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。10mol/L乙酸胺（ammonium ac
分子生物學常用試劑的配制
1．LB(Luria-Bertani)培養液、平板的配制 配制每升LB培養液，應在950ml去離子水中加入： 細菌培養用酵母提取物（bacto-yeastextract） 5g 細菌培養用胰化蛋白胨（bacto-tryptone）10g NaCl 10g 搖動容器直至溶質完全溶解，用5mo
分子生物學常用試劑的配制
1．LB(Luria-Bertani)培養液、平板的配制配制每升LB培養液，應在950ml去離子水中加入：細菌培養用酵母提取物（bacto-yeastextract）5g細菌培養用胰化蛋白胨（bacto-tryptone）10gNaCl10g搖動容器直至溶質完全溶解，用5mol/LNaOH(約0.2
分子生物學實驗常用試劑配置
一. 常用貯液與溶液?1mol/L亞精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亞精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。?1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。?10mol/L乙酸胺（ammon
分子生物學實驗常用試劑配置
一. 常用貯液與溶液 1mol/L亞精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亞精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（ammo
分子生物學常用試劑的配制（一）
? 1.LB(Luria-Bertani)培養液、平板的配制 配制每升LB培養液，應在950ml去離子水中加入： 細菌培養用酵母提取物(bacto-yeastextract) 5g 細菌培養用胰化蛋白胨(bacto-tryptone)10g NaCl 10g
分子生物學常用試劑的配制（二）
? 15.5ml 85%磷酸(1.679g /ml) 40ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0) 使用時再稀釋10倍。 Tris-硼酸(TBE)：5×濃貯存液(每升)：54g Tris 堿 27.5g 硼酸20ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)
分子生物學實驗室常用有毒試劑及應急處理
本文整合了分子生物學實驗室常用有毒試劑及應急處理的方法及注意事項。中毒常見的癥狀包括：呼吸系統、循環系統、消化系統、泌尿系統、神經系統、血液系統。常見有毒試劑：溴化乙錠（C21H20N3Br，EB）【性質】：EB是分子生物學常用染料【毒性】：強誘變劑、中度毒性【注意】：通風櫥中配制，接觸時需戴手套，
分子生物學實驗室常用有毒試劑及應急處理
本文整合了分子生物學實驗室常用有毒試劑及應急處理的方法及注意事項。中毒常見的癥狀包括：呼吸系統、循環系統、消化系統、泌尿系統、神經系統、血液系統。 常見有毒試劑：溴化乙錠（C21H20N3Br，EB） 【性質】：EB是分子生物學常用染料 【毒性】：強誘變劑、中度毒性 【注
常用試劑
一 細菌培養試劑 - 返回 -?LB培養基?? ?NaCl 10 g?? ?Yeast extract 5 g? ?Peptone 10 g? ?Add dH2O to ? ?1000 ml? ?Aliquot to 500ml f
常用生化試劑
>>>常用生化試劑貨號品?????名規???格價 格(元)備??注B1005?Acridine Orange,1/2 ZnCI2??(吖啶橙)5g/10g190/320Sigma分裝B1006Acrylamide??(電泳級丙烯酰胺)100g/500g120/500Sigma分裝B1007?????
分子生物學常用溶液配制
分子生物學常用溶液配制一、分子生物學常用貯存液的配制1．30%丙烯酰胺溶液【配制方法】將29g丙烯酰胺和1g N，N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之，補加水至終體積為100ml。用濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，查證該溶液的pH值應不大于7.0，置棕色瓶中保存于室溫
常用試劑配制－2
Acetone / Formaldehyde FixativeAcrylamide Gel, denaturingAcrylamide Gel, nondenaturingAlkaline Phosphatase Buffer 1 (Glycine Buffer, 0.1 M, pH 10.4)Al
常用試劑配制－4
Phytohemaglutinin (PHA)Available as kidney bean lectin. It is typically used as a stock solution of 10-20 g/ml in balanced salt solution. For tissue c
常用試劑配制－5
Sodium citrate (MW 294.10)0.09 MDissolve 2.65 grams of sodium citrate to a final concentration of 100 ml with water.Sodium citrate/formaldehyde (for s
常用生化試劑作用
1.蛋白酶K：能水解消化蛋白質，特別是與DNA結合的組蛋白。再尿素和SDS中穩定。一般工作濃度是50—100μg/ml，推薦反應緩沖液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。2.SDS:十二烷基硫酸鈉. 溶解細胞膜上的脂類與蛋白質，因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜，并解離細胞中
常用生化試劑作用
1.蛋白酶K：能水解消化蛋白質，特別是與DNA結合的組蛋白。再尿素和SDS中穩定。一般工作濃度是50—100μg/ml，推薦反應緩沖液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。2.SDS:十二烷基硫酸鈉. 溶解細胞膜上的脂類與蛋白質，因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜，并解離細胞中
微波消解常用試劑
(1) 硝酸：硝酸是一種強氧化劑，能氧化侵蝕金屬和有機物質，使之成為可溶性的硝酸鹽，能夠溶解大多數的硫化物，通常與雙氧水同時使用，使消解完全，主要用于有機樣品如：脂肪、飲料、蛋白質、顏料和聚合物，也應用于金屬氧化物和土壤等。(2) 硫酸：硫酸是許多物質的有效溶劑，可完全破壞幾乎所有的有機化合物，進行
常用試劑配制－3
Magnesium chloride (MgCl?MW 95.23)1 mMDissolve 95.2 mg of magnesium chloride per final volume of 1 liter.4 mMDissolve 0.381 grams of magnesium chlorid
常用試劑的規格
四種常用規格有四種常用規格:優級純或一級品(GR,精密分析和科學研究工作);分析純或二級品(AR,重要分析和一般研究工作);化學純或三級品(CP,工礦及學校一般化學實驗);實驗試劑(L.P.)。優級純(GR,綠標簽): 主成分含量很高、純度很高,適用于精確分析和研究工作,有的可作為基準物質。分析純(
試劑的常用規格
四種常用規格有四種常用規格：優級純或一級品（GR，精密分析和科學研究工作）；分析純或二級品（AR，重要分析和一般研究工作）；化學純或三級品（CP，工礦及學校一般化學實驗）；實驗試劑(L.P.)。優級純（GR，綠標簽）： 主成分含量很高、純度很高，適用于精確分析和研究工作，有的可作為基準物質。分析純（
常用的分子生物學基本技術
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性，它已成為分子生物學中最常用的基本技術，被廣泛應用于基因克隆的篩選，酶切圖譜的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下（適宜的溫室度及離子強度等）可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
分子生物學常用實驗技術（十）
第二節RFLP 技術一、材料 基因組DNA(大于50kb,分別來自不同的材料)。二、設備 電泳儀及電泳槽， 照相用塑料盆5 只，玻璃或塑料板(比膠塊略大) 4 塊，吸水紙若干，尼龍膜(依膠大小而定)，濾紙，eppendorf 管(0.5ml)若干。三、試劑：1、限制性內切酶(BamHⅠ, Ec
分子生物學常用實驗技術（五）
第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第一節概述 從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA 的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA 和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA 文庫,構建的cDNA 文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA 和相
分子生物學常用實驗技術（十七）
第二節T7 DN A 聚合酶測序技術一、概述 T7 DNA 聚合酶最初具有5'→3'聚合酶活性以及單鏈和雙鏈3'→5'外切酶活性。當T7 DNA 聚合酶用適當方法處理后，可使3'→5'外切酶活力明顯下降。改造后的T7 DNA 聚合酶又稱T7
分子生物學常用實驗技術（十一）
第八章聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆第一節概述 PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶鏈反應)是一種選擇性體外擴增DNA 或RNA 的方法.它包括三個基本步驟: (1) 變性(Denature):目的雙鏈DNA 片段在94℃下解鏈; (2) 退火
分子生物學常用實驗技術（十六）
（三）電泳：1、預電泳（1）當凝膠聚合完全后，撥出鯊魚齒梳，將該梳子反過來，把有齒的一頭插入凝膠中，形成加樣孔。（2）立即將膠板固定在測序凝膠槽中，一般測序凝膠槽的上下槽是分開的，因而只有在固定好凝膠板后，方能加入TBE 緩沖液。（3）稀釋10×TBE 緩沖液至1×TBE，將該緩沖液加入上下二個電泳
分子生物學常用實驗技術（七）
（四） 電泳分析 通常合成的cDNA 第一鏈和第二鏈長度為350-6000 堿基,需進行1.4%堿性瓊脂糖電泳。將第一鏈和第二鏈摻入測定管中的反應液先用酚抽提,乙醇沉淀，方法見本章（二）第二鏈合成中的9-12 步，一般第一鏈和第二鏈上樣量相同。1. 標準分子量DNA 參照物的同位素標記(1) 通常
分子生物學常用實驗技術（二）
第三節操作步驟 一、細菌的培養和收集 將含有質粒pBS 的DH5α菌種接種在LB 固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24 小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB 液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12 小時至對數生長后期。 二、質粒D