蛋白的生物活性測定方法(結晶紫法和MTT法)
結晶紫法活性測定1、取對數生長期的人胰腺癌SW1990細胞,用0.25%胰酶(以無鈣鎂離子PBS溶液配制,pH7.4)消化后,加入RPMI-1640培養基(10%新生牛血清,100U/ml青霉素,100U/ml鏈霉素,pH7.2)吹打細胞,使形成細胞懸液。進行細胞計數,使細胞數為2~2.5×105個/ml。接種于96孔細胞培養板,100μl/孔。接種細胞時須不斷搖動細胞懸液,以保證各孔細胞數的均勻一致。96孔板放置于37℃、5%CO2培養箱中培養22h,觀察到孔中細胞長滿70~80%。2、在上述RPMI-1640完全培養基中加入放線菌素D,使終濃度為1.5μg/ml,配成樣品稀釋液。取此稀釋液900μl至Eppendorf管中,另在9個5ml管中加入700μl稀釋液。3、用完全培養基將基因工程人腫瘤凋亡素樣品(上海恰爾生物技術有限公司研制,批號:0304,凍干粉劑,蛋白濃度:2mg/支)復溶至1000μl(液體樣品測定蛋白濃度后......閱讀全文
生物蛋白如何保持活性
生物活性蛋白對環境的要求很高,高濃度的生物活性蛋白在常溫下保存很容易失去活性,為了確保這些珍稀成分的特殊活性與功能,只能采取生物凍干工藝,在無菌環境下采用-80度的極速超低溫真空凍干技術,使生物活性蛋白進入休眠狀態,達到完整的保存其生物活性的目的。
蛋白的生物活性測定方法
結晶紫法活性測定1、取對數生長期的人胰腺癌SW1990細胞,用0.25%胰酶(以無鈣鎂離子PBS溶液配制,pH7.4)消化后,加入RPMI-1640培養基(10%新生牛血清,100U/ml青霉素,100U/ml鏈霉素,pH7.2)吹打細胞,使形成細胞懸液。進行細胞計數,使細胞數為2~2.5x105個
生物蛋白具體活性的條件
要使蛋白質具有活性,多肽鏈要進行修飾、加工等,還要進行折疊具有一定的空間結構 剛合成的多肽鏈是沒有生物活性的。 蛋白質的結構可以分為四個等級。 一級結構:構成蛋白質的單元氨基酸通過肽鍵連接形成的線性序列,為多肽鏈。 二級結構:一級結構中部分肽鏈的彎曲或折疊產生二級結構。 三級結構:在二
如何保持生物蛋白的活性以及生物蛋白的作用
1、如何保持活性 生物活性蛋白對環境的要求很高,高濃度的生物活性蛋白在常溫下保存很容易失去活性,為了確保這些珍稀成分的特殊活性與功能,只能采取生物凍干工藝,在無菌環境下采用-80度的極速超低溫真空凍干技術,使生物活性蛋白進入休眠狀態,達到完整的保存其生物活性的目的。 2、作用 一方面從源頭
生物活性物質蛋白質的簡介
蛋白質是由許多α氨基酸按照一定的序列通過酰胺鍵 (或肽鍵)縮合而成的,具有較穩定的構象并具有一定生物功能的生物大分子。蛋白質是生命的載體,任何有生命的機體都不可能離開蛋白質。蛋白質在生命活動和種族繁衍中有重要的生物學意義,承擔著強大的功能。 ① 結構功能:蛋白質是生物組織和細胞的組成成分,并發
免疫球蛋白生物學活性
免疫球蛋白的重要生物學活性為特異性結合抗原,并通過重鏈C區介導一系列生物學效應(表2-2),包括激活補體、親和細胞而導致吞噬、胞外殺傷及免疫炎癥,最終達到排除外來抗原的目的。(一)抗原結合作用抗體分子在結合抗原時,其Fab片段的V區與抗原決定簇的立體結構(構象)必須吻合,特別與高變區的氨基酸殘基直接
表達蛋白的生物學活性的檢測
一、MTT比色法檢測細胞活性(一)原理??? 活細胞內線粒體琥珀酸脫氫酶能催化無色的MTT形成藍色的甲肷,其形成的量與活細胞數和功能狀態呈正相關。對細胞活力有影響的表達蛋白活性檢測可以通過MTT比色法進行。(二)試劑準備1、???青鏈霉素溶液(100X):青霉素100萬U,鏈霉素100萬U,溶于10
表達蛋白的生物學活性的檢測
一、MTT比色法檢測細胞活性(一)原理活細胞內線粒體琥珀酸脫氫酶能催化無色的MTT形成藍色的甲肷,其形成的量與活細胞數和功能狀態呈正相關。對細胞活力有影響的表達蛋白活性檢測可以通過MTT比色法進行。(二)試劑準備1、青鏈霉素溶液(100X):青霉素100萬U,鏈霉素100萬U,溶于100mlddH2
表達蛋白的生物學活性的檢測
一、MTT比色法檢測細胞活性(一)原理活細胞內線粒體琥珀酸脫氫酶能催化無色的MTT形成藍色的甲肷,其形成的量與活細胞數和功能狀態呈正相關。對細胞活力有影響的表達蛋白活性檢測可以通過MTT比色法進行。(二)試劑準備1、青鏈霉素溶液(100X):青霉素100萬U,鏈霉素100萬U,溶于100mlddH2
各類免疫球蛋白的生物學活性
? 不同Ig其合成部位、合成時間、血清含量、分布、半衰期以及生物學活性有所差別。 一、IgG IgG主要由脾、淋巴結中的漿細胞合成和分泌,以單體形式存在。在個體發育過程中機體合成IgG的年齡要晚于 IgM,在出生后第3個月開始合成,3~5歲接近成年人水平。IgG是血清中主要的抗體成分,約占血
簡述生物蛋白質保持活性方式和作用
一、生物蛋白質保持活性方式: 生物活性蛋白對環境的要求很高,高濃度的生物活性蛋白在常溫下保存很容易失去活性,為了確保這些珍稀成分的特殊活性與功能,只能采取生物凍干工藝,在無菌環境下采用-80度的極速超低溫真空凍干技術,使生物活性蛋白進入休眠狀態,達到完整的保存其生物活性的目的。 作用: 一
什么是生物活性?
生物活性,在材料領域里主要指能在材料與生物組織界面上誘發特殊生物、化學反應的特性,這種反應導致材料和生物組織間形成化學鍵合。在生物礦化過程中,主要指生物材料與活體骨產生化學鍵合的能力,是衡量生物材料的一個重要指標,可通過材料表面在人體模擬體液(simulated body fluid-SBF)中形成
糖脂的生物活性
生物活性甘油糖脂具有抗氧化、抗病毒、抗菌、抗腫瘤、抗炎、抗動脈粥樣硬化等多種生物活性,存在于動物的神經組織、植物和微生物中 。(1)抗氧化活性實驗發現甘油糖脂M874B還能夠保護由于加熱和外部的H2O2所引起的細胞死亡,能夠消除由H2O2釋放的羥基自由基,這說明MGDG(如M874B)是一種新型的氧
生物活性肽簡介
生物活性肽(Bioactive Peptides ,BAP)是蛋白質中20種天然氨基酸以不同組成和排列方式構成的從二肽到復雜的線性、環形結構的不同肽類的總稱,是源于蛋白質的多功能化合物。 [1] 生物活性肽具有多種人體代謝和生理調節功能,易消化吸收,有促進免疫、激素調節、抗菌、抗病毒、降血壓、降
抗體的生物活性
抗體的生物學活性體現在:(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發揮中和病毒的作用。(2)激活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補
什么是生物活性?
生物活性,在材料領域里主要指能在材料與生物組織界面上誘發特殊生物、化學反應的特性,這種反應導致材料和生物組織間形成化學鍵合。在生物礦化過程中,主要指生物材料與活體骨產生化學鍵合的能力,是衡量生物材料的一個重要指標,可通過材料表面在人體模擬體液(simulated body fluid-SBF)中形成
關于酪蛋白多肽的成分—生物活性肽的基本介紹
20世紀末,科學家在破解基因的秘密的同時,也對存在于生物體內的另一類奇妙物質的研究發生極大的興趣。這類物質就是生物活性肽,或稱功能肽。 科學家已在人體中發現了100多種生物活性肽,這些多肽具有傳遞生理信息,調節生理功能的作用,對于人體的神經、消化、生殖、生長、運動、代謝、循環等系統的正常生理活
蛋白的生物活性測定方法(結晶紫法和MTT法)
結晶紫法活性測定1、取對數生長期的人胰腺癌SW1990細胞,用0.25%胰酶(以無鈣鎂離子PBS溶液配制,pH7.4)消化后,加入RPMI-1640培養基(10%新生牛血清,100U/ml青霉素,100U/ml鏈霉素,pH7.2)吹打細胞,使形成細胞懸液。進行細胞計數,使細胞數為2~2.5×105個
Ras蛋白的活性介紹
Ras蛋白的活性狀態對細胞的生長、分化、細胞骨架、蛋白質運輸和分泌等都具有影響,其活性則是通過與GTP或GDP的結合進行調節。
活性G蛋白的檢測
來自細胞外的信號絕大多數都是要通過分布于細胞表面的各種受體傳導到細胞內部,從而引起細胞的生理反應,發揮相應的功能。細胞表面最大的受體家族就是G蛋白偶聯的受體(G-Protein-Coupled Receptors, GPCRs)。編碼GPCR的基因有1000多個,占人類基因組總數超過2%。G蛋白
酶蛋白的活性特點
酶蛋白與一般蛋白質的不同之處在于酶蛋白具有活性中心。酶蛋白的活性中心是與底物發生催化作用的部位,由酶蛋白的立體構型所決定,一般是三級結構及四級結構才具有活性中心。若這種結構被破壞,活性中心也就破壞,酶就失去活性,這就是當環境變化時,酶喪失活性的原因。 整個酶蛋白,包括活性中心和非活性中心部分,都
生物活性的功能介紹
植物抗毒素具有多種生物活性,但在健康的植株中沒有或含量很低,給抗毒素作為功能性食品添加因子的利用帶來困難。因植物抗毒素受到外界生物或非生物等激發子誘導后在植株中合成的特性,若能篩選合適的激發子對植株進行誘導,使功能性植物抗毒素在植株內大量合成,植株體即是功能性成分的天然加工廠,可獲得具備高生物活性的
TNF的生物活性測定
1.? 材料和試劑1.1培養液A :DMEM培養液添加10%的胎牛血清(FBS)。1.2培養液B:DMEM培養液添加10%的胎牛血清(FBS)和終濃度為0.7--1μg/ml的放線菌素D。1.3? L929細胞株:鼠結締組織纖維母細胞,來源于22天雄性C3H鼠皮下組織。1.4? 結晶紫染色溶液:0。
氫化奎寧的生物活性
生物活性Hydroquinine 是一種金雞納生物堿,可用于制備衍生物,如 C9 脫氫喹啉,9-乙酰氧基-10,11-二氫喹和 10,11-二氫喹單鹽酸鹽等。
TNF的生物活性測定
1. 材料和試劑1.1培養液A :DMEM培養液添加10%的胎牛血清(FBS)。1.2培養液B:DMEM培養液添加10%的胎牛血清(FBS)和終濃度為0.7--1μg/ml的放線菌素D。1.3 L929細胞株:鼠結締組織纖維母細胞,來源于22天雄性C3H鼠皮下組織。1.4 結晶紫染色溶液:0。05%
抗原抗體的生物活性
(1)結合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區別,就在于抗體能與相應抗原發生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。 (2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統、激發補
生物活性玻璃的應用
生物活性玻璃擁有很好的生物相容性和生物活性。應用大致可以分為四類:1.應用于骨骼修復中;2.在口腔治療中用作髓室穿孔的覆蓋修復材料和牙科植入材料;3.應用于創口愈合中;4.添加在美容護膚高檔化妝品中。
生物活性玻璃的特點
生物活性玻璃在骨骼中應用有以下優點:1.骨形成迅速,除骨引導作用以外,在顆粒內部及其周圍也可見骨生成。2.顆粒大小均勻,由于顆粒之間空隙和材料表面的大量微孔存在,為血管和組織的長人和緊密結合提供了良好條件。3.操作性能良好,生物相容性好,有黏附性和局部止血作用。4.X線阻射,便于術后檢查。5.具有降
抗原抗體的生物活性
(1)結合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區別,就在于抗體能與相應抗原發生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統、激發補體的溶菌
常見生物活性材料介紹
磷酸鈣材料磷酸鈣生物活性材料主要包括磷酸鈣骨水泥和磷酸鈣陶瓷纖維兩類。前者是一種廣泛用于骨修補和固定關節的新型材料,國內研究抗壓強度已達60MPa以上。后者具有一定的機械強度和生物活性,可用于無機骨水泥的補強及制備有機與無機復合型植人材料。磷酸鈣纖維或晶須具有良好的生物活性和生物相容性,對人體無毒副