植物RAPD(隨機擴增多態性DNA)分析技術
RAPD(Randomly Amplified Polymorphic DNA),意為隨機擴增多態性DNA,是利用PCR技術進行隨機擴增,把擴增的DNA片段進行瓊脂糖凝膠電泳,根據DNA條帶的多態性來反應模板DNA序列上的多態性。RAPD同AFLP、SSR等分子標記一樣都基于PCR擴增,只是RAPD分析只需要一個引物,其引物長度一般為10個核甘酸,其序列是隨機的,不同核甘酸序列的引物均有商品出售。單引物擴增是通過一個引物在兩條DNA互補鏈上的隨機配對來完成。由于基因組DNA的差異,使引物與模板的結合位點及這些位點之間的距離不同,使PCR擴增后的片段大小表現出多態性。在基因組DNA分子內可能存在或長或短被間隔開的顛倒重復序列,如果這些序列與引物能堿基配對,則在兩條單鏈上就會出現該引物的結合位點,結合位點的數量取決于這種重復序列的多少。不同DNA分子中這種顛倒重復序列間隔的長短不同,擴增條帶的大小就不同,即表現出多態性。10堿基......閱讀全文
植物RAPD(隨機擴增多態性DNA)分析技術
RAPD(Randomly Amplified Polymorphic DNA),意為隨機擴增多態性DNA,是利用PCR技術進行隨機擴增,把擴增的DNA片段進行瓊脂糖凝膠電泳,根據DNA條帶的多態性來反應模板DNA序列上的多態性。RAPD同AFLP、SSR等分子標記一樣都基于PCR擴增,只是RA
RAPD(隨機擴增多態性DNA)分析技術
實驗方法原理RAPD作為單引物的PCR擴增產物,其產生機理是引物首先結合到模板鏈,沿模板5’端方向延伸而產生不同長度的DNA片段,然后以這些片段為模板繼續大量擴增。由于RAPD反應中,在3’端沒有相應引物和模板互補,這樣必然存在一個由引物沿模板DNA 5’端方向延伸后再在3’端形成同一引物互補序
RAPD(隨機擴增多態性DNA)分析技術
聚合酶鏈式反應(PCR)以其優越性極大地影響到了分子生物學的幾乎所有領域,并以其基本程序和DGGE,開發出多種檢測核苷酸變異的方法。RAPD(Random Amplifed Polymorphic DNA)是其中一種,可用于(1)遺傳圖譜的構建(2)系統學研究(3)目的基因的標記和定位(4)純度和外
RAPD(隨機擴增多態性DNA)分析技術
RAPD分析技術 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 RAPD作為單引物的PCR擴增產物,其產生機理是引物首先結合到模板鏈,沿模板5'端方向延伸而產生不同長度的DNA片段
RAPD(randomly-amplifiled-polymorphic-DNA,隨機擴增的多態性DNA
一、 原理運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(randomly amplifiled polymorphic DNA,隨機擴增的多態性DNA.)該RAPD技術建立于PCR基礎上,它是利用一系列(通常數百個)不同的隨機排列堿基順序的寡聚核苷酸單鏈(通常為十聚體
隨機擴增多態性DNA技術簡介
隨機擴增多態 DNA (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD),是美國學者Williams和Welsh于1990年首先提出的該技術是通過分析DNA的PCR產物的多態性來推測生物體內基因排布與外在性狀表現的規律的技術。RAPD技術是以8-lObp的隨機寡核苷
隨機擴增多態性DNA技術特點
(1)不需要了解研究對象基因組的任何序列,只需很少純度不高的模板,就可以檢測出大量的信息。(2)無需專門設計RAW)反應引物,隨機設計長度為8-10個堿基的核苷酸序列就可應用。(3)操作簡便,不涉及分子雜交、放射自顯影等技術。(4)需要很少的DNA樣本。? ?(5)不受環境、發育、數量性狀遺傳等的影
隨機擴增多態性DNA的簡介
隨機擴增多態 DNA (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD),是美國學者Williams和Welsh于1990年首先提出的該技術是通過分析DNA的PCR產物的多態性來推測生物體內基因排布與外在性狀表現的規律的技術。RAPD技術是以8-lObp的隨機寡
植物RAPD分析技術
RAPD(Randomly Amplified Polymorphic?DNA),意為隨機擴增多態性DNA,是利用PCR技術進行隨機擴增,把擴增的DNA片段進行瓊脂糖凝膠電泳,根據DNA條帶的多態性來反應模板DNA序列上的多態性。RAPD同AFLP、SSR等分子標記一樣都基于PCR擴增,只是RAPD
關于隨機擴增多態性DNA的研究情況
由于隨機引物在較低的復性溫下能與基因組DM非特異性的結合,當相鄰兩個引物間的DNA小于2 000bp時,就能夠得到擴增產物。與RFLP相比,RAPD具有很多優點。(1)不需要了解研究對象基因組的任何序列,只需很少純度不高的模板,就可以檢測出大量的信息。(2)無需專門設計RAW)反應引物,隨機設計
隨機引物的PCR標記的相關內容
所用引物的核苷酸序列是隨機的,其擴增的 DNA 區域事先未知。隨機引物PCR擴增的 DNA 區段產生多態性的分子基礎是模板 DNA 擴增區段上引物結合位點的堿基序列的突變,不同來源的基因組在該區段上表現為擴增產物有無差異或擴增片段大小的差異。隨機引物PCR標記表現為顯性或共顯性。 ①隨機擴增多
RAPD標記技術
實驗概要運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(randomly ?amplifiled polymorphic ?DNA,隨機擴增的多態性DNA.)該RAPD技術建立于PCR基礎上,它是利用一系列(通常數百個)不同的隨機排列堿基順序的寡聚核苷酸單鏈(通常為十聚體)
常用的幾種分子標記
RAPD利用 10 個堿基的一個或幾個隨機引物非定點地擴增 DNA 片段,一般一個引物可擴增 6-12 條 DNA 片段,利用凝膠電泳分開擴增的片段,從而進行基因多態性研究。 RAPD 是一種能快速進行基因多態性研究的技術,并且由于不涉及印跡雜交、放射性自顯影等技術,因此簡便易行。?SSR 真核生物
幾種標記實驗的特點
RAPD利用 10 個堿基的一個或幾個隨機引物非定點地擴增 DNA 片段,一般一個引物可擴增 6-12 條 DNA 片段,利用凝膠電泳分開擴增的片段,從而進行基因多態性研究。 RAPD 是一種能快速進行基因多態性研究的技術,并且由于不涉及印跡雜交、放射性自顯影等技術,因此簡便易行。SSR 真核生物的
RFLP技術和RAPD技術2
第三節 RAPD技術一、 材料不同來源的DNA(50ng/ul)。二、設備PCR儀,PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管,電泳裝置。三、試劑1、隨機引物(10mer) (5umol/L):購買成品。2、Taq酶:購買成品。3、10xPCR 緩沖液:配方見第八章。4、MgCl2 :25mm
分子生態學詞匯隨機擴增多態
隨機擴增多態 DNA (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD),是美國學者Williams和Welsh于1990年首先提出的該技術是通過分析DNA的PCR產物的多態性來推測生物體內基因排布與外在性狀表現的規律的技術。RAPD技術是以8-lObp的隨機寡核苷
什么是隨機擴增多態-DNA?
隨機擴增多態 DNA (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD),是美國學者Williams和Welsh于1990年首先提出的該技術是通過分析DNA的PCR產物的多態性來推測生物體內基因排布與外在性狀表現的規律的技術。RAPD技術是以8-lObp的隨機寡核苷
農作物種子純度鑒定方法綜述4
4.2 SSR(Simple sequence repeat,簡單序列重復標記)由Moore等于1991年創立。SSR即微衛星DNA,是一類由幾個(多為1~5個)堿基組成的基序(motif)串聯重復而成的DNA串聯重復序列,其長度一般較短,廣泛分布于基因組的不同位置,如(cA)n、(AT)n、(GG
RAPD標記技術的原理
RAPD標記(Random amplifiedpolymorphim DNA , RAPD)是由美國人Williams和Welsh等于1990年利用PCR技術發展起來的一種DNA多態性標記。它是利用隨機引物對目的基因組DNA進行PCR擴增,產物經電泳分離后顯色,分析擴增產物DNA片段的多態性,此即反
RAPD和ISSR技術
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(Random amplified polymorphic DNA ,隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的方式以及
RAPD和ISSR技術
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為 RAPD(Random amplified polymorphic DNA ,隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的
RAPD和ISSR技術
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(Random amplified polymorphic DNA ,隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的方式以及快
DNA分子標記技術研究進展(一)
遺傳標記在遺傳學的建立和發展過程中有著舉足輕重的作用,隨著遺傳學的進一步發展和分子生物學的異軍突起,遺傳標記先后相應地經歷了形態標記、細胞學標記、生化標記和DNA分子標記四個發展階段。前三種標記都是以基因表達的結果為基礎的,是對基因的間接反映;而DNA分子標記則是DNA水平遺傳變異的直接反映,它具有
RAPD技術
實驗概要RAPD(Random ?Amplified Polymorphic ?DNA,隨機擴增的多態性DNA)是建立于PCR實驗基礎上的檢測基因組DNA多態性的實驗技術。從1990年Williams首次應用該技術到今,短短幾年間,該技術由于具有快速、簡便、耗資相對較少,所需設備較少的特點,因此發展
RFLP和RAPD技術原理和操作步驟
原理:DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種(個體)基因組的限制性內切酶的酶切位點
RFLP技術和RAPD技術3
一個較為詳細的遺傳連鎖圖譜不僅對該物種的遺傳學基礎研究有重要意義,同時對該物種的育種研究也很有幫助。Potlethwait和Stephen 等用RAPD技術進行斑馬魚遺傳連鎖圖譜的制作。Liu把RAPD技術應用到鯰魚基因圖譜研究中。孫效文等建立了鯉魚的遺傳連鎖圖譜。圖譜有RAPD分子標記56個,
RAPD分析的原理及操作技術
1 目的分子標記是一類建立在分子水平上的遺傳標記,它同樣具有遺傳標記的兩個特點,即可遺傳性和可識別性。廣義的分子標記包括同工酶和DNA分子標記兩類,狹義的分子標記則僅指后者。DNA分子標記通常是一些小分子量的DNA片段(幾十到2000bp左右),它們大量存在于真核生物的基因組內,能夠通過特定的技術和
RAPD分子標記的實驗原理及操作流程
RAPD標記RAPD技術的全稱是隨機擴增多態性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA),此技術建立于PCR基礎之上,使用一系列具有10個左右堿基的單鏈隨機引物,對基因組的DNA全部進行PCR擴增,以檢測多態性。由于整個基因組存在眾多反向重復序列,因此須對每一隨機
RFLP和RAPD技術
RFLP和RAPD技術概 述? DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種(個體)基
分子實驗方法7:-RFLP和RAPD技術
第七章 RFLP和RAPD技術第一節 概 述 DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同