凝膠電泳(gelelectrophoresis)操作注意事項
1.緩沖系統：在沒有離子存在時，電導率最小，DNA不遷移，或遷移極慢，在高離子強度的緩沖液中，電導很高并產熱，可能導致DNA變性，因此應注意緩沖液的使用是否正確。長時間高壓電泳時，常更新緩沖液或在兩槽間進行緩沖液的循環是可取的。2.瓊脂糖：不同廠家、不同批號的瓊脂糖，其雜質含量不同，影響DNA的遷移及熒光背景的強度，應有選擇地使用。3.凝膠的制備：凝膠中所加緩沖液應與電泳槽中的相一致，溶解的凝膠應及時倒入板中，避免倒入前凝固結塊。倒入板中的凝膠應避免出現氣泡，影響電泳結果。4.樣品加入量：一般情況下，0.5cm寬的梳子可加0.5μg的DNA量，加樣量的多少依據加樣孔的大小及DNA中片段的數量和大小而定，過多的量會造成加樣孔超載，從而導致拖尾和彌散，對于較大的DNA此現象更明顯。5.電泳系統的變化會影響DNA的遷移，加入DNA標準參照物進行判定是必要的。6.DNA樣品中鹽濃度會影響DNA的遷移率，平行對照樣品應使用同樣的緩沖條件以......閱讀全文
凝膠電泳(gel－electrophoresis)操作注意事項
1.緩沖系統：在沒有離子存在時，電導率最小，DNA不遷移，或遷移極慢，在高離子強度的緩沖液中，電導很高并產熱，可能導致DNA變性，因此應注意緩沖液的使用是否正確。長時間高壓電泳時，常更新緩沖液或在兩槽間進行緩沖液的循環是可取的。2.瓊脂糖：不同廠家、不同批號的瓊脂糖，其雜質含量不同，影響DNA的遷移
凝膠電泳（gel－electrophoresis）的注意事項
影響電泳分離的主要因素：待分離生物大分子的性質：待分離生物大分子所帶的電荷、分子大小和性質都會對電泳有明顯影響。一般來說，子帶的電荷量越大、直徑越小、形狀越接近球形，則其電泳遷移速度越快。2. 緩沖液的性質：緩沖液的pH值會影響待分離生物大分子的解離程度，從而對其帶電性質產生影響，溶液pH值距離
DNA的凝膠電泳（gel－electrophoresis）
一、原理瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠是分離和純化DNA片段的標準方法。聚丙烯酰胺凝膠電泳適用于分離小分子的核酸；瓊脂糖凝膠孔徑較大，被應用于大分子核酸的分離和純化。在一定濃度的瓊脂糖凝膠介質中，DNA分子的電泳遷移率與其分子量的常用對數成反比。當用低濃度的熒光嵌入染料溴化乙啶（EB）染色，在紫外光下至少可
DNA凝膠電泳（DNA－agarose－gel－electrophoresis）
實驗原理瓊脂糖凝膠電泳是常用的用于分離、鑒定DNA、RNA分子混合物的方法，這種電泳方法以瓊脂凝膠作為支持物，利用DNA分子在泳動時的電荷效應和分子篩效應，達到分離混合物的目的。DNA分子在高于其等電點的溶液中帶負電，在電場中向陽極移動。在一定的電場強度下，DNA分子的遷移速度取決于分子篩效應，即分
凝膠電泳（gel－electrophoresis）常見問題分析
瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA時,跑出的帶后面出現拖尾現象,什么原因造成的?參考見解： DNA帶模糊：1、 DNA降解??避免核酸酶污染。2、 DNA上樣量過多??減少凝膠中DNA上樣量。3、 所用電泳條件不合適??電泳時電壓不應超過20V/cm，溫度＜30℃,巨大DNA鏈，溫度應＜15℃，核查所用電泳緩
DNA酶切及凝膠電泳（gel－electrophoresis）
材料、設備及試劑 一、 材料 λDNA: 購買或自行提取純化; 重組T-vector質料或pUC19質粒; EcoRI酶及其酶切緩沖液: 購買成品; HindⅢ酶及其酶切緩沖液: 購買成品;瓊脂糖(Agarose): 進口或國產的電泳用瓊脂糖均可。 二、 設備 水平式電泳裝置,電泳儀,臺式高
Gel－Electrophoresis－of－DNA
What is Electrophoresis?Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. In this CyberLab we
RNA－gel－electrophoresis
實驗概要RNA gel electrophoresis主要試劑DEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37oC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide sol
Agarose－Gel－Electrophoresis
實驗概要Separating nucleic acid fragments by agarose gel electrophoresis.實驗原理?Agarose ?gel electrophoresis remains the most widely used technique for ?sep
Agarose－gel－electrophoresis
General ProcedureCast a gelPlace it in gel box in running bufferLoad samplesRun the gelImage the gelCasting Gels0.7% agarose gel with 1kbp ladder in U
RNA－gel－electrophoresis
MaterialsDEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37oC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide solutions should also be
DNA酶切及凝膠電泳（gel－electrophoresis）1
第一節 概 述 一. DNA的限制性內切酶酶切分析 限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上，并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作用且依賴于ATP的存在。Ⅰ類酶結合于識別位點并隨機的切割識別位
DNA酶切及凝膠電泳（gel－electrophoresis）2
三、試劑 1、5×TBE電泳緩沖液：配方見第一章。 2、6×電泳載樣緩沖液：0.25% 溴粉藍，40%(w/v) 蔗糖水溶液，貯存于 4℃。 3、溴化乙錠(EB)溶液母液:將EB配制成10mg/ml，用鋁箔或黑紙包裹容器，儲于 室溫即可。 第三節 操作步驟 一、
瓊脂糖凝膠電泳（agarose－gel－electrophoresis）介紹
主要試劑：核酸電泳緩沖液有三種，即Tris-硼酸(TBE)、Tris-乙酸(TAE)和Tris-磷酸(TPE).TBE與TPE緩沖容量高，DNA分離效果好，但TPE在DNA段回收時含磷酸鹽濃度高，容易使DNA沉淀.TAE緩沖容量低，但價格較便宜，因而推薦選用TBE.緩沖液中的EDTA可螯合二價陽離子
DNA瓊脂糖凝膠電泳（agarose－gel－electrophoresis）分析
一、原理瓊脂糖凝膠具有分子篩效應。在中性ppH值的電泳緩沖液體系中，DNA分子由于帶負電荷，所以在電場作用下由負極向正極泳動。由于DNA分子的大小和構型不同，在相同的時間內遷移至不同的位置。凝膠經溴化乙錠染色后，紫外檢測儀下觀察，即可看見DNA片段按大小不同呈條帶分布。由于在一定條件下，DNA的遷移
瓊脂糖凝膠電泳（agarose－gel－electrophoresis）檢測DNA
原理： 瓊脂糖是從海藻中提取出來的一種線狀高聚物，可作為電泳支持物，適用于分離大小范圍在0.2-50kb的DNA片段。DNA分子的遷移率與分子量的對數值成反比關系。觀察其遷移距離，與標準DNA片段進行對照，就可獲知該樣品分子量大小。在質粒抽提過程中，由于各種因素的影響，使質粒DNA呈現超螺旋的共
雙向瓊脂糖凝膠電泳（agarose－gel－electrophoresis）實驗
【實驗目的】了解和掌握雙向電泳技術，并學習用它來研究與DNA 復制相關的問題。【實驗原理】DNA 分子有線狀的，還有一些非線狀的，如復制叉和重組DNA 結構。雙向瓊脂糖凝膠電泳技術就是被人們開發用以研究一些非線狀DNA 分子的。雙向瓊脂糖凝膠電泳技術(2-D gel)實際上可分為兩類：中性/中性
Polyacrylamide－Gel－Electrophoresis－of－Oligonucleotides
1. Pour and polymerize a 20% polyacrylamide gel, no Urea.2. Remove clamps. Rinse with water. Remove comb. Rinse top of gel well.3. Insert comb teeth d
Alkaline－agarose－gel－electrophoresis
Alkaline agarose gel electrophoresis (Sambrook et al., 1989)Alkaline agarose gels can be used to determine the size and quality of first and second st
Blue－Native－Gel－Electrophoresis
Blue Native Gel ElectrophoresisStock solutions49.5%T, 3%C Acrylamide 24 g acrylamide, 0.75 g bisacrylamide / 50 ml H2O Store at RT3 x Gel buffer 150 m
Agarose－Gel－Electrophoresis－of－DNA
1) Dissolve 1 g of agarose in 100 ml of 1X TAE or TBE buffer (gives a 1% gel). See note for making LMP agarose gel.?2) Cast the gel with the comb in p
DNA片段的瓊脂糖凝膠電泳（agarose－gel－electrophoresis）
【原 理】瓊脂糖凝膠電泳是重組DNA研究中常用的技術，可用于分離，鑒定和純化DNA片段。不同大小、不同形狀和不同構象的DNA分子在相同的電泳條件下（如凝膠濃度、電流、電壓、緩沖液等），有不同的遷移率，所以可通過電泳使其分離。凝膠中的DNA可與熒光染料溴化乙錠（EB）結合，在紫外燈下可看到熒光條帶，籍
質粒DNA的瓊脂糖凝膠電泳（agarose－gel－electrophoresis）
帶電荷的物質在電場中的趨向運動稱為電泳。電泳的種類多，應用非常廣泛，它已成為分子生物學技術中分離生物大分子的重要手段。瓊脂糖凝膠電泳由于其操作簡單、快速、靈敏等優點，已成為分離和鑒定核酸的常用方法。實驗目的：掌握瓊脂糖凝膠電泳的原理，學習瓊脂糖凝膠電泳的操作。實驗材料：質粒DNA、BAC、植物總DN
InGel－Digestion－of－Proteins－Separated－byPolyacrylamide－Gel－Electrophoresis
1. Excision of protein bands (spots) from polyacrylamide gelsRinse the gloves you use with water to avoid traces of dust in your sample.Rinse the gel
SDS－Gel－Electrophoresis－of－Tubulin\MAPs
MaterialsStock Acrylamide: (30%T:0.8%C)30% by weight of acrylamide0.8% by weight of N,N'-bis-methylene acrylamideSeparation Gel (Final Concentrati
High－Resolution－Agarose－Gel－Electrophoresis
實驗概要Agarose gel ?electrophoresis remains the most widely used technique for separating ?nucleic acid fragments due to its ease of use, non-toxicity, a
Denaturing－Agarose－Gel－Electrophoresis－of－RNA
The overall quality of an RNA preparation may be assessed by electrophoresis on a denaturing agarose gel; this will also give some information about R
Denaturing－Gradient－Gel－Electrophoresis－(DGGE)
Purpose:Denaturing gradient gels are used to detect non-RFLP polymorphisms. The small (200-700 bp) genomic restriction fragments are run on a low to h
血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳(agarose－gel－electrophoresis)（二）
【操作】1、預染血清血清0.2ml中加蘇丹黑染色液0.2ml，混合置37℃水浴中染色30分鐘，離心（2000轉/分）約5分鐘。以除去懸浮于血清中染料沉渣。2、制備瓊脂糖凝膠板將已配制好的0.5%瓊脂糖凝膠于沸水浴中加熱融化，用吸管吸取凝膠溶液澆注在載玻片上，約3 ml。靜置半小時后凝固（天熱時需延長
血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳(agarose－gel－electrophoresis)（一）
【原理】瓊脂糖（agarose）是經過挑選，以質地較純的瓊脂（agar）作為原料而制成的。瓊脂在化學上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖，它具有離子交換性質，這種性質會給電泳及凝膠過濾以不良的影響。瓊脂糖是直鏈多糖，它由D－半乳糖和3,6－脫水－L－半乳糖的殘基交替排列