全基因組甲基化定量檢測技術LUMA
LUMA介紹 基因組DNA甲基化(Genomic DNA Methylation, GDM)的變化被認為是正常和病理細胞過程中的重要的事件,有助于正常發育和分化以及癌癥和其他疾病。在此,我們介紹一種新的方法評估全基因組DNA甲基化,稱為熒光甲基化檢測(Luminometric Methylation Assay,LUMA)。該方法采用甲基敏感限制性內切酶DNA裂解法聯合焦磷酸測序的聚合酶延伸分析。該方法是一種定量檢測技術,重現性高,易于推廣。 其優點是:無需亞硫酸鹽修飾,無需引物,無需PCR過程,測序反應無需磁珠等試劑,十分鐘左右即可完成測序反應,方便快捷。而且,該實驗只需要200-500 ng的基因組DNA,并包含一個內控以消除起始DNA數量不同的問題。整個實驗過程能夠在6個小時內完成。 技術原理 此方法由Karimiet等人于2006年建立,采用DNA甲基敏感或不敏感的限制性內切酶進行DNA裂......閱讀全文
全基因組甲基化定量檢測技術LUMA
LUMA介紹基因組DNA甲基化(Genomic DNA Methylation, GDM)的變化被認為是正常和病理細胞過程中的重要的事件,有助于正常發育和分化以及癌癥和其他疾病。在此,我們介紹一種新的方法評估全基因組DNA甲基化,稱為熒光甲基化檢測(Luminometric Methylat
全基因組甲基化定量檢測技術LUMA
LUMA介紹 基因組DNA甲基化(Genomic DNA Methylation, GDM)的變化被認為是正常和病理細胞過程中的重要的事件,有助于正常發育和分化以及癌癥和其他疾病。在此,我們介紹一種新的方法評估全基因組DNA甲基化,稱為熒光甲基化檢測(Luminometric Methyl
進行全基因組甲基化檢測需要多少錢
建庫是5000塊錢一個庫,測序就是1500每G,看您要測多少G的數據量,信息分析大概要5000塊錢左右吧。。。
全基因組測序解讀重要甲基化機制
DNA看起來只是AGTC四種堿基的簡單排列,可一旦它與組蛋白包裝形成染色質,情況就復雜得多了。組蛋白主要有四種,分別是H2A、H2B、H3和H4。這些組蛋白要么令DNA盤繞起來保持沉默,要么將DNA解開允許基因表達。組蛋白上的化學修飾(如甲基化),能夠影響它對基因的控制。 H3K4me3是
全基因組甲基化測序技術可用于肺結節良惡性無創診斷
近期,中國科學院合肥物質科學研究院健康與醫學技術研究所研究員聶金福、副研究員洪波生物信息學研究團隊、研究員王宏志課題組和安徽醫科大學二附院趙大海團隊合作,在腫瘤早篩領域取得進展,開發出基于血液cfDNA甲基化的肺結節良惡性無創診斷模型。相關研究成果在線發表在Cancer Science上。
全基因組擴增技術介紹
研究人員通常會在下游分析中遭遇DNA樣本量有限或不足的問題。QIAGEN的全基因組擴增技術通過以包括單細胞在內的小量樣本或珍貴樣本擴增獲得基因組DNA,解決此類難題。REPLI-g?Kit能夠準確地復制原始DNA樣本,不會造成偏差,擴增后的DNA可以直接應用于廣泛的遺傳學分析。什么是全基因組擴增(w
揭示全基因組DNA甲基化、半甲基化與遺傳突變的新方法
5月31日,中國科學院北京生命科學研究院研究員孫中生團隊與北京大學腫瘤醫院合作,在Briefings in Bioinformatics上,發表了題為A new approach to decode DNA methylome and genomic variants simultaneousl
全基因組的比較基因組雜交技術介紹
Whole-Genome and Custom Fine-Tiling Array CGHComparative Genomic Hybridization (CGH) measures DNA copy number differences between a reference genome a
盤點全基因組檢測CRISPR脫靶位點的幾種重要技術
在2013年,來自麻省總醫院的研究人員發現使用CRISPR-Cas RNA引導性核酸酶的一個重要局限:會在預期靶點以外的位點上生成多余的DNA突變。此后陸續有研究直接說明了CRISPR/Cas9存在嚴重的脫靶性,即該技術可以發生非特異性切割,引起基因組非靶向位點的突變,這樣會造成研究結果的不確定
簡述全基因組測序的技術路線
全基因組測序的技術路線:提取基因組DNA,然后隨機打斷,電泳回收所需長度的DNA片段(0.2~5Kb),加上接頭, 進行DNA簇(Cluster)制備,最后利用Paired-End(Solexa)或者Mate-Pair(SOLiD)的方法對插入片段進行測序。然后對測得的序列組裝成Contig,通
Nature-Genetics:單細胞全基因組DNA甲基化組新發現
北京大學北京未來基因診斷高精尖創新中心,北大生命科學學院與第三醫院等處的研究人員發表了題為“Single-cell DNA Methylome Sequencing of Human Preimplantation Embryos”的文章,利用單細胞DNA甲基化組高通量測序方法,首次在單細胞分辨
基因組直接測序法檢測甲基化的介紹
基因組直接測序法是過去一直沿用的DNA甲基化的研究方法,用Maxam—Gilbert化學裂解法對基因組DNA進行處理,并以連接介導的PCR來放大信號強度,然后進行序列分析。此法是基于5mC在標準的Maxam—Gilbert胞嘧啶化學裂解反應中不被裂解,故5mC可通過在測序膠上缺少對應于胞嘧啶降解
基因組直接測序法檢測DNA的甲基化
基因組直接測序法是過去一直沿用的DNA甲基化的研究方法,用Maxam—Gilbert化學裂解法對基因組DNA進行處理,并以連接介導的PCR來放大信號強度,然后進行序列分析。此法是基于5mC在標準的Maxam—Gilbert胞嘧啶化學裂解反應中不被裂解,故5mC可通過在測序膠上缺少對應于胞嘧啶降解反應
甲基化檢測——MSHRM技術
DNA甲基化是發生在DNA堿基序列上的一種共價修飾。在哺乳動物中,DNA甲基化主要發生在5'-CpG-3'雙核苷酸序列的胞嘧啶上。在人類基因組中,大約有60%~70%的CpG胞嘧啶是甲基化的,其程度因不同的物種和細胞類型而異。DNA甲基化狀態在基因組中呈現出一定的分布模式,90%的甲
甲基化檢測——MSHRM技術
HRM技術服務之甲基化檢測(MS-HRM技術) DNA甲基化是發生在DNA堿基序列上的一種共價修飾。在哺乳動物中,DNA甲基化主要發生在5'-CpG-3'雙核苷酸序列的胞嘧啶上。在人類基因組中,大約有60%~70%的CpG胞嘧啶是甲基化的,其程度因不同的物種和細胞類型而異。DNA甲基化狀
全基因組突變新技術原理簡介
人類遺傳圖譜中,基因只占了全部DNA的2.5%,基因與基因之間的“非編碼”大片段并不全是“垃圾”,有些能夠調節基因的開啟和關閉,有些負責DNA折疊和將DNA打包運往細胞核。不止基因突變,控制基因的DNA發生突變也可能導致疾病。小鼠是疾病研究的常用模型,想要弄清小鼠基因組中每個DNA片段的功能,需要依
全基因組測序助力食源性疾病檢測
CDC研究人員檢查用于全基因組測序的電腦芯片。 李斯特菌暴發致3人死亡并且迫使美國得克薩斯州藍鈴冰淇淋公司在上個月底召回其全部產品,這是遺傳流行病學如何正在改變食源性疾病檢測的最新例子。兩年前,位于亞特蘭大的美國疾病控制和預防中心(CDC)啟動一項試點計劃,測序與某種疾病相關聯的每個李斯特菌樣品的
DNA甲基化檢測技術全攻略
近年來涌現出不少DNA甲基化的檢測技術,少說也有十幾種。大致可以分為兩類:特異位點的甲基化檢測和全基因組的甲基化分析,后者也稱為甲基化圖譜分析(methylation profiling)。下面大家介紹一些常用的方法。一、特異位點的甲基化檢測1. 甲基化特異性PCR(MS-PCR)這種方法經濟實用,
DNA甲基化檢測技術全攻略
近年來涌現出不少DNA甲基化的檢測技術,少說也有十幾種。大致可以分為兩類:特異位點的甲基化檢測和全基因組的甲基化分析,后者也稱為甲基化圖譜分析(methylation profiling)。下面大家介紹一些常用的方法。一、特異位點的甲基化檢測1. 甲基化特異性PCR(MS-PCR)這種方法經濟實用,
DNA甲基化檢測技術全攻略
近年來涌現出不少 DNA 甲基化的檢測技術,少說也有十幾種。大致可以分為兩類:特異位點的甲基化檢測和全基因組的甲基化分析,后者也稱為甲基化圖譜分析 (methylation profiling)。下面大家介紹一些常用的方法。 特異位點的甲基化檢測 甲基化特異性 PCR (MS-PCR)
熒光定量PCR技術的檢測技術原理
將標記有將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環,并遵守聚合酶鏈反應規律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發下發出熒光,隨著循環次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長,通過實時檢測與之對應的隨
單細胞全基因組擴增技術大比武
2013年,權威技術期刊《Nature Methods》將年度技術授予了單細胞測序。正如社論中所說,每個細胞都是獨一無二的--它占據了獨特的空間位置,它的復制基因組中攜帶了獨特的錯誤。然而,過去以細胞群體為對象的研究只獲得了平均值,而忽略了異質性。目前多種新型分析技術,如NGS,都是為細胞群
RNA測序技術如何繪制全基因組轉錄終止?
近日,南方科技大學生命科學學院翟繼先團隊利用納米孔單分子RNA測序技術繪制了擬南芥全基因組水平轉錄終止圖譜。該方法能同時捕獲包括已轉錄過polyA位點的 readthrough轉錄本、完成3’末端切割的5’或3’切割產物、以及已完成或正在進行多腺苷酸化(polyadenylation)的轉錄本在
OPGEN全基因組圖譜應用系列——鞭蟲全基因組測序
鞭蟲是一種常見的土壤傳播寄生蟲,地理分布廣,感染率高,寄生于人體盲腸,導致人體慢性感染,對人類危害巨大。鞭蟲的全基因組測序研究由著名的桑格研究院(Wellcome Trust Sanger Institute)完成,發表在世界頂級期刊《Nature Genetics》上。該研究通過對2種不同
基因分型定量檢測技術的技術特點
基因芯片技術突出特點是集成化、微型化、自動化,代表了未來分子診斷的發展趨勢。其優點有以下幾個方面:一是高度的靈敏性和準確性;二是快速簡便;三是可同時檢測多種疾病。因此已廣泛應用于DNA序列測定、基因表達譜分析、基因組研究、基因突變檢測及多態性分析、疾病的臨床診斷和預測、藥物研究與開發以及法醫鑒定、工
甲基化msap方法的引物需要篩選嗎
甲基化msap方法的引物需要篩選DNA甲基化是一種表觀遺傳修飾,它是由DNA甲基轉移酶(DNA methyl-transferase,Dnmt)催化S-腺苷甲硫氨酸作為甲基供體,將胞嘧啶轉變為5-甲基胞嘧啶(mC)的一種反應,在真核生物DNA中,5-甲基胞嘧啶是唯一存在的化學性修飾堿基.CG二核苷酸
JAMA:全基因組測序用于臨床仍存在技術挑
據3月12日發表在《美國醫學會雜志》上的一則研究報告披露,在一項有12名成年人參與的探索性研究中,應用全基因組測序(WGS)與不完整的遺傳性疾病基因的覆蓋、檢測具有最高潛在臨床影響的基因變異的低復驗性,以及臨床報告發現的不確定性有關,盡管在某些案例中,WGS會發現基因變異株從而引入早期的醫療干預
基因組DNA甲基化分析方法
早期的基因組DNA甲基化分析技術,如SssI甲基轉移酶分析法、氯乙醛反應法、免疫學抗體技術等,已經不能滿足現代表觀遺傳學研究的需求。今年來常用的基因組甲基化的方法有以下兩種。1. 甲基化敏感擴增多態性實驗甲基化敏感擴增多態性實驗技術被用于檢測雙向型真菌的DNA甲基化,它是在擴增片段長度多態性技術的基
快速可靠的甲基化分析,無需亞硫酸氫鹽轉化
在甲基化分析中,亞硫酸氫鹽轉化通常是必經之路。它將未甲基化的胞嘧啶轉化成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不變,之后再結合PCR、測序等技術分析甲基化狀態。聽上去似乎很簡單,但要想獲得漂亮的結果,卻并非那么容易。轉化效率如何?回收率如何?這都是需要考量和優化的因素。 最近,QIAGEN
新型CUT&RUN技術實現單細胞全基因組定位
在一項新的突破性研究中,來自美國匹茲堡大學和馬薩諸塞大學醫學院的研究人員對一種稱為CUT&RUN(cleavage under targets and release using nuclease)的方法進行改進,使得在使用少量細胞(包括單細胞和單個植入前胚胎)的情形下,它適合用來研究轉錄因子和