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  • 用逐步鹽透析的方法組裝核小體模板實驗

    實驗方法原理 實驗材料 牛胸腺 DNA放射性標記的 DNA純化的天然核心組蛋白試劑、試劑盒 NaClTE 緩沖液儀器、耗材 MWCO 透析管實驗步驟 1. 準備如下的重組混合液:約 8 ug 未標記的超聲破碎的牛胸腺 DNA (作為載體 DNA; 加自 1~2 mg/ml 儲液)200 000~400 000 cpm 單獨標記的 DNA6.4 ug (組蛋白:DNA 為 0.8:1) 或 0.8 ug(組蛋白:DNA 為 1:1) 純化的天然核心組蛋白(H2A/H2B 和 H3/H4)160 ul 5 mol/L NaCl (終濃度 2.0 mol/L)TE 緩沖液,pH 8.0,至 400 ul。2. 室溫 30 min。3. 將重組混合液加入 6000~8000 MWCO 透析袋中。4. 在 1 L 含有 1~2 mol/L NaCl 的 TE 緩沖液,pH 8.0 中透析重組混合物,4℃ 透析 2 h。5. 重組混合液連續......閱讀全文

    用逐步鹽透析的方法組裝核小體模板實驗

    實驗方法原理 實驗材料 牛胸腺 DNA放射性標記的 DNA純化的天然核心組蛋白試劑、試劑盒 NaClTE 緩沖液儀器、耗材 MWCO 透析管實驗步驟 1. 準備如下的重組混合液:約 8 ug 未標記的超聲破碎的牛胸腺 DNA (作為載體 DNA; 加自 1~2 mg/ml 儲液)200 000~40

    用逐步鹽透析的方法組裝核小體模板實驗

    實驗材料牛胸腺 DNA放射性標記的 DNA純化的天然核心組蛋白試劑、試劑盒NaClTE 緩沖液儀器、耗材MWCO 透析管實驗步驟1. 準備如下的重組混合液:約 8 ug 未標記的超聲破碎的牛胸腺 DNA (作為載體 DNA; 加自 1~2 mg/ml 儲液)200 000~400 000 cpm 單

    用梯度鹽透析的方法組裝核小體串實驗

    實驗方法原理 實驗材料 非標記的 G5E4 DNA末端標記的 G5E4 DNA 牛血清白蛋白(BSA)試劑、試劑盒 高鹽緩沖液低鹽緩沖液實驗步驟 1. 準備如下的重組混合液(最后加入組蛋白):約 100 ug/ml 9 份未標記和 1 份末端標記(摩爾數比)的 G5E4 DNA 混合物20 mmol

    用梯度鹽透析的方法組裝核小體串實驗

    實驗材料非標記的 G5E4 DNA末端標記的 G5E4 DNA牛血清白蛋白(BSA)試劑、試劑盒高鹽緩沖液低鹽緩沖液實驗步驟1. 準備如下的重組混合液(最后加入組蛋白):約 100 ug/ml 9 份未標記和 1 份末端標記(摩爾數比)的 G5E4 DNA 混合物20 mmol/L Tris·Cl,

    用梯度鹽析的方法組裝高濃度的單核小體實驗

    實驗材料非標記的高濃度DNA片段核心組蛋白試劑、試劑盒Tr1s·ClDTTEDTAKCl芐脒高鹽緩沖液低鹽緩沖液無鹽緩沖液儀器、耗材兔子泵(Rainin)MWCO 透析管電導計實驗步驟1. 準備如下的重組混合液(最后加入組蛋白):0.7 mg/ml DNA 片段20 mmol/L Tr1s·Cl,

    用梯度鹽析的方法組裝高濃度的單核小體實驗

    實驗方法原理 實驗材料 非標記的高濃度DNA片段核心組蛋白試劑、試劑盒 Tr1s·ClDTTEDTAKCl芐脒高鹽緩沖液低鹽緩沖液無鹽緩沖液儀器、耗材 兔子泵(Rainin)MWCO 透析管電導計實驗步驟 1. 準備如下的重組混合液(最后加入組蛋白):0.7 mg/ml DNA 片段20 mmol/

    核小體的監測方法

    許多不同的技術已被用于檢測AnuA,除了LE細胞試驗以外,還有染色質包被的串珠乳膠凝集試驗,以及免疫沉淀(用天然組織蛋白重組酸萃取的組織部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脫氧核苷蛋白”作抗原研制出一種孵育在1M生理鹽水中的染色質中的預備品,但未得到明確鑒定。后期報道已有更好的方法來鑒定該預

    核小體的監測方法

    許多不同的技術已被用于檢測AnuA,除了LE細胞試驗以外,還有染色質包被的串珠乳膠凝集試驗,以及免疫沉淀(用天然組織蛋白重組酸萃取的組織部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脫氧核苷蛋白”作抗原研制出一種孵育在1M生理鹽水中的染色質中的預備品,但未得到明確鑒定。后期報道已有更好的方法來鑒定該預

    核小體的監測方法

    許多不同的技術已被用于檢測AnuA,除了LE細胞試驗以外,還有染色質包被的串珠乳膠凝集試驗,以及免疫沉淀(用天然組織蛋白重組酸萃取的組織部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脫氧核苷蛋白”作抗原研制出一種孵育在1M生理鹽水中的染色質中的預備品,但未得到明確鑒定。后期報道已有更好的方法來鑒定該預

    關于核小體的實驗研究介紹

      早在1956年為雙螺旋模型提供X衍射證據的Wilkins和另一位科學家Vittorio Luzzati對染色質進行了X衍射研究,發現染色質中具有間隔為10 nm的重復性結構。蛋白質和DNA本身的結構從來不會表現出這種重復性。推測可能是組蛋白和DNA的結合方式迫使DNA折疊或纏繞成具有10 nm周

    核小體的概念

    核小體是由DNA和組蛋白形成的染色質基本結構單位。每個核小體由146bp的DNA纏繞組蛋白八聚體1.75圈形成。核小體核心顆粒之間通過50bp左右的連接DNA相連。H1結合在盤繞在八聚體上的DNA雙鏈開口處,核小體的形狀類似一個扁平的碟子或一個圓柱體,此時DNA的長度壓縮7倍,稱染色質纖維。染色質就

    核小體的構造

    核小體的構造可用圖表示:每一個核小體結合的DNA總量為200bp左右,一般在150~250變化范圍(micrococcal nuclease)輕微消解染色質而得知的。連接兩個核小體的連接DNA?(linker DNA) 是最容易受到這種酶的作用,因此微球菌核酸酶在連接DNA處被切斷,此時每個重復單位

    核小體的原理

    人們接著用化學交聯、高鹽分離組蛋白,以及X衍射等方法進一步研究組蛋白多聚體的結構、排列以及怎樣和DNA結合的,從而建立了核小體模型。1984年Klug和Butler進行了修正。核小體的構造可用圖表示:每一個核小體結合的DNA總量為200bp左右,一般在150~250變化范圍(micrococcal

    關于核小體的簡介

      核小體是由DNA和組蛋白形成的染色質基本結構單位。每個核小體由146bp的DNA纏繞組蛋白八聚體1.75圈形成。核小體核心顆粒之間通過50bp左右的連接DNA相連。H1結合在盤繞在八聚體上的DNA雙鏈開口處,核小體的形狀類似一個扁平的碟子或一個圓柱體,此時DNA的長度壓縮7倍,稱染色質纖維。染色

    核小體的基本特性

    有兩項關于AnuA重要評論表明這種抗體對SLE和DIL具有敏感性和特異性,并且AnuA的存在通常在SLE與腎小球腎炎患者中相聯系。AnuA較抗DNA具有更高的敏感性。如果陰陽性分割點升高,能使抗核小體對狼瘡更加敏感。由于核小體抗原純化技術的改進,提高了AnuA對SLE患者的診斷特異性。研究結果表明,

    核小體裝配的概念

    中文名稱核小體裝配英文名稱nucleosome assembly定  義在核小體裝配因子調節下,由DNA鏈和組蛋白組裝成核小體的過程。裝配先以兩分子H3/H4組蛋白構成的四聚體與DNA結合,再結合上兩分子H2A/H2B組蛋白構成的四聚體,形成核小體核心顆粒,再與H1組蛋白連接形成核小體。應用學科生物

    關于核小體的概述

      核小體是染色質的基本結構單位,由DNA和H1、H2A、H2B、H3和H4等5種組蛋白(histone,H)構成。兩分子的H2A、H2B、H3和H4形成一個組蛋白八聚體,約200 bp的DNA分子盤繞在組蛋白八聚體構成的核心結構外面1.75圈形成了一個核小體的核心顆粒(core particle)

    核小體的原理簡介

      人們接著用化學交聯、高鹽分離組蛋白,以及X衍射等方法進一步研究組蛋白多聚體的結構、排列以及怎樣和DNA結合的,從而建立了核小體模型。1984年Klug和Butler進行了修正。核小體的構造可用圖表示:每一個核小體結合的DNA總量為200bp左右,一般在150~250變化范圍(micrococca

    單聚及二聚核小體的純化實驗

    實驗方法原理 實驗材料 寡聚核小體中等或大的寡聚核小體成分試劑、試劑盒 CaCl2 MgCl2 微球菌核酸酶EDTA甘油梯度緩沖液儀器、耗材 超速離心機聚異質同晶管梯度制備裝置實驗步驟 1. 解凍約 1 ml 寡聚核小體(約 1~2 mg/ml 比較理想),預熱到 30℃。2. 加入 100 mmo

    單聚及二聚核小體的純化實驗

    實驗材料寡聚核小體中等或大的寡聚核小體成分試劑、試劑盒CaCl2MgCl2微球菌核酸酶EDTA甘油梯度緩沖液儀器、耗材超速離心機聚異質同晶管梯度制備裝置實驗步驟1. 解凍約 1 ml 寡聚核小體(約 1~2 mg/ml 比較理想),預熱到 30℃。2. 加入 100 mmol/L CaCl2?至終濃

    單聚及二聚核小體的純化實驗

    實驗材料寡聚核小體中等或大的寡聚核小體成分試劑、試劑盒CaCl2MgCl2微球菌核酸酶EDTA甘油梯度緩沖液儀器、耗材超速離心機聚異質同晶管梯度制備裝置實驗步驟1. 解凍約 1 ml 寡聚核小體(約 1~2 mg/ml 比較理想),預熱到 30℃。2. 加入 100 mmol/L CaCl2?至終濃

    去-H1-的寡聚核小體的離心實驗

    實驗材料精核微球菌核酸酶試劑、試劑盒MSBHSBNaClLSBCaCl2EGTA無蔗糖的 HSBSDS透析緩沖液儀器、耗材勻漿器冷凍超速離心機MWCO 透析袋梯度制備裝置(用于離心)針頭管子實驗步驟1. 用 40 ml MSB 重懸約 2 ml 精核。4℃,10 000 g 離心 10 min(用

    核小體核心顆粒的定義

    中文名稱核小體核心顆粒英文名稱nucleosome core particle定  義由長度為146 bp的DNA區段與各兩分子的H3/H4/H2A/H2B組蛋白八聚體組成。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)

    核小體的臨床意義

    抗核小體抗體比抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體更早出現于系統性紅斑狼瘡的早期,并且特異性較高。陽性率為50-90%,特異性>98%。每個核小體單位包括200bp左右的DNA超螺旋和一個組蛋白八聚體及一個分子H1;組蛋白八聚體構成核小體的盤狀核心結構;146bp的DNA分子超螺旋盤繞組蛋白八聚體1.75

    核小體的臨床意義

    抗核小體抗體比抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體更早出現于系統性紅斑狼瘡的早期,并且特異性較高。陽性率為50-90%,特異性>98%。每個核小體單位包括200bp左右的DNA超螺旋和一個組蛋白八聚體及一個分子H1;組蛋白八聚體構成核小體的盤狀核心結構;146bp的DNA分子超螺旋盤繞組蛋白八聚體1.75

    核小體的臨床意義

    抗核小體抗體比抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體更早出現于系統性紅斑狼瘡的早期,并且特異性較高。陽性率為50-90%,特異性>98%。每個核小體單位包括200bp左右的DNA超螺旋和一個組蛋白八聚體及一個分子H1;組蛋白八聚體構成核小體的盤狀核心結構;146bp的DNA分子超螺旋盤繞組蛋白八聚體1.75

    核小體的結構及功能

    核小體是由DNA和組蛋白形成的染色質基本結構單位。每個核小體由146bp的DNA纏繞組蛋白八聚體1.75圈形成。核小體核心顆粒之間通過50bp左右的連接DNA相連。H1結合在盤繞在八聚體上的DNA雙鏈開口處,核小體的形狀類似一個扁平的碟子或一個圓柱體,此時DNA的長度壓縮7倍,稱染色質纖維。染色質就

    核小體的模型形成原理

    人們接著用化學交聯、高鹽分離組蛋白,以及X衍射等方法進一步研究組蛋白多聚體的結構、排列以及怎樣和DNA結合的,從而建立了核小體模型。1984年Klug和Butler進行了修正。核小體的構造可用圖表示:每一個核小體結合的DNA總量為200bp左右,一般在150~250變化范圍(micrococcal

    核小體的臨床意義

    抗核小體抗體比抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體更早出現于系統性紅斑狼瘡的早期,并且特異性較高。陽性率為50-90%,特異性>98%。每個核小體單位包括200bp左右的DNA超螺旋和一個組蛋白八聚體及一個分子H1;組蛋白八聚體構成核小體的盤狀核心結構;146bp的DNA分子超螺旋盤繞組蛋白八聚體1.75

    核小體的臨床意義

    抗核小體抗體比抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體更早出現于系統性紅斑狼瘡的早期,并且特異性較高。陽性率為50-90%,特異性>98%。每個核小體單位包括200bp左右的DNA超螺旋和一個組蛋白八聚體及一個分子H1;組蛋白八聚體構成核小體的盤狀核心結構;146bp的DNA分子超螺旋盤繞組蛋白八聚體1.75

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