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  • 細胞技術專題:腫瘤細胞原代培養實驗

    腫瘤細胞原代培養可以:(1)研究癌變機理;(2)研究抗癌藥檢測;(3)研究癌分子生物學;(4)用于闡明和解決癌癥。詳細 實驗方法實驗方法原理腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血清濃度即可,在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)以利細胞生長。用細胞生長因子如胰島素、氫化可的松、雌激素等等。也可以考慮動物媒介培養。根據細胞種類不同選用不同的促細胞生長因子。 實驗材料瘤組織 試劑、試劑盒Hanks液 儀器、耗材平皿 培養瓶 恒溫箱 實驗步驟一、將取得的瘤組織去除脂肪、結締組織及壞死部分。二、在平皿中用Hanks液洗3次,剪碎組織,切成1-2 mm3 小塊。三、接種于培養瓶(或皿)中,37℃、5%CO2 或加蓋并塞在普通恒溫箱中培養。 展開 其他一、對腫瘤細胞系或細胞株的評價 已建成的各種腫瘤細胞系或細胞株,無疑都是可用的實驗......閱讀全文

    細胞技術專題:腫瘤細胞原代培養實驗

    腫瘤細胞原代培養可以:(1)研究癌變機理;(2)研究抗癌藥檢測;(3)研究癌分子生物學;(4)用于闡明和解決癌癥。詳細 實驗方法實驗方法原理腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血清濃度即可,在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物,或原患者血清

    細胞技術專題:大鼠肝星狀細胞原代培養實驗

    大鼠肝星狀細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法胰酶消化法 實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。 實驗材料SD大鼠 試劑、試劑盒戊巴比妥鈉

    腫瘤細胞原代培養實驗

    組織塊法 酶消化法 脫落細胞法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血

    腫瘤細胞原代培養實驗

    組織塊法 酶消化法 脫落細胞法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血

    腫瘤細胞原代培養實驗

      實驗方法原理  腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血清濃度即可,在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)以利細胞生長。用細胞生長因子如胰島素、氫化可的松、雌激素等等。也可以考慮動物媒介培養。根據細胞種類不同選用

    細胞技術專題:原代胚胎成纖維細胞培養

    實驗器材手術小直剪刀三把、眼科直鑷子三把、眼科彎鑷子兩把、玻璃平 皿三套、200目尼龍濾網、50ML、15ML離心管和手術刀片。以上物品均需要高壓滅菌消毒處理。實驗試劑無Ca2+和Mg2+的 PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纖維細胞(MEF)生長培養基:高糖DMEM

    腫瘤細胞原代培養實驗——脫落細胞法

    實驗方法原理脫落細胞法是指采集人體各部位,特別是管腔器官表面的脫落細胞進行培養。實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒完全培養基洗滌液儀器、耗材刀片培養箱培養皿實驗步驟一、將新鮮的腫瘤組織去除脂肪和結締組織。二、洗液洗2次后,用刀片將腫瘤組織切成細薄片。三、在切割的同時有許多上皮細胞脫落下來,脫落細胞經洗滌后

    細胞技術專題:大鼠腦微血管內皮細胞原代培養實驗-二

    ?三、 腦微血管段的分離與腦微血管內皮細胞原代培養 ?1. ?大鼠頸椎脫臼處死后浸泡于75%乙醇中消毒3~5 min后斷頭置于玻璃培養皿中,打開顱腔后取出全腦置于盛有冷D-Hanks'液的玻璃培養皿中解剖去除小腦、間腦(包括海馬)。2. ?隨后將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以吸除軟腦膜及腦膜大

    細胞技術專題:大鼠腦微血管內皮細胞原代培養實驗-三

    ?3. ?免疫組化鑒定?Ⅷ因子相關抗原免疫組化檢測可見培養的腦微血管內皮細胞的胞漿及核周有棕黃色著色,胞核呈空泡狀結構;對照染色為陰性。?收起? 其他一、實驗討論我們采用兩次酶消化、梯度離心分離得到腦微血管段,探索各種不同的培養條件,成功地進行了較純的大鼠腦微血管內皮細胞的原代培養,內皮細胞純度可

    細胞技術專題:大鼠腦微血管內皮細胞原代培養實驗-一

    大鼠腦微血管內皮細胞原代培養可以:(1)應用于血腦屏障的研究;(2)腦血管疾病的病理生理及分子生物學研究;(3)新藥篩選;(4)腦微血管內皮細胞生理生化及藥理學研究。實驗方法酶消化法 實驗方法原理丁香園站友參考文獻采用以大腦皮質為材料、酶消化及梯度離心分離腦微血管段并進行原代培養,,成功地摸索出大鼠

    腫瘤細胞原代培養實驗——組織塊法

    腫瘤細胞原代培養可以:(1)研究癌變機理;(2)研究抗癌藥檢測;(3)研究癌分子生物學;(4)用于闡明和解決癌癥。實驗方法原理腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血清濃度即可,在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)

    腫瘤細胞原代培養實驗——酶消化法

    實驗方法原理本法是利用成纖維細胞對膠原酶較為敏感的特點,通過消化進行選擇。可用0.5mg/ml的膠原酶消化處理,邊消化邊在倒置顯微鏡下窺視,當發現成纖維細胞被除掉后,即終止消化;用Hanks洗滌處理一次后,更換新培養液,繼續培養,可獲純凈腫瘤細胞。如成纖維細胞未被除凈,可再次重復。實驗材料組織試劑、

    原代腫瘤細胞選擇性培養:匯合飼養層腫瘤細胞篩選實驗

    實驗方法原理在指數生長中期,用絲裂霉素C處理飼養層細胞,將細胞培養形成匯合的單層。通過膠原蛋白酶消化從活檢標本分離腫瘤細胞,或者用胰蛋白酶消化從原代培養物獲得腫瘤細胞,然后將腫瘤細胞接種到匯合的單層上(圖24.1)。上皮性腫瘤細胞可以在3周至3個月內形成克隆。纖維肉瘤和神經膠質瘤并不總是形成克隆,而

    細胞技術專題:大鼠肝星狀細胞培養實驗

    實驗方法細胞培養技術 實驗方法原理選用Wistar大鼠經消化酶灌注肝臟后,用分離液分離HSC,通過觀察其自發熒光及其顯著特征性結構的脂肪染色、細胞免疫化學染色等方法鑒定。 實驗材料雄性 SD 大鼠 試劑、試劑盒戊巴比妥鈉 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HB

    細胞技術專題:小鼠腹腔巨噬細胞培養實驗

    小鼠腹腔巨噬細胞培可以:(1)吞噬與清除異物;(2)分泌生物活性物質;(3)對仿生全降解材料,降解后的無機產物與生命過程中有機物的合成作用。實驗方法細胞培養技術實驗方法原理取小鼠腹腔巨噬細胞與乳膠顆粒在不同培養條件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2?培養箱中孵育后,熒光顯微鏡下計數吞噬

    細胞原代培養實驗

    細胞原代培養可以:(1)為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段;(2)為傳代培養創造條件;(3)服務于臨床實踐,用于藥物篩選等。實驗方法胰酶消化法組織塊直接培養法實驗方法原理將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合

    細胞原代培養實驗

    胰酶消化法 組織塊直接培養法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成

    細胞原代培養實驗

    胰酶消化法 組織塊直接培養法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成

    腫瘤細胞的原代培養方法

    腫瘤細胞對培養基的要求不如正常細胞嚴格,一般常用RPMI、DMEM、McCoy-5A等培養基,血清濃度不高,10%即可,建議最好在原代培養時能加入生長因子或原患者血清(1%-2%)以利細胞生長。培養方法很多,主要有組織塊法、酶消化法、鉭網法、脫落細胞法等。1.組織塊法將取得的瘤組織去除脂肪、結締組織

    細胞技術專題:細胞傳代實驗

    根據細胞生長的恃點,傳代方法有3種:懸浮生長細胞傳代、半懸浮生長細胞傳代(Hela細胞)、貼壁生長細胞傳代。實驗方法細胞培養技術 消化法 實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代

    細胞技術專題:大鼠星型膠質細胞培養實驗

    大鼠星型膠質細胞培養可以:(1)用于神經系統發育、分化及再生等基礎研究;(2)腦缺血預處理上調神經保護蛋白的機制研究;(3)腦損傷和腦疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。 ?實驗方法酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 實驗材料大鼠胚胎 試劑、試劑盒L-15培養基 膠原酶 Dnase D-MEM-B

    原代細胞培養之——培養技術

    原代細胞的培養也叫初代培養?是從供體取得組織細胞在體外進行的首次培養,是建立細胞系的第一步,是一項基本技術。原代細胞因剛從組織中分離開,生物學特性未發生很大變化,仍保留原來的遺傳特性,也最接近和反映體內生長特性,適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。 原代細胞往往有多種細胞組成,比較混雜,即使

    新生大鼠心肌細胞原代培養實驗——原代培養技術

    新生大鼠心肌細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于細胞形態研究;(3)應用于臨床研究。實驗方法原理將大鼠的心肌細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料SD 乳鼠試劑、試劑盒低糖 DMEM、胰酶EDTA青鏈

    細胞的原代培養實驗

    實驗方法原理 細胞培養(Cell culture)是模擬機體內生理條件,將細胞從機體中取出,在人工條件下使其生存、生長、繁殖和傳代,進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。近年來,廣泛地應用于分子生物學、遺傳學、免疫學、腫瘤學、細胞工程等領域,發展成一種重要生物技術,并取得顯著成就

    細胞的原代培養實驗

    實驗方法原理原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養,由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養創造條件。最常用的原代培養有組織塊培養和分散細胞培養。組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上,加入

    細胞的原代培養實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養,由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養創造條件。最常用的原代培養有組織塊培養和分散

    細胞的原代培養實驗

    原代培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養,由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生

    原代細胞培養技術分類

    一、組織塊直接培養法1、取材,用Hank's液洗滌三次,并剔除脂肪,結締組織,血液等雜物。2、用手術剪將組織剪切成1mm3左右的小塊,再用Hank's液洗三次。3、將組織塊轉移至培養瓶,并貼附于瓶底面。4、輕輕將培養瓶翻轉,瓶底朝上,向瓶內注入適量的培養液,將培養瓶放置在37℃恒溫箱

    細胞技術專題:細胞生長曲線實驗

    細胞生長曲線是測定細胞絕對生長數的常用方法,是判定細胞活力的重要指標。一般細胞傳代之后,經過短暫的懸浮然后貼壁,隨后度過長短不同的潛伏期,即進入大量分裂的指數生長期。為了準確描述整個過程中細胞數目的動態變化,典型的生長曲線可分為生長緩慢的潛伏期,斜率較大的指數生長期,呈平臺狀的平頂期及退化衰亡4個部

    原代細胞培養之——細胞分離技術(一)

    原代細胞的分離和制作人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密,不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖,即使采用1mm3的組織塊,也只有少量處于周邊的細胞可能生存和生長,若需獲取大量細胞,必須將現有的組織塊充分散開,使細胞解離出來,常采用的方法如下: 一、懸浮細胞的分離方法 組織材料若來自血液、羊水

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