293A（人胚腎細胞）復蘇、傳代和凍存方案【通過STR鑒定】
293A（人胚腎細胞）【通過STR鑒定】規格：1×10?cells/T25培養瓶細胞名稱293A （人胚腎細胞）種屬人年齡（性別）胎兒 組織來源腎生長特性貼壁細胞形態上皮細胞樣生長培養基DMEM高糖＋10% FBS＋1% P/S培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃一、復蘇 把凍存管從液氮中取出來，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動。液體都融化后（大概1-1.5分鐘），拿出來噴點酒精放到超凈工作臺里。2. 把上述細胞懸液吸到裝10ml培養基的15ml的離心管中（用培養基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細胞都洗下來），1000轉離心5分鐘。3. 把上清液倒掉，加1ml培養基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養基的10cm培養皿中前后左右輕輕搖動，使培養皿中的細胞均勻分布。4. 標好細胞種類和日期、培養人名字等，放到CO2培養箱中培養，細胞貼壁后換培養基。5. 3天......閱讀全文
293A（人胚腎細胞）復蘇、傳代和凍存方案【通過STR鑒定】
293A（人胚腎細胞）【通過STR鑒定】規格：1×10?cells/T25培養瓶細胞名稱293A （人胚腎細胞）種屬人年齡（性別）胎兒?組織來源腎生長特性貼壁細胞形態上皮細胞樣生長培養基DMEM高糖＋10% FBS＋1% P/S培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃一、復蘇?把凍存管從
LX2（人肝星狀細胞）復蘇、傳代和凍存方案【通過STR鑒定】
LX-2（人肝星狀細胞）【通過STR鑒定】規格：1×10?cells/T25培養瓶細胞名稱LX-2（人肝星形細胞）種屬人生長特性貼壁細胞形態上皮細胞樣生長培養基DMEM高糖＋10% FBS＋1% P/S培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃一、復蘇?把凍存管從液氮中取出來，立即投入37
hESCs傳代、凍存及復蘇
實驗概要hESCs傳代、凍存及復蘇主要試劑KODMEM、0.25%Trypsin、1 mg/mL膠原酶Ⅳ或者Dispase、0.1%明膠、細胞基礎培養液、hESCs培養液、凍存液C主要設備2 mL移液管、5 mL移液管、10 mL移液管、15 mL移液管、25 mL移液管、15 mL離心管、50 m
monESCs傳代、凍存及復蘇
實驗概要monESCs傳代、凍存及復蘇主要試劑DMEM/F12培養液、monESCs培養液、凍存液C、1 mg/mL膠原酶Ⅳ主要設備15 mL離心管，5 mL、10 mL移液管，凍存管、6孔培養板、倒置顯微鏡實驗步驟傳代前一天首先準備好MEF飼養層細胞，飼養層細胞要求密度為1.2×104～1.5×1
細胞原代培養、傳代培養、凍存和復蘇
實驗原理 細胞培養可分為原代培養和傳代培養。直接從體內獲取的組織細胞進行首次培養為原代培養；當原代培養的細胞增殖達到一定密度后，則需要做再培養， 即將培養的細胞分散后，從一個容器以1：2或其他比率轉移到另一個或幾個容器中擴大培養，為傳代培養，傳代培養的累積次數就是細胞的代數。 細胞凍存及復蘇
細胞株的培養、傳代、凍存與復蘇
1）細胞株的培養和傳代 培養： 用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10％小牛血清和抗生素的培養液中，培養細胞因子依賴細胞株還有加入適量細胞因子。在37℃ 5％ CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養，3～4天傳代一次。 懸浮生長細胞的傳代： 直接吸去或離心后吸去培養上清液，用新鮮培養
細胞的凍存和復蘇
細胞凍存和復蘇細胞凍存后可保存種子細胞，以便隨時取用；減少細胞被微生物污染的危險性；減少細胞之間交叉污染的危險性；減少細胞因傳代培養而引起的遺傳變異和形態改變；避免有限細胞系出現衰老或惡性轉化。凍存細胞前，應對細胞進行鑒定并檢查是否被污染。細胞凍存及復蘇的基本原則是“慢凍快融”，這樣可以最大限度的保
細胞凍存和復蘇實驗
細胞凍存和復蘇可以：（1）用于生物學保種；（2）用于醫學上干細胞研究；（3）用于傳代培養。實驗方法原理細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減
細胞凍存和復蘇實驗
細胞凍存和復蘇 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種
細胞的凍存和復蘇
細胞凍存和復蘇 細胞凍存后可保存種子細胞，以便隨時取用；減少細胞被微生物污染的危險性；減少細胞之間交叉污染的危險性；減少細胞因傳代培養而引起的遺傳變異和形態改變；避免有限細胞系出現衰老或惡性轉化。凍存細胞前，應對細胞進行鑒定并檢查是否被污染。 細胞凍存及復蘇的基本原則是“慢凍快融”，
細胞凍存和復蘇實驗
細胞凍存和復蘇 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種
細胞的凍存和復蘇
一、原理在不加任何條件下直接凍存細胞時，細胞內和外環境中的水都會形成冰晶，能導致細胞內發生機械損傷、電解質升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等，能引起細胞死亡。如向培養液加入保護劑，可使冰點降低。在緩慢的凍結條件下，能使細胞內水份在凍結前透出細胞。貯存在－130℃以下的低溫中能減少冰晶的形成
細胞培養(換液/傳代/凍存/復蘇)操作說明
所需試劑細胞完全培養基：★ 推薦使用海星生物細胞配套專用培養基1. 細胞處理后的第二天，在顯微鏡下觀察細胞狀態，如死細胞較多且細胞密度較低，需要進行換液操作。? （1）懸浮細胞請在高倍鏡下觀察，一般而言，活細胞輪廓圓潤、界限清晰、透明度大、折光性強。如細胞活率較高，則繼續正常培養。? （2）貼壁細胞
細胞凍存和復蘇要點詳解
細胞凍存和復蘇?細胞凍存及復蘇的基本原則是“慢凍快融”，這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多用二甲基亞砜（DMSO）作為保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性；緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少冰晶對細胞的物理損傷。復蘇細胞采用快速融化的方法可以保證細胞
體外細胞的原代培養、傳代培養、凍存和復蘇
一、實驗原理細胞培養可分為原代培養和傳代培養。直接從體內獲取的組織細胞進行首次培養為原代培養；當原代培養的細胞增殖達到一定密度后，則需要做再培養， 即將培養的細胞分散后，從一個容器以1：2或其他比率轉移到另一個或幾個容器中擴大培養，為傳代培養，傳代培養的累積次數就是細胞的代數。細胞凍存及復蘇的基
體外細胞的原代培養、傳代培養、凍存和復蘇
一、實驗原理細胞培養可分為原代培養和傳代培養。直接從體內獲取的組織細胞進行首次培養為原代培養；當原代培養的細胞增殖達到一定密度后，則需要做再培養， 即將培養的細胞分散后，從一個容器以1：2或其他比率轉移到另一個或幾個容器中擴大培養，為傳代培養，傳代培養的累積次數就是細胞的代數。細胞凍存及復蘇的基本原
體外細胞的原代培養、傳代培養、凍存和復蘇
一、實驗原理細胞培養可分為原代培養和傳代培養。直接從體內獲取的組織細胞進行首次培養為原代培養；當原代培養的細胞增殖達到一定密度后，則需要做再培養， 即將培養的細胞分散后，從一個容器以1：2或其他比率轉移到另一個或幾個容器中擴大培養，為傳代培養，傳代培養的累積次數就是細胞的代數。細胞凍存及復蘇的基
凍存細胞的復蘇
實驗方法原理 凍存細胞應在流水中快速融化并加入生長培養液。實驗者應配戴護目鏡和手套，因為曾浸沒在液氮中的凍存管中可能漏人液氮，而當融化凍存液時凍存管中的氣體溫度上升可導致爆炸。實驗步驟 1) 調整水龍頭溫度為 40°C，在龍頭下放置一廣口燒杯。2) 從液氮中取出凍存細胞的凍存管。3) 將凍存管置于
復蘇凍存細胞實驗
方案20.2 復蘇凍存細胞實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 快速復蘇細胞，緩慢稀釋，以高細胞密度重新接種（圖20.9）。
復蘇凍存細胞實驗
實驗方法原理快速復蘇細胞，緩慢稀釋，以高細胞密度重新接種（圖20.9）。實驗步驟材料無菌培養瓶（如果需要離心時）生長培養基吸量管，1ml，10ml注射器和19號針頭（如果你使用玻璃凍存管）非滅菌保護性手套和面罩37℃無菌水，10cm深，盛于清潔、用乙醇擦拭過的帶蓋的水桶中鑷子70%乙醇棉簽1%萘黑（
細胞凍存與復蘇
細胞凍存1. 實驗前準備：細胞室及工作臺紫外線照射15min；培養液、PBS、胰酶、小牛血清、DMSO、恒溫水浴箱37℃預熱備用；收集對數生長期細胞，在凍存前一天最好換液2．用吸管吸出培養瓶中的細胞培養液，PBS清洗2遍吸出沖洗液，加入適量胰蛋白酶消化。3. 適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養液。吸管
凍存細胞的復蘇
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 凍存細胞應在流水中快速融化并加入生長培養液。實驗者應配戴護目鏡和手套，因為曾浸沒在液氮中的凍存管中可能漏人液氮，而當融化凍存液時凍存管中的氣體溫度上升可導致爆炸。 實驗材料
凍存細胞的復蘇
凍存細胞的復蘇可以用于：（1）在細胞的實驗操作中，凍存的細胞要進行復蘇，再培養傳代。（2）持久地保留細胞系實驗方法原理凍存細胞應在流水中快速融化并加入生長培養液。實驗者應配戴護目鏡和手套，因為曾浸沒在液氮中的凍存管中可能漏人液氮，而當融化凍存液時凍存管中的氣體溫度上升可導致爆炸。實驗材料凍存細胞試劑
HSC凍存和復蘇
實驗概要HSC凍存和復蘇主要試劑HSCs培養液、FBS、凍存液B主要設備15 mL離心管、凍存管、鑷子、離心機，超凈臺，體視鏡，倒置顯微鏡，CO2培養箱，-80℃冰箱，液氮儲存柜實驗步驟（1）細胞凍存：① 凍存細胞時，最好提前兩個小時給HSCs半定量加新鮮HSCs培養液。② 準備凍存液并放到冰上預冷
人胚腎細胞293A細胞培養的基本技術（三）無菌操作
? ? ???三、無菌操作? ? 無菌操作是防止污染、決定培養是否成功的首要條件。由于體外培養細胞缺乏抗感染能力，在一切操作中要努力做到z大限度的無菌。工作前對手部需清洗消毒，進無菌操作室時戴K罩和穿工作服。不能用手直接觸及已消毒器皿內部。打開培養瓶前或封閉瓶口前須火焰燒灼瓶口等。
細胞凍存和復蘇的步驟介紹
細胞凍存步驟：細胞復蘇步驟：
體外細胞的原代培養、傳代培養、凍存和復蘇2
（4）復蘇： 1.取出冷凍管，立即放入37℃水浴箱中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，移入無菌操作臺內。 2.打開凍存管，將細胞懸液吸到離心管中。 3.1000rpm離心10分鐘，棄去上清液。 4.加適當培養液后將細胞轉移至培養瓶中，37℃培養，第二天觀察生長情況。 三、實驗結果
體外細胞的原代培養、傳代培養、凍存和復蘇2
一、實驗原理細胞培養可分為原代培養和傳代培養。直接從體內獲取的組織細胞進行培養為原代培養；當原代培養的細胞增殖達到一定密度后，則需要做再培養， 即將培養的細胞分散后，從一個容器以1：2或其他比率轉移到另一個或幾個容器中擴大培養，為傳代培養，傳代培養的累積次數就是細胞的代數。細胞凍存及復蘇的基本原則是
體外細胞的原代培養、傳代培養、凍存和復蘇1
一、實驗原理 細胞培養可分為原代培養和傳代培養。直接從體內獲取的組織細胞進行首次培養為原代培養；當原代培養的細胞增殖達到一定密度后，則需要做再培養， 即將培養的細胞分散后，從一個容器以1：2或其他比率轉移到另一個或幾個容器中擴大培養，為傳代培養，傳代培養的累積次數就是細胞的代數。 細胞凍存及
【干貨】細胞凍存與復蘇
很多時候，我們需要把細胞冷凍起來，以便于長期保存，以備不時之需。而復蘇，就是使冷凍的細胞蘇醒過來，恢復活力。 其實，細胞凍存和復蘇的protocol教科書和實驗手冊上面都有，毛博我不想再重復了。這里，毛博根據自己做細胞培養近10年的經驗和體會，談談應該注意的一些事項和技巧。大部分都是血淚教訓和