親和色譜法簡介
一、基本理論（一）原理：在生物體內，許多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有與某些相對應的專一分子可逆結合的特性。例如抗原和抗體、酶和底物及輔酶、激素和受體、RNA和其互補的DNA等，都具有這種特性。生物分子之間這種特異的結合能力稱為親和力，根據生物分子間親和吸附和解離的原理，建立起來的色譜法稱親色譜法。親和色譜中兩個進行專一結合的分子互稱對方為配基。如抗原和抗體，抗原可認為是抗體的配基，反之抗體也可認為是抗原的配基。將一個水溶性配基在不傷害其生物學功能的情況下與水不溶性載體結合稱為配基的固相化。親和色譜法的基本過程是： 1.配基固相化。將與純化對象有專一結合作用的物質，連接在水不溶性載體上，制成親和吸附劑后裝柱（稱親和性）。 2.親和吸附。將含有純化對象的混合物通過親和柱，純化對象吸附在柱上，其他物質流出色譜柱。 3.解吸附。用某種緩沖液或溶液通過親和柱，把吸附在親和柱上的欲純化物質洗脫出來。（二......閱讀全文
親和色譜法
一、基本理論（一）原理 在生物體內，許多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有與某些相對應的專一分子可逆結合的特性。例如抗原和抗體、酶和底物及輔酶、激素和受體、RNA和其互補的DNA等，都具有這種特性。生物分子之間這種特異的結合能力稱為親和力，根據生物分子間親和吸附和解離的原理，建立起來的
親和色譜法
親和色譜法（ affinity chromatography），將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相，利用與固定相不同程度的親和性，使成分與雜質分離的色譜法。中文名：親和色譜法外文名：affinity chromatography所屬學科：生物應用領域：實驗例如利用酶與基質（或抑制劑）
親和色譜法
親和色譜法（ affinity chromatography），將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相，利用與固定相不同程度的親和性，使成分與雜質分離的色譜法。
親和色譜法簡介
一、基本理論（一）原理：在生物體內，許多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有與某些相對應的專一分子可逆結合的特性。例如抗原和抗體、酶和底物及輔酶、激素和受體、RNA和其互補的DNA等，都具有這種特性。生物分子之間這種特異的結合能力稱為親和力，根據生物分子間親和吸附和解離的原理，建立
親和色譜法原理
在生物體內，許多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有與某些相對應的專一分子可逆結合的特性。例如抗原和抗體、酶和底物及輔酶、激素和受體、RNA和其互補的DNA等，都具有這種特性。生物分子之間這種特異的結合能力稱為親和力，根據生物分子間親和吸附和解離的原理，建立起來的色譜法稱親色譜法。親和色譜
什么是親和色譜法？
親和色譜法（ affinity chromatography），將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相，利用與固定相不同程度的親和性，使成分與雜質分離的色譜法。
親和色譜法（affinity－chromatograph）
一、基本理論（一）原理：在生物體內，許多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有與某些相對應的專一分子可逆結合的特性。例如抗原和抗體、酶和底物及輔酶、激素和受體、RNA和其互補的DNA等，都具有這種特性。生物分子之間這種特異的結合能力稱為親和力，根據生物分子間親和吸附和解離的原理，建立起來的色
常用色譜法介紹親和色譜法
親和色譜法（ affinity chromatography），將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相，利用與固定相不同程度的親和性，使成分與雜質分離的色譜法。
親和色譜法的適應范圍
可用于分離活體高分子物質、過濾性病毒及細胞。或用于對特異的相互作用進行研究。
親和色譜法的技術特點
親和色譜法（ affinity chromatography），將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相，利用與固定相不同程度的親和性，使成分與雜質分離的色譜法。
親和色譜法條件的選擇
親和色譜法一般采用柱層析法,要達到好的分離效果,必需選擇好操作條件。①吸附? 親和柱所用的平衡緩沖液的組成、pH值和離子強度都應選擇最有利于配基與生物大分子形成復合物。吸附時,一般在中性條件下,上柱樣品液應和親和柱平衡緩沖液一樣,上柱前樣品應對平衡緩沖液進行充分透析,這有利于絡合物的形成。親和吸附常
親和色譜法的技術簡介
親和色譜法（ affinity chromatography），將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相，利用與固定相不同程度的親和性，使成分與雜質分離的色譜法。
親和色譜法的技術簡介
利用酶與基質（或抑制劑）、抗原與抗體，激素與受體、外源凝集素與多糖類及核酸的堿基對等之間的專一的相互作用，使相互作用物質之一方與不溶性擔體形成共價結合化合物，用來作為層析用固定相，將另一方從復雜的混合物中選擇可逆地截獲，達到純化的目的。
親和色譜法的適應范圍
可用于分離活體高分子物質、過濾性病毒及細胞。或用于對特異的相互作用進行研究。
親和色譜法載體的選擇
用于親和色譜法的理想載體應非特異性吸附要盡可能小,對其他大分子物質的作用很微弱;必須具有多孔的網狀結構,能使大分子自由通過而增加配基的有效濃度;必須具有相當量的化學基團可供活化,并在溫和條件下能與大量的配基連接;具有良好的機械性能;在較寬的pH值、離子強度和變性劑濃度范圍內具有化學和機械穩定性;高度
免疫親和色譜法－技術的應用
1)免疫萃取(innunoextraction)IAC 技術最簡單的應用就是單純作為樣品的預處理手段,即制備免疫親和柱,也稱為離線(off-line)IAC。現在市場上已有克倫特羅、黃曲霉毒素等多種免疫親和柱出售,使用效果非常好。2)IAC 聯用技術IAC 聯用技術也可稱為在線 IAC。將 IAC
免疫親和色譜法的相關介紹
動物性食品中獸藥殘留水平是食品安全檢驗的重要內容。獸藥殘留超標不僅給公眾健康帶來嚴重危害,也影響動物性食品的進出口貿易,世界各國都高度重視。由于藥物殘留檢測屬于復雜混合物中的痕量有機物質分析,且分析量大,因此非常需要采用有效、快捷、普及的凈化方法。免疫親和色譜(immunoaffinity chro
免疫親和色譜法的技術原理
IAC 是一種利用抗原抗體特異性可逆結合特性的 SPE 技術,根據抗原抗體的特異性親和作用,從復雜的待測樣品中捕獲目標化合物。其原理是將抗體與惰性微珠共價結合,然后裝柱,將含抗原的溶液過免疫親和柱,抗原與固定了的抗體結合,而非目標化合物則沿柱流下,最后用洗脫緩沖液洗脫抗原,從而得到純化的抗原。用適當
親和色譜法配基與載體的結合
配基要結合到載體上,首先要活化載體上的功能基團,再將配基連接到活化基團上。此偶聯反應必須在溫和條件下進行,不致使配基和載體遭到破壞;且偶聯后要反復洗滌載體,以除去殘存的未偶聯的配基,還要測定偶聯的配基的量。最常用的載體是瓊脂糖4B(Sepharose4B)。把瓊脂糖與溴化氰在pH值為11條件下進行處
親和色譜法的基本原理
親和色譜法是利用生物分子間所具有的專一親和力而設計的層析技術。首先將載體在堿性條件下用溴化氰(CNBr)活化,再用化學方法將能與生物分子進行可逆性結合的物質(稱為配基結合到某種活化固相載體上此過程稱為偶聯反應。將偶聯反應得到的親和吸附劑裝入層析柱中而形成親和柱,溶液樣品通過親和柱時,生物大分子和親和
免疫親和色譜法－效率的關鍵影響因素
IAC 作用的基礎是色譜法與抗原抗體的可逆反應平衡相結合的理論,遵循經典的 Scatchard方程。因此,影響 IAC 效率的因素有很多。①柱容量:免疫親和柱常用的柱床體積為1mL。其高效特異性保留能力,使之能在較小的柱容量或柱床體積下完成凈化過程,減少了非特異性吸附并節省了昂貴的柱材和抗體。另外,
高效親和色譜法測定血漿蛋白結合率
高效親和色譜法用于測定藥物與血漿蛋白的結合，可由藥物的遷移變化率的連續變化計算出藥物與蛋白的結合常數。色譜系統良好的精密度和重現性可提供大量結合作用的對比研究，并易于與MS等技術聯用。該方法允許多種藥物同時進樣，并可同時測定多種藥物與蛋白的結合常數，對立體選擇性蛋白結合的研究非常有用。 高效親
根據配體特異性的分離方法－親和色譜法
親和層析法（aflinity chromatography）是分離蛋白質的一種極為有效的方法，它經常只需經過一步處理即可使某種待提純的蛋白質從很復雜的蛋白質混合物中分離出來，而且純度很高。這種方法是根據某些蛋白質與另一種稱為配體(Ligand）的分子能特異而非共價地結合。其基本原理：蛋白質在組織或細
實驗室分析方法親和色譜法概念介紹
親和色譜法（affinity chromatography）用連接在基體上的配位體作為固定相,使與蛋白質或其他大分子發生可逆的高選擇性的相互作用,利用不同親和力進行分離的液相色譜法。
實驗室分析方法親和色譜法原理及發展
親和色譜(AFC)作為一種特異性分離技術,基于生物分子的活性特征,以其極高的選擇性不可替代地被應用于復雜生物體系中特定組分的分離。一、原理與色譜柱推薦親和色譜基于生物分子固有的特異性相互作用進行樣品的高選擇性分離。特異性相互作用包括醇能與底物、抑制物、輔酶等的結合:;抗體與抗原的結合:凝集素與細胞表
蛋白質純化技術—親和色譜法的基本信息介紹
許多生物大分子物質具有與其結構相對應的專一分子發生可逆性結合的特征，如酶與底物及輔助因子、酶與抑制劑、抗原與抗體、激素與受體、核酸片段與其互補的核酸序列、生物素與親合素等，分子間的這種結合能力叫作親和力。 親和色譜（affinity chromatography）是利用生物大分子間所具有的特異
色譜分析技術（高壓液相色譜、親和色譜法和吸...（一）
色譜分析技術（高壓液相色譜、親和色譜法和吸附色譜法）高壓液相色譜Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色譜的設想，然而直到六十年代后期，由于各種技術的發展，高效液相色譜才付諸實現。這種色譜技術曾被稱為高速液相色譜（HighSpeed Liquid Chromatography）
色譜分析技術（高壓液相色譜、親和色譜法和吸...（二）
二、易出現的問題（一）渦流擴散（Eddy diffusion）流動相碰到較大的固體顆粒，就像流水碰到石頭一樣產生渦流。如果柱裝填得不均勻，有的部分松散或有細溝，則流動相的速度就快；有的部位結塊或裝直緊密則流就慢，多條流路有快有慢，就使區帶變寬。因此，固相載體的顆粒要小而均勻，裝柱要松緊均一，這樣渦流
親和層析－－生物素/親和素純化
低耐壓：生物素瓊脂糖微球生物素瓊脂糖凝膠是用于純化或去除親和素或鏈霉親和素樣本的產品，生物素是通過間隔臂以多種共價結合的方式固定在基材上的，最大限度避免配基脫落。?這種結合非常緊密，可以應用于不可逆結合（如：從某個樣本中去除親和素組分）高耐壓：鏈霉親和素 HC 瓊脂糖微球?ABT Streptavi
親和偶聯－－氨基
?固相技術是一種將配基（酶、抗體、親和蛋白等）偶聯到支持結構（如瓊脂糖）上的技術，該技術提供了高穩定性和易于重復使用的固定化分子。親和配體的偶聯及其在層析中的應用已經擴展到了許多領域，包括純化程序，去除污染組分和生物催化。?ABT 提供種類繁多的預活化凝膠，旨在通過穩定的偶聯配體和不帶電荷的共價鍵，