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  • 瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳色譜儀載體概述

    瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳色譜儀用于分離、鑒定和純化DNA段,是分子克隆的核心技術之一。該技術操作簡單,迅速,能分離用其它方法如密度梯度離心等不能滿意分離的DNA段。此外,凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠直接觀察到,甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外線激發下也能直接檢測到。這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收,用于各種各樣的目的。 瓊脂糖凝膠的分離范圍很大,50bp至百萬bp長的DNA都可以在不同濃度和構型的瓊脂糖凝膠中電泳分離。小片段DNA(50~20000bp)zui適合在恒定強度和方向的電場中水平方位的瓊脂糖凝膠中電泳分離。在這些條件下,DNA的泳動速度通常隨DNA段長度的增加而減少,與電場強度成正比。但此相關性當DNA段長度超過最大極限值時會立即被破壞,這主要是由于凝膠的構成和電場強度決定的。當線狀雙螺旋DNA的半徑超過凝膠的孔徑時,就達到分辨率的極限。此時,DNA不再被凝膠按其大小篩分......閱讀全文

    瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳色譜儀載體概述

    瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳色譜儀用于分離、鑒定和純化DNA段,是分子克隆的核心技術之一。該技術操作簡單,迅速,能分離用其它方法如密度梯度離心等不能滿意分離的DNA段。此外,凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠直接觀察到,甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外線激發下也能直接檢測到。這

    瓊脂糖凝膠電泳色譜儀的載體分類

    瓊脂糖凝膠電泳色譜儀的載體按熔點可分為高熔點(標準)瓊脂糖凝膠和低熔點瓊脂糖凝膠。一、高熔點(標準)瓊脂糖凝膠:制造高熔點瓊脂糖凝膠的原料是Gelidium和Gracilaria海藻。這兩種瓊脂糖的熔點不同,但在實際應用中每種來源的瓊脂糖都可以用于分離1~25kb的DNA段。新型的標準瓊脂糖具有高凝

    氣液填充柱色譜儀載體概述

    氣液填充柱色譜儀載體是支撐固定液的惰性多孔固體顆粒。一、載體要求:? 1、化學惰性。? 2、比表面積大。? 3、機械強度好。? 4、熱穩定性好。二、載體分類:? 1、硅藻土型載體:(1)天然硅藻土+粘合劑→煅燒→紅色載體(2)天然硅藻土+粘合劑+Na2CO3→煅燒→白色載體? 2、非硅藻土型載體:(

    聚丙烯酰胺凝膠電泳色譜儀凝膠載體合成方式

    聚丙烯酰胺凝膠電泳色譜儀(PAGE)是以聚丙烯酰胺凝膠作為載體的電泳技術,由于分辨率高,目前已廣泛用于蛋白質等生物大分子的分析。聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺(CH2 = CH-CO-NH2,簡稱Acr)和交聯劑N,N′-甲叉雙丙烯酰胺(CH2 = CH-CO-NH-CO-CH = CH2,簡稱B

    聚丙烯酰胺凝膠電泳色譜儀載體的合成與性質

    聚丙烯酰胺凝膠電泳色譜儀的載體是聚丙烯酰胺凝膠。聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺(CH2 = CH-CO-NH2,簡稱Acr)和交聯劑N,N′-甲叉雙丙烯酰胺(CH2 = CH-CO-NH-CO-CH = CH2,簡稱Bis)在催化劑的作用下聚合而成的含酰胺基側鏈的脂肪族長鏈,相鄰的兩個鏈通過甲叉橋交

    概述桿狀病毒表達系統的載體和發展

      桿狀病毒基因組十分龐大,不能直接對其進行操作插入外源基因,因此需要通過中間轉染載體而獲得重組桿狀病毒。經過十多年來研究者們的不斷探索,已構建出用于表達不同基因產物的各種轉移載體。這些轉移載體的共同特征是[3]:  ①在一個基礎質粒(如pUC系列)中插入一個多角體蛋白基因啟動子(或p10基因啟動子

    經典電泳色譜儀各分離模式性能特點

    經典電泳色譜儀分離模式有自由界面電泳、紙電泳、醋酸纖維素薄膜電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、SDS-PAGE電泳、瓊脂糖凝膠電泳、等電聚焦電泳和等速電泳等。經典電泳儀由于受到焦耳熱的限制,只能在低電場強度下進行電泳,分離時間長,分離效率低。一、自由界面電泳:? 1、原理:溶液在U型管中,根據樣品各組分泳動

    傳統電泳色譜儀分離模式

    傳統電泳色譜儀分離模式有自由界面電泳、紙電泳、醋酸纖維素薄膜電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、SDS-PAGE電泳、瓊脂糖凝膠電泳、等電聚焦電泳和等速電泳等。一、自由界面電泳:1、原理:溶液在U型管中,根據樣品各組分泳動速度的不同進行分離。2、特點:沒有載體,對流比較嚴重,組分不能完全分離,成分相互重疊,檢

    聚丙烯酰胺凝膠電泳和瓊脂糖凝膠電泳的異同

    DNA電泳一般使用的都是瓊脂糖凝膠電泳,電泳的驅動力靠DNA骨架本身的負電荷。聚丙烯酰氨(PAGE)凝膠電泳用于蛋白質與寡糖核苷酸的分離。電泳的驅動力靠與蛋白質結合的SDS上所攜帶的負電荷。蛋白質電泳(一般指SDS-PAGE)根據蛋白分子量亞基的不同而分離蛋白。蛋白質亞基的電泳遷移率主要取決于亞基分

    瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗原理

    聚丙烯酰胺凝膠電泳,普遍用于分離蛋白質及較小分子的核酸。瓊脂糖凝膠孔徑較大適用于分離同工酶及其亞型,大分子核酸等應用較廣。瓊脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各種形狀、大小和孔隙度。瓊脂糖凝膠分離DNA度大小范圍較廣,不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長度從200bp至近50kb的DNA段。瓊脂糖通常用水平裝置在強度和

    瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳遷移速率的影響因素

    瓊脂糖主要在DNA制備電泳中作為一種固體支持基質,其密度取決于瓊脂糖的濃度。在電場中,在中性pH值下帶負電荷的DNA向陽極遷移,其遷移速率由下列多種因素決定:(1)DNA的分子大小線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數成反比,分子越大則所受阻力越大,也越難于在凝膠孔隙中

    氣相色譜儀的載體

    氣相色譜儀的載體是一種化學惰性的固體顆粒,提供一個承擔固定液的惰性表面,使固定液以薄膜狀態均勻分布在其表面上。一、對一般載體的要求:1、比表面積大,孔穴結構好。2、表面沒有吸附性能或很弱。3、不與被分離物質和固定液發生化學反應。4、熱穩定性好,粒度均勻,有一定機械強度等。二、載體類型:載體可分為硅藻

    凝膠色譜儀載體的要求

    載體是凝膠色譜儀產生分離作用的關鍵,要求如下:一、良好的化學穩定性和熱穩定性。二、有一定的機械強度。三、不易變形。四、流動阻力小。五、對樣品沒有吸附作用。六、粒度小,均勻,堆積緊密。七、分離范圍大。

    關于λ類噬菌體載體的概述

      構建λ噬菌體載體的基本原理是多余限制位點的刪除,按照這一基本原理構建的λ噬菌體的派生載體,可以歸納成兩種不同的類型:一種是插入型載體(insertionvectors),只具有一個可供外源DNA插入的克隆位點,另一種是替換型載體(rePlacementvectors),具有成對的克隆位點,在這兩

    概述腺病毒載體的作用機制

      典型的腺病毒載體系統如:穿梭質粒pCA13/腺病毒基因組質粒pBHG11/包裝細胞293細胞。pCA13/的HCMV IE啟動子-多克隆位點-SV40 AN(poly A)構成外源基因的表達盒,該表達盒的插入使腺病毒E1基因缺失,但是保留其兩端側翼序列(左側的1~3bp的ITR,右側從3.5kb

    LITMUS39載體載體載體的基本信息和質粒圖譜

    LITMUS39載體載體基本信息載體名稱LITMUS39載體抗性Ampicillin載體長度2817 bp載體類型Basic Cloning Vectors載體來源Evans PD, Cook SN, Riggs PD, Noren CJ.拷貝數High copy number5'引物M13

    氣液填充柱色譜儀載體的選擇原則和評價方法

    氣液填充柱色譜儀載體性能的優劣對樣品的分離起著重要作用,實際工作中主要依據分離對象、固定液的性質及涂漬量、載體粒度等選擇載體。1、分離對象:酸性樣品,選用酸洗載體。堿性樣品,選用堿性載體。高沸點組分,一般選用玻璃微球載體。強腐蝕性組分,應選用氟載體。2、固定液的性質及涂漬量:當固定液的涂漬量大于 5

    氣液填充柱色譜儀載體的選擇原則和評價方法

    氣液填充柱色譜儀載體性能的優劣對樣品的分離起著重要作用,實際工作中主要依據分離對象、固定液的性質及涂漬量、載體粒度等選擇載體。1、分離對象:酸性樣品,選用酸洗載體。堿性樣品,選用堿性載體。高沸點組分,一般選用玻璃微球載體。強腐蝕性組分,應選用氟載體。2、固定液的性質及涂漬量:當固定液的涂漬量大于5%

    凝膠色譜儀器對載體的要求

    1. 良好的化學穩定性和熱穩定性;2. 有一定的機械強度;3. 不易變形;4. 流動阻力小;5. 對試樣沒有吸附作用;6. 分離范圍越大越好(取決于孔徑分布)等;7. 載體的粒度愈小,愈均勻,堆積的愈緊密,色譜柱分離效率愈高。

    瓊脂糖凝膠電泳色譜儀分析技術

    瓊脂糖凝膠電泳色譜儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳技術,廣泛用于核酸研究,為DNA分子及其片段的分子量測定和DNA分子構象分析提供了重要手段。一、工作原理:瓊脂糖凝膠電泳中,DNA分子的遷移率與其分子量的常用對數成反比。DNA分子構象對遷移率也有影響,遷移率為共價閉環DNA>直線DNA>開環雙鏈DNA

    瓊脂糖凝膠電泳技術概述

    一、瓊脂糖凝膠的特點天然瓊脂(agar)是一種多聚糖,主要由瓊脂糖(agarose,約占80%)及瓊脂膠(agaropectin)組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質,不帶電荷,而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖,由于這些基團帶有電荷,在電場作用下能產生較強的電滲現象,加之硫酸根可與

    聚丙烯酰胺凝膠電泳概述

      聚丙烯酰胺凝膠電泳簡稱為PAGE(Polyacrylamide gel electrophoresis),是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質的一種常用電泳技術。聚丙烯酰胺凝膠由單體丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺聚合而成,聚合過程由自由基催化完成。催化聚合的常用方法有兩種:化學聚合法和光聚合法。化學聚合以過

    瓊脂和瓊脂糖的區別

    1、本質不一樣瓊脂:是植物膠的一種,常用海產的麒麟菜、石花菜、江蘺等制成,為無色、無固定形狀的固體,溶于熱水。瓊脂糖:瓊脂糖:是線性的多聚物,基本結構是1,3連結的β-D-半乳糖和1,4連結的3,6-內醚-L-半乳糖交替連接起來的長鏈。瓊脂果膠是由許多更小的分子組成的異質混合物。2、用途不一樣瓊脂:

    概述酰基載體蛋白的異構體

      絕大多數植物都具有幾種ACP異構體。它們或是組成型表達的,或是組織特異性表達的。有科學家指出擬南芥至少具有5種質體型ACP和1種線粒體型ACP。其中ACP1在葉、根、種子中表達,但在種子中的表達遠比在葉中和根中強,ACP2和ACP3在所有的組織中都表達,即屬于組成型表達的。ACP4主要存在于葉片

    概述λ噬菌體載體的主要用途

      利用λ噬菌體作載體,主要是將外來目的DNA替代或插入中段序列,使其隨左右臂一起包裝成噬菌體,去感染大腸桿菌,并隨噬菌體的溶菌繁殖而繁殖。現在廣泛使用的λ噬菌體載體也是已作過許多人工改造的,主要的改造是:  ①設計去除λDNA上的一些限制性酶切點。這是因為λDNA較大,序列中的限制性酶切點過多,妨

    傳統電泳儀性能特點歸納

    ???????? 電泳是電解質中帶電粒子在電場作用下,以不同的速度向電荷相反方向遷移的現象。利用電泳現象對化學和生物化學組分進行分離的儀器稱為電泳儀。從20世紀30~40年代起,相繼發展了多種基于抗對流載體的電泳儀。傳統電泳儀由于受到焦耳熱的限制,只能在低電場強度下進行電泳,分離時間長,分離效率低。

    傳統電泳儀性能特點歸納

    電泳是電解質中帶電粒子在電場作用下,以不同的速度向電荷相反方向遷移的現象。利用電泳現象對化學和生物化學組分進行分離的儀器稱為電泳儀。從20世紀30~40年代起,相繼發展了多種基于抗對流載體的電泳儀。傳統電泳儀由于受到焦耳熱的限制,只能在低電場強度下進行電泳,分離時間長,分離效率低。傳統電泳根據有無載

    傳統電泳儀性能特點歸納

    傳統電泳儀性能特點歸納? ? ? ??電泳是電解質中帶電粒子在電場作用下,以不同的速度向電荷相反方向遷移的現象。利用電泳現象對化學和生物化學組分進行分離的儀器稱為電泳儀。從20世紀30~40年代起,相繼發展了多種基于抗對流載體的電泳儀。傳統電泳儀由于受到焦耳熱的限制,只能在低電場強度下進行電泳,分離

    氣相色譜儀產品概述和使用說明

      一、按儀器使用說明書的規程操作  這一點主要是針對新購置和安裝的儀器,不僅要清點零部件與備件是否齊全,更要檢查說明書是否齊全,一定要妥善保管這些資料,以備日后查閱。在獨立操作儀器前,一定要認真閱讀有關使用說明書,并且嚴格按規程操作。這是做好儀器分析的前提,而且當儀器出現問題時也方便與廠商溝通。特

    聚丙烯酰胺凝膠電泳與瓊脂糖凝膠電泳的區別

    聚丙烯酰胺凝膠電泳與瓊脂糖凝膠電泳的區別為:支持介質不同、用途不同、優勢不同。一、支持介質不同1、聚丙烯酰胺凝膠電泳:是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質的一種常用電泳技術2、瓊脂糖凝膠電泳:是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法二、用途不同1、聚丙烯酰胺凝膠電泳:用于分離蛋白質和寡核苷酸2、瓊脂糖凝膠

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