細胞內細胞因子的流式細胞儀檢測
簡介 隨著研究的進展,僅僅對細胞進行定量和活性的檢測已不能滿足需要。在單細胞水平研究細胞因子的表達能力對研究細胞因子在疾病中的作用越來越顯的重要無比。目前檢測單個細胞特定細胞因子的表達手段包括: ELIspot 、原位雜交、免疫細胞化學、限制性稀釋分析( limiting dilution analysis , LDA )和單細胞 PCR ,應用原位雜交技術和免疫組化方法觀察細胞因子蛋白表達及 mRNA 表達可以識別 Th1 和 Th2 細胞,此方法可獲得較強的細胞內信號,但此方法工作量大、主觀性強,難以進行大樣本檢測,且人肉眼識別能力有很大的局限性,而 ELISPOT 及單細胞 PCR 技術,技術性強、勞動強度大,難以進行廣泛推廣。隨著多標......閱讀全文
細胞內細胞因子的流式細胞儀檢測
簡介隨著研究的進展,僅僅對細胞進行定量和活性的檢測已不能滿足需要。在單細胞水平研究細胞因子的表達能力對研究細胞因子在疾病中的作用越來越顯的重要無比。目前檢測單個細胞特定細胞因子的表達手段包括:ELIspot、原位雜交、免疫細胞化學、限制性稀釋分析(limiting dilution analysis
細胞內細胞因子的流式細胞儀檢測
簡介?隨著研究的進展,僅僅對細胞進行定量和活性的檢測已不能滿足需要。在單細胞水平研究細胞因子的表達能力對研究細胞因子在疾病中的作用越來越顯的重要無比。目前檢測單個細胞特定細胞因子的表達手段包括:?ELIspot?、原位雜交、免疫細胞化學、限制性稀釋分析(?limiting dilution anal
細胞內細胞因子的檢測
實驗步驟展開
細胞內細胞因子的檢測
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? 展開
細胞內細胞因子的檢測
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? 展開
激活的淋巴細胞內細胞因子的檢測
簡介細胞因子是可溶性蛋白,在淋巴細胞應答中有重要的免疫調節作用。細胞因子可以調節細胞生長、分化以及一系列功能,并且介導正常與病理性免疫應答。細胞因子是具有效應及調節雙重作用的獨特蛋白。近來研究顯示,細胞因子可以具有多重功能,作用于多個細胞亞群并可在不同亞群細胞表達。早期細胞因子表達與T細胞功能相關性
流式細胞儀檢測細胞內因子
實驗步驟基本方案? 細胞內因子的熒光標記材 料輔 助 方 案 I PM A 和 ionomyciii 激 活 T 細胞材 料輔 助 方 案 2 抗 原 活 化 T 細胞材 料輔 助 方 案 3 固定和 凍存 PBMC材 料輔 助 方 案 4 PBMC 的細胞表面標記材 料輔 助 方 案 5 用熒光標
流式細胞儀檢測細胞內因子
實驗步驟基本方案? 細胞內因子的熒光標記材 料輔 助 方 案 I PM A 和 ionomyciii 激 活 T 細胞材 料輔 助 方 案 2 抗 原 活 化 T 細胞材 料輔 助 方 案 3 固定和 凍存 PBMC材 料輔 助 方 案 4 PBMC 的細胞表面標記材 料輔 助 方 案 5 用熒光標
細胞內細胞因子染色步驟
1.樣本準備:1) 收集細胞。經刺激和阻斷處理的細胞(具體處理方案請參考文獻進行),加細胞染色Buffer(或含0.1%BSA的PBS)制成單細胞懸液,調整細胞濃度約為1×107/ml。2) 取100μl細胞/管(約1×106細胞),分別加到做好標記的流式管底部。2.固定:1) 如需要表面染色,選用
流式細胞儀檢測細胞因子的分泌和分離分泌細胞因子細胞
實驗步驟基本方案細胞因子分泌實驗材 料冰冷的或 37°C 預溫的培養液。例如,培養人細胞用含 1 0 % 人 A B 血漿或自身血清的 1640 完全培養液。培養小鼠細胞用含 1 0 % 小鼠血清的 R P M 1-1640 完全培養基抗原, 1?10ug/m l 肽 或 1?100ug/m l 蛋
如何用流式細胞儀檢測細胞內的ROS
流式檢測ROS的特異性比較差。一般來說,針對過氧化氫和超氧化物有熒光探針。加到細胞培養液后,細胞攝齲遇到ROS,可以發出熒光,上機檢測可以比較各組之間熒光強度的變化從而代表ROS水平的不同。你這個圖橫坐標代表的是相對熒光強度,縱坐標代表的是細胞計數。 圖的含義就是在每個熒光強度有多少細胞。 估計你用
如何用流式細胞儀檢測細胞內的ROS
流式檢測ROS的特異性比較差。一般來說,針對過氧化氫和超氧化物有熒光探針。加到細胞培養液后,細胞攝齲遇到ROS,可以發出熒光,上機檢測可以比較各組之間熒光強度的變化從而代表ROS水平的不同。你這個圖橫坐標代表的是相對熒光強度,縱坐標代表的是細胞計數。 圖的含義就是在每個熒光強度有多少細胞。 估計你用
如何用流式細胞儀檢測細胞內的ROS
流式檢測ROS的特異性比較差。一般來說,針對過氧化氫和超氧化物有熒光探針。加到細胞培養液后,細胞攝齲遇到ROS,可以發出熒光,上機檢測可以比較各組之間熒光強度的變化從而代表ROS水平的不同。你這個圖橫坐標代表的是相對熒光強度,縱坐標代表的是細胞計數。 圖的含義就是在每個熒光強度有多少細胞。 估計你用
如何用流式細胞儀檢測細胞內的ROS
流式檢測ROS的特異性比較差。一般來說,針對過氧化氫和超氧化物有熒光探針。加到細胞培養液后,細胞攝齲遇到ROS,可以發出熒光,上機檢測可以比較各組之間熒光強度的變化從而代表ROS水平的不同。你這個圖橫坐標代表的是相對熒光強度,縱坐標代表的是細胞計數。 圖的含義就是在每個熒光強度有多少細胞。 估計你用
如何用流式細胞儀檢測細胞內的ROS
流式檢測ROS的特異性比較差。一般來說,針對過氧化氫和超氧化物有熒光探針。加到細胞培養液后,細胞攝齲遇到ROS,可以發出熒光,上機檢測可以比較各組之間熒光強度的變化從而代表ROS水平的不同。你這個圖橫坐標代表的是相對熒光強度,縱坐標代表的是細胞計數。 圖的含義就是在每個熒光強度有多少細胞。 估計你用
如何用流式細胞儀檢測細胞內的ROS
流式檢測ROS的特異性比較差。一般來說,針對過氧化氫和超氧化物有熒光探針。加到細胞培養液后,細胞攝齲遇到ROS,可以發出熒光,上機檢測可以比較各組之間熒光強度的變化從而代表ROS水平的不同。你這個圖橫坐標代表的是相對熒光強度,縱坐標代表的是細胞計數。 圖的含義就是在每個熒光強度有多少細胞。 估計你用
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如何用流式細胞儀檢測細胞內的ROS
流式檢測ROS的特異性比較差。一般來說,針對過氧化氫和超氧化物有熒光探針。加到細胞培養液后,細胞攝齲遇到ROS,可以發出熒光,上機檢測可以比較各組之間熒光強度的變化從而代表ROS水平的不同。你這個圖橫坐標代表的是相對熒光強度,縱坐標代表的是細胞計數。 圖的含義就是在每個熒光強度有多少細胞。 估計你用
如何用流式細胞儀檢測細胞內的ROS
流式檢測ROS的特異性比較差。一般來說,針對過氧化氫和超氧化物有熒光探針。加到細胞培養液后,細胞攝齲遇到ROS,可以發出熒光,上機檢測可以比較各組之間熒光強度的變化從而代表ROS水平的不同。你這個圖橫坐標代表的是相對熒光強度,縱坐標代表的是細胞計數。 圖的含義就是在每個熒光強度有多少細胞。 估計你用
用流式細胞儀檢測細胞因子的分泌和分離
實驗步驟基本方案細胞因子分泌實驗材 料冰冷的或 37°C 預溫的培養液。例如,培養人細胞用含 1 0 % 人 A B 血漿或自身血清的 1640 完全培養液。培養小鼠細胞用含 1 0 % 小鼠血清的 R P M 1-1640 完全培養基抗原, 1?10ug/m l 肽 或 1?100ug/m l 蛋
用流式細胞儀檢測細胞因子的分泌和分離分泌細胞因...
用流式細胞儀檢測細胞因子的分泌和分離 分泌細胞因子的細胞基本方案細胞因子分泌實驗材 料冰冷的或 37°C 預溫的培養液。例如,培養人細胞用含 1 0 % 人 A B 血漿或自身血清的 1640 完全培養液。培養小鼠細胞用含 1 0 % 小鼠血清的 R P M 1-1640 完全培養基抗原, 1?10
細胞因子的檢測
白介素2受體(IL-2R,CD25)實驗步驟展開γ干擾素(IFN-γ)實驗步驟展開α腫瘤壞死因子(TNF-α)實驗步驟展開
細胞因子的檢測
隨著免疫學理論研究的深入,發現的細胞因子日益增多,并在免疫應答的調節和效應中起著重要作用,其在體內水平的高低直接反映機體的免疫狀況。細胞因子檢測的方法主要分三類:①細胞生物學活性檢測法。②免疫學標記技術,常用ELISA。③分子生物學方法,常用逆轉錄PCR檢測細胞因子的mRNA轉錄的情況。現以生物活性
細胞因子的檢測
白介素2受體(IL-2R,CD25) γ干擾素(IFN-γ) α腫瘤壞死因子(TNF-α) ? ? ? ? ? ? 實驗步驟
鑒定細胞產生的細胞因子等炎癥介質的分析
各種激活類型的細胞可以分泌細胞因子,趨化因子和其他炎癥介質,如穿孔素,粒酶免疫或炎癥反應的一部分。如ELISA和BD?式微珠陣列(CBA)測量整個細胞群所產生的分泌蛋白的方法。與此相反,細胞內流式細胞儀允許于感興趣的細胞群,表型鑒定的個別類型的細胞產生的細胞因子等炎癥介質的分析。 流式細胞儀檢測細
細胞因子的檢測方法
細胞因子(cytokine)是由細胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物質的統稱。在免疫應答過程中,細胞因子在免疫調節、炎癥應答、腫瘤轉移等生理和病理過程中起重要作用。細胞因子的檢測不僅是基礎免疫研究的有較手段,同時在臨床疾病診斷、病程觀察、療效判斷及細胞因子治療監測方面具有重要價值。但是,由于細胞因子
細胞因子的檢測方法
細胞因子(cytokine)是由細胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物質的統稱。在免疫應答過程中,細胞因子在免疫調節、炎癥應答、腫瘤轉移等生理和病理過程中起重要作用。細胞因子的檢測不僅是基礎免疫研究的有較手段,同時在臨床疾病診斷、病程觀察、療效判斷及細胞因子治療監測方面具有重要價值。 但
細胞因子的檢測方法
細胞因子的檢測方法細胞因子(cytokine)是由細胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物質的統稱。在免疫應答過程中,細胞因子在免疫調節、炎癥應答、腫瘤轉移等生理和病理過程中起重要作用。細胞因子的檢測不僅是基礎免疫研究的有較手段,同時在臨床疾病診斷、病程觀察、療效判斷及細胞因子治療監測方面具有重要價值。
檢測細胞因子的方法
目前檢測細胞因子的方法主要有生物學測定、免疫學測定、分子生物學技術和流式細胞儀等。生物學測定也叫生物活性測定,主要根據各種細胞因子的不同生物活性檢測。免疫學測定是目前使用最為廣泛的方法,主要利用細胞因子蛋白或多肽的抗原性,獲得特異性抗血清或單克隆抗體,利用抗原抗體特異性反應的特性,用免疫學技術定