乳酸菌飲料中嗜酸乳桿菌的實時熒光定量PCR檢測方法
嗜酸乳桿菌是重要的益生菌,被大量應用在食品中。研究表明嗜酸乳桿菌能在乳制品中產生乳酸,并能通過氨基酸代謝增加風味。嗜酸乳桿菌主要作用有降低pH值、產生抗菌素(如嗜酸菌素和乳酸殺菌素等),在一定程度上抑制腸道中有害微生物的有害作用。有研究發現嗜酸乳桿菌對大腸桿菌、腹瀉致病菌等均有抑制作用;大量的嗜酸乳桿菌還可阻礙膽固醇的合成,降低血漿中膽固醇含量;另外對于乳糖不耐癥也有一定的療效。嗜酸乳桿菌對腸道菌群的平衡和對微生態的調節也證明其對健康具有促進的作用。目前在DNA水平上的分子檢測方法越來越多,其檢測方法快速方便、靈敏、省時被廣泛應用到物種檢測中。其中實時熒光定量聚合酶鏈式反應(PCR)技術因其高特異性、高靈敏度、無污染等優點,在食品檢測中備受青睞。上海市質量監督檢驗技術研究院,國家食品質量監督檢驗中心(上海)的張娜娜、劉 洋*、俞 漪等人建立基于嗜酸乳桿菌SPIDR保守區域的序列結合實時熒光定量PCR方法定量檢測飲料中的嗜酸乳......閱讀全文
乳酸菌飲料中嗜酸乳桿菌的實時熒光定量PCR檢測方法
嗜酸乳桿菌是重要的益生菌,被大量應用在食品中。研究表明嗜酸乳桿菌能在乳制品中產生乳酸,并能通過氨基酸代謝增加風味。嗜酸乳桿菌主要作用有降低pH值、產生抗菌素(如嗜酸菌素和乳酸殺菌素等),在一定程度上抑制腸道中有害微生物的有害作用。有研究發現嗜酸乳桿菌對大腸桿菌、腹瀉致病菌等均有抑制作用;大量的嗜
乳酸菌飲料中嗜酸乳桿菌的實時熒光定量PCR檢測方法
嗜酸乳桿菌是重要的益生菌,被大量應用在食品中。研究表明嗜酸乳桿菌能在乳制品中產生乳酸,并能通過氨基酸代謝增加風味。嗜酸乳桿菌主要作用有降低pH值、產生抗菌素(如嗜酸菌素和乳酸殺菌素等),在一定程度上抑制腸道中有害微生物的有害作用。有研究發現嗜酸乳桿菌對大腸桿菌、腹瀉致病菌等均有抑制作用;大量的嗜酸乳
實時熒光定量PCR檢測方法
聚合酶鏈式反應(PCR)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。目前,PCR成為分子生物學研究必不可少的一部分。實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)技術,是指在PCR反應
阪崎腸桿菌及實時熒光定量PCR檢測
一、阪崎腸桿菌是腸桿菌科的一種:1980年由黃色陰溝腸桿菌更名為阪崎腸桿菌。阪崎腸桿菌能引起嚴重的新生兒腦膜炎、小腸結腸炎和茵血癥,死亡率高達50% 以上。目前,微生物學家尚不清楚阪崎腸桿菌的污染來源,但許多病例報告表明嬰兒配方粉是目前發現的主要感染渠道。阪崎腸桿茵的生物學性狀及其對人群的健康危
嗜酸乳桿菌的服用方法
如果您對藥物成分過敏,應避免使用。 如果您需要同時服用抗菌或抗酸類藥物,最好間隔3個小時再服用復方嗜酸乳桿菌片,以避免減弱療效。 復方嗜酸乳桿菌片不可以和鉍劑、藥用炭、鞣酸類藥物同用。 對于孕婦、哺乳期婦女以及兒童,應在醫生指導下使用。 如果在使用復方嗜酸乳桿菌片后一周內癥狀沒有得到緩解
實時熒光定量PCR儀【實時熒光定量PCR儀】
【FT-PCR】實時熒光定量PCR儀【實時熒光定量PCR儀】_風途廠家_Kgaolet?o ya dikarolo t?e bopago seswant?ho t?a kgole ya PCR 具體來講撲殺無害化處理染疫動物,禁止泔水飼喂生豬,加強生豬養殖運輸屠宰等各個環節的清洗和消毒,包括養
DNA打印機升級迭代-PCR檢測相關標準再更新
PCR檢測——ISO標準發布近日,由上海海關主導制定的2項ISO標準正式獲得國際標準化組織(ISO)通過并發布。這兩項ISO標準是:《ISO/TS20224-10:2024分子生物標記分析——食品和飼料中動物源性成分實時熒光PCR檢測——第10部分鴨DNA檢測方法》和《ISO/TS20224-11:
實時熒光定量-PCR
? ? 實時熒光定量 PCR ,簡稱 RT-QPCR, 屬于 Q-PCR 的一種,目前該技術已得到廣泛應用,如:擴增特異性分析、基因定量分析、基因分型、 SNP 分析等。熒光定量 PCR 常用的方法是 DNA 結合染料 SYBR GreenⅠ的非特異性方法。? ? SYBR Green I 是一種結
實時熒光定量PCR
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增。在擴增反應結束之后,我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析,也可以通過放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析。無論定性還是定量分析,分析的都是PCR終產物。但是在許多
實時熒光定量PCR
Real Time PCR實時熒光定量PCR? 其定量的基本原理是在?PCR 反應體系中加入非特異性的熒光染料(如:?SYBR GREEN I )或特異性的熒光探針(如:?Taqman 探針),實時檢測熒光量的變化,獲得不同樣品達到一定的熒光信號(閾值)時所需的循環次數:?CT 值(?Cycle
實時熒光定量PCR
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的: 1)Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,
實時熒光定量-PCR
實時熒光定量 PCR 是一種可以實時檢測核酸擴增的技術,在 PCR 反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號的變化對 PCR 過程進行實時監控,以此實現對初始模板的定量分析。常用標記方法主要有兩種,一是非特異性熒光標記:SYBR Green I;二是特異性熒光標記:Taqman 探針法。????實時熒光
實時熒光定量-PCR
Thomas D. SchmittgenDepartment of Pharmaceutical Sciences, College of Pharmacy,Washington State?University, Pullman, WA 99164.????? 對于從 90 年代初就開始接觸定
嗜酸乳桿菌的特性
?厭氧瓊脂平板上35℃培養48 h.形成較小(直徑約0.5 mm)、網形、凸起、表面粗糙、邊緣卷曲的菌落。
實時熒光定量PCR檢測系統的介紹
實時熒光定量PCR檢測系統也叫實時熒光定量核酸擴增檢測系統(英文全名是Real-time Quantitative PCR Detection System),簡稱實時熒光qPCR,qPCR的核心是實時熒光定量PCR儀及與其配套的檢測分析軟件系統。聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain
實時熒光定量PCR(realtime-PCR)
實驗材料 細胞樣品試劑、試劑盒 RNA提取試劑盒熒光定量PCR MixTRIZOLdNTP氯仿逆轉錄酶MMLV異丙醇Taq酶DEPC水ddH2OTEMgCl2瓊脂糖溴化乙錠MOPS甲醛乙酸鈉EDTAEB溴酚蘭儀器、耗材 離心管離心機風光光度計電泳槽凝膠板Realtime PCR儀實驗步驟 一、 樣品
實時熒光定量PCR(realtime-PCR)
實驗步驟一、 樣品RNA的抽提?1. ?取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。2. ?兩相分離 每1 ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2 ml的氯仿,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12 000 rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的
實時熒光定量PCR(realtime-PCR)
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。 實驗材料
什么是嗜酸乳桿菌?
本菌呈桿狀,菌端鈍圓,革蘭氏染色陽性,老齡培養物的菌體著色不勻,呈兩極著色。菌體大小約為0.6-0.9X1.5-6.0μm,單在,成雙或呈短鏈排列,無運動性,不產生芽胞。 本菌為微需氧菌,在一般情況下可以生長。最適宜培養溫度為35-38℃,15-22℃不能生長或生長極弱,48-55℃可能生長或
實時熒光定量-PCR-原理
實時熒光定量 PCR 技術,是指在 PCR 反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個 PCR 進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量的方法。實時定量 PCR 技術是在常規 PCR 基礎上,添加了一條標記了兩個熒光基團的探針。一個標記在探針的5'端,稱為熒光報告基團(R);另一個
實時熒光定量PCR簡介
熒光定量PCR檢測技術從誕生到現在已經有 8 年了,但是其應用在近四年才迅猛增長。在 Medline 數據庫中,用“ Taqman” 或 ”real time PCR” 作為關鍵詞檢索,在1996 年僅有 19 篇,在 1997 年僅有 28 篇,在 98 、 99 、2000 年分別達到了
實時熒光定量PCR儀
在普通PCR儀的基礎上增加一個熒光信號采集系統和計算機分析處理系統,就成了熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機
實時熒光定量PCR原理
所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法.?1.在熒光定量PCR技術中,有一個很重要的概念—— Ct值.C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含義是:每個反應管內的熒光信號到
實時熒光定量PCR儀
在普通PCR儀的基礎上增加一個熒光信號采集系統和計算機分析處理系統,就成了熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機分析
實時熒光定量PCR技術
通過實時熒光定量PCR技術實現對miRNA靶向物mRNAs的相對定量分析1 導言小RNA(miRNAs)是一種內源性非編碼蛋白的小分子RNA,它們是許多基礎的細胞過程中基因表達的主要調節因子,這些過程包括細胞增殖、細胞分化以及細胞凋亡等。miRNA在腫瘤生長過程中也發揮著重要作用。一般來說,miRN
實時熒光定量PCR,檢測指標是什么
實時熒光定量PCR是檢測模板DNA的拷貝數、基因表達量、基因突變等的
實時熒光定量PCR檢測及臨床應用
實時熒光定量PCR技術的應用定量PCR是在定性PCR技術基礎上發展起來的核酸定量技術。實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Appliedbiosystems公司推出,它是一種在PCR反應體系中加入熒光基團,利用對熒光信號積累的實時檢測來監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的
嗜酸乳桿菌的獲取方式
嗜酸乳桿菌在胃中存活率一般能達到80%,但是若不經包埋處理,口服嗜酸乳桿菌后,它們的活力仍是會受到影響的;而如果將它們全部包埋,又無法發揮其在胃中的有益作用。因此我們首先選擇由菌母直接繁育出的一代活菌,再將它們的一半應用雙層包埋技術,不僅胃、腸同養,還保證了活菌在腸道中的活性。 雙包埋技術的優
嗜酸乳桿菌的增殖方式
在營養豐富的MRS培養基巾,添加低聚糖對3株乳酸菌增殖的影響,如低聚異麥芽糖對嗜酸乳桿菌、乳酸乳桿菌、乳酸鏈球菌均有一定的增殖作用。添加低聚糖對乳酸菌增殖的菌落對數值低聚糖是由2~10個單糖單位通過糖苷鍵而連接的小聚合體,介于單體單糖與高度聚合的多糖之間。國外已有報道,低聚糖可以促進腸道雙歧桿菌和乳
實時熒光定量PCR的原理
所謂實時熒光定量PCR技術 ,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。檢測方法1.SYBRGreenⅠ法:在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈