流式胞內染色protocol
一、surface marker染色1、收獲細胞，0.5-1x10e6/tube，用FACS Buffer 2ml洗滌一次，傾倒后濾紙吸干管口液體。2、加入預先配置好的你需要染的surface marker的抗體混合液（即CD3，CD4，CD8抗體mixture），充分混勻，室溫下孵育20分鐘。3、FACS Buffer 2 ml洗滌一次傾倒后濾紙吸干管口液體。二、Intracellular Staining的步驟1、加入Fix/permeabilizatioin Buffer（不同公司有各自的試劑，ebioscience或者BD，看你的抗體是那個公司的，但是操作流程大致相同）2、加入Fix/Perm Buffer 250ul 后，混勻，4度孵育30分鐘（公司可能推薦1ml，我一直加250ul，絕對可行）或者室溫15～20分鐘3、用公司配套的Perm Wash Buffer 1x的2ml洗滌1-2次，本人一直洗一次節約試劑，也沒......閱讀全文
流式胞內染色protocol
一、surface marker染色1、收獲細胞，0.5-1x10e6/tube，用FACS Buffer 2ml洗滌一次，傾倒后濾紙吸干管口液體。2、加入預先配置好的你需要染的surface marker的抗體混合液（即CD3，CD4，CD8抗體mixture），充分混勻，室溫下孵育20分鐘。3、
流式檢測胞內抗原時打孔液的配方
打孔液有很多種，方法也有很多。與你的實驗方法相關。我用過酒精固定或Triton X-100（我做的都是培養的細胞）：（1）70%的酒精固定24小時即可，不再需要再打孔。如在PI染色測細胞周期或凋亡。（2）Triton X-100是比較強烈的穿孔劑。0.1% Triton X-100/PBS（再加0.
什么是胞內運輸？
胞內運輸(intracellular transport)是真核生物細胞內膜結合細胞器與細胞內環境進行的物質交換。包括細胞核、線粒體、葉綠體、溶酶體、過氧化物酶體、高爾基體和內質網等與細胞內的物質交換。
細菌的芽胞染色
??? (一)實驗目的：學習細菌的芽胞染色法 (二)實驗原理：細菌的芽胞具有厚而致密的壁，透性低，不易著色，若用一般染色法只能使菌體著色而芽胞不著色(芽胞呈無色透明狀)。芽胞染色法就是根據芽胞既難以染色而一旦染上色后又難以脫色這一特點而設計的。所有的芽胞染色法都基于同一個原則：除了用著色力強的染料
細菌的芽胞染色
?(一)實驗目的：學習細菌的芽胞染色法 (二)實驗原理：細菌的芽胞具有厚而致密的壁，透性低，不易著色，若用一般染色法只能使菌體著色而芽胞不著色(芽胞呈無色透明狀)。芽胞染色法就是根據芽胞既難以染色而一旦染上色后又難以脫色這一特點而設計的。所有的芽胞染色法都基于同一個原則：除了用著色力強的染料外，還
細菌的芽胞染色
（一）實驗目的：學習細菌的芽胞染色法（二）實驗原理：細菌的芽胞具有厚而致密的壁，透性低，不易著色，若用一般染色法只能使菌體著色而芽胞不著色（芽胞呈無色透明狀）。芽胞染色法就是根據芽胞既難以染色而一旦染上色后又難以脫色這一特點而設計的。所有的芽胞染色法都基于同一個原則：除了用著色力強的染料外，還需要加
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗protocol
40年來，流式細胞術一直由多色流式主導。 盡管Fulwyler發明的初代儀器基于庫爾特體積，但熒光在短短幾年內成為流式細胞儀主導技術。 從20世紀80年代初到現在，技術開發人員一直致力于構建能夠測量更多熒光參數（我們通常將其稱為“顏色”）的儀器。 最開始，G?hde在1968年首次發表關于熒光
Isotype胞內染色有哪些學問？來看看這篇文章怎么說
對科研黨來說，流式細胞術一點都不陌生，它以自己特有的方式從細胞蛋白水平定量檢測目標蛋白的表達，并且能get到目標蛋白在各個細胞亞群中的表達，同時在細胞功能上也有很重要的作用，包括細胞凋亡，細胞周期，細胞增殖等等。 流式細胞術以細胞為研究對象，在流式細胞儀的作用下定量檢測樣品細胞的物理化學特征，
流式細胞術，怎么處理樣本？
流式細胞術（Flow Cytometry，FCM）能夠快速測定細胞懸液中單個細胞的生物學性質，并可以對特定的細胞進行分選收集。廣泛用于細胞生物學，免疫學，遺傳學，基礎醫學等領域。接下來的 Protocol 中以小鼠的淋巴細胞為例進行細胞表面和胞內染色。一. 試劑準備Wash Buffer：PBS+1
胞內運輸的具體形態
胞內運輸是指細胞內、細胞器間的物質交換。有分子擴散、微絲推動原生質的環流、細胞器膜內外的物質交換，以及囊泡的形成與囊泡內含物的釋放等。如光呼吸途徑中，磷酸乙醇酸、甘氨酸、絲氨酸、甘油酸分別進出葉綠體、過氧化體、線粒體；葉綠體中的丙糖磷酸經Pi轉運器從葉綠體轉移至細胞質，并在細胞質中合成蔗糖進入液泡貯
胞內受體的分化類型介紹
胞內受體又可分為核內受體和胞漿受體，如雄激素、雌激素、孕激素及甲狀腺素受體位于核內，而糖皮質激素受體位于胞漿中。類固醇激素與胞內受體結合后，可使受體的構象發生改變，暴露出DNA結合區。在胞漿中形成的類固醇激素-受體復合物以二聚體形式穿過核孔進入核內。在核內，激素-受體復合物作為轉錄因子與DNA特異基
胞內運輸的轉運方式介紹
營養物質的轉運方式有兩種：1、被動轉運：被動轉運過程主要包括被動擴散、易化擴散、濾過、滲透等作用。 被動擴散：營養物質透過細胞膜，不借助載體，不消耗能量，物質從濃度高的一側向濃度低的側透過稱為被動擴散。 易化擴散：指非脂溶性物質或親水物質如鈉、鉀、葡萄糖和氨基酸等，不能透過細胞膜的雙層脂類，需在細胞
胞內受體的種類和分化
胞內受體又可分為核內受體和胞漿受體，如雄激素、雌激素、孕激素及甲狀腺素受體位于核內，而糖皮質激素受體位于胞漿中。類固醇激素與胞內受體結合后，可使受體的構象發生改變，暴露出DNA結合區。在胞漿中形成的類固醇激素-受體復合物以二聚體形式穿過核孔進入核內。在核內，激素-受體復合物作為轉錄因子與DNA特異基
胞內運輸的概念和組成
胞內運輸(intracellular transport)是真核生物細胞內膜結合細胞器與細胞內環境進行的物質交換。包括細胞核、線粒體、葉綠體、溶酶體、過氧化物酶體、高爾基體和內質網等與細胞內的物質交換。
胞內運輸額具體形態
胞內運輸是指細胞內、細胞器間的物質交換。有分子擴散、微絲推動原生質的環流、細胞器膜內外的物質交換，以及囊泡的形成與囊泡內含物的釋放等。如光呼吸途徑中，磷酸乙醇酸、甘氨酸、絲氨酸、甘油酸分別進出葉綠體、過氧化體、線粒體；葉綠體中的丙糖磷酸經Pi轉運器從葉綠體轉移至細胞質，并在細胞質中合成蔗糖進入液泡貯
流式磁珠染色時間多長
10至30min。磁珠（ImmuneMagneticBeads，IMB）是發展起來的一項新的免疫學技術。流式磁珠染色時間為10至30min。磁珠將固化試劑特有的優點與免疫學反應的高度特異性結合于一體，以免疫學為基礎，滲透到病理、生理、藥理、微生物、生化以及分子遺傳學等各個領域，其在免疫檢測、細胞分離
流式細胞法檢測熒光假單胞菌
流式細胞法FCM（Flow Cytometry Method）可以檢測菌液中標記熒光信號的單細胞，對菌株實現逐一定量分析。流式細胞法檢出的菌數是平板計數法的 3.8 倍，因為能統計到總體菌落數量。利用這個方法檢測牛奶中假單胞菌，能在4 h內完成檢測，且在菌落數含量較少時靈敏度有很大的提高。此方法
胞內受體的分化種類級特點
胞內受體又可分為核內受體和胞漿受體，如雄激素、雌激素、孕激素及甲狀腺素受體位于核內，而糖皮質激素受體位于胞漿中。類固醇激素與胞內受體結合后，可使受體的構象發生改變，暴露出DNA結合區。在胞漿中形成的類固醇激素-受體復合物以二聚體形式穿過核孔進入核內。在核內，激素-受體復合物作為轉錄因子與DNA特異基
胞內受體的分化及功能介紹
胞內受體又可分為核內受體和胞漿受體，如雄激素、雌激素、孕激素及甲狀腺素受體位于核內，而糖皮質激素受體位于胞漿中。類固醇激素與胞內受體結合后，可使受體的構象發生改變，暴露出DNA結合區。在胞漿中形成的類固醇激素-受體復合物以二聚體形式穿過核孔進入核內。在核內，激素-受體復合物作為轉錄因子與DNA特異基
流式抗體染色不避光會怎樣
流式抗體熒光標記搭配主要由3個因素決定的： 流式細胞儀能檢測多少個通道 需要同時檢測檢測多少個指標 廠家的抗體有多少種熒光標記 如果流式細胞儀的通道越多，那么同一份樣本能同時做的表面/胞內標志就越多 A、 如何根據流式細胞儀搭配流式抗體 1） BD流式細胞儀 BD流式試劑選擇及應用
亮點推薦細胞代謝胞內氧檢測技術
細胞內氧含量水平對細胞的生理狀態，信號傳導以及細胞對藥物處理的應激反應有顯著的影響。由于技術原因，之前的研究更多集中在，通過檢測細胞胞外氧含量變化情況，進而間接評估細胞代謝速率的差異以及相應的胞內氧含量相對水平。然而，影響胞內氧含量的因素不僅包括細胞代謝速率差異，同時也包括細胞組織類型，環境氧濃度，
Cell：發現胞內細菌能促進癌癥轉移
近年來，越來越多的研究表明，在結直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌等多種癌癥類型中，細菌也是腫瘤組織本身的組成部分。這些細菌往往以較低的生物量寄生在腫瘤組織中，其菌群特征與癌癥風險、病理類型和治療反應相關。然而，腫瘤駐留細菌在腫瘤進展中的生物學作用仍不清楚。近期我國科學家發現，腫瘤駐留的胞內細菌能夠促
人胞內細胞因子檢測刺激方案
人細胞因子細胞來源活化-極化培養培養時間再次刺激胞內阻斷劑G-CSFPBMCLPS (1 ug/mL)24hr-MonensinGM-CSFPBMCPMA (30-50ng/mL)/Iono (1ug/mL)5hr-MonensinGIFN gammaPBMCPMA (30-50ng/mL)/Ion
小鼠胞內細胞因子檢測刺激方案
小鼠細胞因子細胞來源活化-極化培養培養時間再次刺激胞內阻斷劑GM-CSFmouse spleenConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d)2d/3danti-CD3 (10ug/mL immobilized) + anti-CD28 (
關于胞內蛋白的基本信息介紹
胞內蛋白，是由細胞質內游離的核糖體合成，不經過內質網、高爾基體的加工和細胞膜的胞吐，只在細胞內部產生影響的一類蛋白質。 胞內蛋白是由細胞質內游離的核糖體上合成的，不需要運輸到細胞膜外，只在細胞內起作用——如呼吸酶DNA聚合酶、各種轉氨酶、DNA解旋酶、RNA聚合酶等細胞生命活動必需的酶。 細
芽胞桿菌屬的形態與染色
致病菌中最大的革蘭陽性桿菌，兩端齊平，呈竹節狀。在組織內生長呈單個或短鏈，試管內可形成長鏈。無鞭毛，機體內或含血清培養基上可形成莢膜。人工培養或在外界環境中易產生芽胞，形狀橢圓，位于菌體中央，其直徑小于菌體。
流式細胞計PI染色死細胞
PI能夠插入雙鏈DNA中。它被活細胞排斥但能穿透正在死亡或已經死亡的細胞的細胞膜。Ⅰ、材料1、PI（e.g.,Cat #537059,Calbiochem,San Diego,CA）2、緩沖體系：1×PBS(Ca2+ and Mg2+ free,e.g.,Cat#9240,Irvine Scient
流式細胞計PI染色死細胞
PI能夠插入雙鏈DNA中。它被活細胞排斥但能穿透正在死亡或已經死亡的細胞的細胞膜。Ⅰ、材料1、PI（e.g.,Cat #537059,Calbiochem,San Diego,CA）2、緩沖體系：1×PBS(Ca2+ and Mg2+ free,e.g.,Cat#9240,Irvine Scient
小鼠神經干細胞的流式染色
實驗概要小鼠神經干細胞的流式染色主要試劑熒光標記抗體CD133-PE、EGF-Alexa647，10μg/ml的PI，染色液主要設備15 mL離心管、10%FBS包被的玻璃巴斯德管、移液槍、70 μm細胞濾膜、4℃低溫離心機實驗步驟（1）接神經干細胞的分離和純化最后一步。去上清，用染色液重懸細胞，向
簡介流式細胞術的染色方法
細胞表面染色：大多數免疫表型分析均采用此方法。但由于許多抗原也同時存在細胞內，所以在細胞表面抗原檢測時應特別注意保持細胞膜的完整以保證檢測的特異性。表面標記又分溶血前標記和溶血后標記。若紅細胞對標記有影響或血漿成分對標記有影響的，適合溶血后標記，但要注意溶血劑膜抗原的影響，所以，溶血劑一般不含固