腫瘤細胞的軟瓊脂集落培養和測定
一、原理 在體外培養基中由一個祖先細胞增殖形成的細胞團，稱之為集落。腫瘤細胞能無限繁殖，所以具有這種能力，而成熟分化的細胞則不能形成集落。HL一60細胞是一種急性早幼粒細胞白血病細胞，在體外無需加刺激因子，可在軟瓊脂培養基中形成集落。二甲基亞砜是一種細胞分化誘導劑，經二甲基亞砜處理后的HL一60細胞按粒系途徑定向成熟分化，同時細胞的增殖力降低，幾乎全部細胞喪失了軟瓊脂中形成集落的能力。因此，這種方法可用于細胞分化的基礎研究和臨床腫瘤治療的療效檢驗等方面。 二、操作 1．收集對數生長期的HL一60細胞，先按實驗十三測定細胞活力，然后調整細胞濃度，制成300～1000活細胞／ml的細胞懸液。 2．取二個培養瓶每個瓶中加9ml調整好濃度的細胞懸液，然后各加入1ml3％瓊脂(已融化，......閱讀全文
腫瘤細胞的軟瓊脂集落培養和測定
?一、原理??? 在體外培養基中由一個祖先細胞增殖形成的細胞團，稱之為集落。腫瘤細胞能無限繁殖，所以具有這種能力，而成熟分化的細胞則不能形成集落。HL一60細胞是一種急性早幼粒細胞白血病細胞，在體外無需加刺激因子，可在軟瓊脂培養基中形成集落。二甲基亞砜是一種細胞分化誘導劑，經二甲基亞砜處理后的HL一
腫瘤細胞的軟瓊脂集落培養實驗
腫瘤細胞的軟瓊脂集落培養實驗可用于：（1）細胞分化的基礎研究；（2）臨床腫瘤治療的療效檢驗等方面。實驗方法原理在體外培養基中由一個祖先細胞增殖形成的細胞團，稱之為集落。腫瘤細胞能無限繁殖，所以具有這種能力，而成熟分化的細胞則不能形成集落。HL-60細胞是一種急性早幼粒細胞白血病細胞，在體外無需加刺激
腫瘤細胞的軟瓊脂集落培養實驗
腫瘤細胞的軟瓊脂集落培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在體外培養基中由一個祖先細胞增殖形成的細胞團，稱之為集落。腫瘤細胞能無限繁殖，所以具有這種能力，而成熟分化的細胞則
腫瘤細胞的軟瓊脂集落培養實驗
在體外培養基中由一個祖先細胞增殖形成的細胞團，稱之為集落。腫瘤細胞能無限繁殖，所以具有這種能力，而成熟分化的細胞則不能形成集落。實驗方法基本方案 實驗方法原理 HL-60細胞是一種急性早幼粒細胞白血病細胞，在體外無需加刺激因子，可在軟瓊脂培養基中形成集落。二甲基亞砜是一種細胞分化誘導劑，經二甲基亞砜
腫瘤細胞的軟瓊脂集落培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在體外培養基中由一個祖先細胞增殖形成的細胞團，稱之為集落。腫瘤細胞能無限繁殖，所以具有這種能力，而成熟分化的細胞則不能形成集落。HL-60細胞是一種急性早幼粒細胞白血病細胞，在體外無需加刺激因子，可在軟瓊脂培養基中形成集落。二甲
軟瓊脂培養的概念和原理
I.Macpherson等于1964年首創的培養法，這一培養法選擇性地使已轉化的細胞進行增殖，而抑制正常細胞的增殖。通常是將含有0.5%瓊脂的培養基作為營養層鋪在底部，然后再將含有細胞的少量軟瓊脂培養基（瓊脂量約0.3%）倒在上面。正常細胞仍停留在接種時的狀態，幾乎不進行增殖，但已轉化的細胞則以半浮
細胞集落形成實驗
實驗十四 細胞集落形成實驗非整倍體無限細胞系和癌細胞株中，仍然存在不同細胞亞群，它們的功能和生長特點有些差異，其中有些亞群細胞對培養環境有較大的適應性和具有較強的獨立生存能力，細胞集落率高。純化細胞群來自一個共同的祖細胞，細胞遺傳性狀、生物學特性相似，利于實驗研究。原代培養細胞和二倍體有限細胞系，細
細胞集落形成實驗
實驗概要非整倍體無限細胞系和癌細胞株中，仍然存在不同細胞亞群，它們的功能和生長特點有些差異，其中有些亞群細胞對培養環境有較大的適應性和具有較強的獨立生存能力，細胞集落率高。純化細胞群來自一個共同的祖細胞，細胞遺傳性狀、生物學特性相似，利于實驗研究。原代培養細胞和二倍體有限細胞系，細胞集落率很低。細胞
細胞集落形成
細胞集落形成 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞集落形成實驗是檢測培養細胞增殖能力的有效方法之一。由于它是通過檢驗活細胞的增殖能力，因此避免了在生長曲線繪制時將死細胞或不能再
細胞集落形成
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞集落形成實驗是檢測培養細胞增殖能力的有效方法之一。由于它是通過檢驗活細胞的增殖能力，因此避免了在生長曲線繪制時將死細胞或不能再分裂細胞計數在內而導致的實驗結果誤差。? ??細胞集落形成實驗的原理是單個細胞在體外持續增殖6代以
細胞集落形成
實驗方法原理細胞集落形成實驗是檢測培養細胞增殖能力的有效方法之一。由于它是通過檢驗活細胞的增殖能力，因此避免了在生長曲線繪制時將死細胞或不能再分裂細胞計數在內而導致的實驗結果誤差。? ??細胞集落形成實驗的原理是單個細胞在體外持續增殖6代以上，其后代形成一個細胞群體，稱為集落(colony)。每個克
造血祖細胞的集落培養
1、集落的種類：不同細胞來源的集落其形態和大小均有所不同. 2、各種集落的培養步驟： 各種造血細胞集落的培養條件有所不同，但其培養過程大致相似，操作步驟大致如下。 分離所要培養的細胞，制成單個核細胞懸液。 配制相應的培養體系。按比例將細胞因子、營養素以及血清等加入到培養 基中形成特有
軟瓊脂法
軟瓊脂法是一種克隆化的方法。克隆化是指使單個細胞無性繁殖而獲得該細胞團體的整個培養過程。
軟瓊脂克隆形成實驗
軟瓊脂克隆形成實驗可用于：（1）細胞分化的基礎研究；（2）臨床腫瘤治療的療效檢驗等方面。實驗方法原理軟瓊脂克隆形成實驗主要用于非貼壁生長的細胞，某些細胞(如正常成纖維細胞)在懸浮狀態下不能增殖，不適用此法。某些惡性腫瘤細胞，不僅在貼壁狀態下能增殖，在懸浮狀態下也能增殖，其在軟瓊脂中形成克隆的能力反映
ES細胞分化培養實驗——培養皿ES細胞集落
實驗材料ES 細胞單一胚胎樣體儀器、耗材細菌培養皿ES 分化培養基實驗步驟1. 準備下列試劑和材料：懸滴培養的 ES 細胞單一胚胎樣體100 mm 細菌培養皿ES 分化培養基2. 在 100 mm 細菌培養皿中加 10 ml 預熱的分化培養基。3. 從溫箱中取出培養 2 天的懸滴培養物。小心翻轉培養
軟瓊脂克隆形成實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 軟瓊脂克隆形成實驗主要用于非貼壁生長的細胞，某些細胞(如正常成纖維細胞)在懸浮狀態下不能增殖，不適用此法。某些惡性腫瘤細胞，不僅在貼壁狀態下能增殖，在懸浮狀態下也能增殖，其在軟瓊脂中形成克隆的能力反映了其惡性程度。
軟瓊脂克隆形成實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 軟瓊脂克隆形成實驗主要用于非貼壁生長的細胞，某些細胞(如正常成纖維細胞)在懸浮狀態下不能增殖，不適用此法。某些惡性腫瘤細胞，不僅在貼壁狀態下能增殖，在懸浮狀態下也能增殖，其在軟瓊脂中形成克隆的能力反映了其惡性程度。
軟瓊脂克隆化的方法
軟瓊脂克隆化借助撒在軟瓊脂上單個細胞定位生長，而達到克隆化，具體操作如下：1．配2.5%的瓊脂糖30ml，水浴溶化后，移入45℃水浴中。2．將117ml完全DMEM液和3ml10倍濃度的DMEM液混合，置45℃水浴預熱。3．將瓊脂糖與DMEM液混合，即為含0.5%瓊脂糖的完全DMEM液，并加75×1
軟瓊脂克隆形成實驗
原理：細胞接種存活率只表示接種細胞后貼壁的細胞數，但貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆。而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。由于細胞生物學性狀不同，細胞克隆形成率差別也很大，一般初代培養細胞克隆形成率弱，傳代細胞系強；二倍體細胞克隆形
軟瓊脂克隆形成實驗
原理：細胞接種存活率只表示接種細胞后貼壁的細胞數，但貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆。而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。由于細胞生物學性狀不同，細胞克隆形成率差別也很大，一般初代培養細胞克隆形成率弱，傳代細胞系強；二倍體細胞克隆形
軟瓊脂克隆形成實驗
原理：細胞接種存活率只表示接種細胞后貼壁的細胞數，但貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆。而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。由于細胞生物學性狀不同，細胞克隆形成率差別也很大，一般初代培養細胞克隆形成率弱，傳代細胞系強；二倍體細胞克隆形
集落培養時細胞接種密度該怎么算
表述得有點亂……你是說從原細胞懸液中取出一點，稀釋成總體積為300微升，含細胞量是2X10^5個，平均分成兩份，到兩個培養皿中培養么？如果是這樣的話，先把母液稀釋10000倍，細胞密度就是25.8X10^5。2X10^5/25.8X10^5=0.07752。從稀釋液中取77.52微升，鹽水補齊至30
集落培養時細胞接種密度該怎么算
表述得有點亂……你是說從原細胞懸液中取出一點，稀釋成總體積為300微升，含細胞量是2X10^5個，平均分成兩份，到兩個培養皿中培養么？如果是這樣的話，先把母液稀釋10000倍，細胞密度就是25.8X10^5。2X10^5/25.8X10^5=0.07752。從稀釋液中取77.52微升，鹽水補齊至30
組織培養腫瘤細胞生物學特性和腫瘤細胞細胞系的培養2
2．培養基： 腫瘤細胞對培養基的要求不如正常細胞嚴格，一般常用的 RPMIl640、 ?DMEM、Mc-Coy5A等培養基等皆可用于腫瘤細胞培養。腫瘤細胞對血清的需求比正常細胞低，正常細胞培養不加血清不能生長，腫瘤細胞在低血清培養基中也能生長。腫瘤細胞對培養環境適應性較大，是因腫瘤細胞有自泌（Aut
組織培養腫瘤細胞生物學特性和腫瘤細胞細胞系的培養3
5．其它方法：有人發現聚丙烯酰胺有抑制成纖維細胞生長的作用；也有人用聚蔗糖制備成比重1.025～1.085的密度梯度離心液，加入細胞懸液后，在 23℃中800g離心 10分種。在比重1.025～1.050層為成纖維細胞，在比重1.050～1.085層為上皮細胞，再經過分離進行培養。最近也有人
組織培養腫瘤細胞生物學特性和腫瘤細胞細胞系的培養1
腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置，首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。 一、組織培養腫瘤細胞生物學特性 腫瘤
腫瘤細胞的培養（四）
四、提高腫瘤細胞培養存活率和生長率措施 根據人們的經驗，腫瘤細胞在體外不易培養，建立能傳代的腫瘤細胞系更為困難。當腫瘤組織或細胞初代接種培養后，常出現以下幾種情況： 完全無細胞游出或移動； 有細胞移動和游出，但無細胞增殖，細胞長時間處于停滯狀態以致難以傳代； 有細胞增殖，傳若干代后停止生長或衰退死亡
腫瘤細胞的培養（二）
二、培養方法 腫瘤細胞培養成功關鍵在于：取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面，腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養并無原則差別，初代培養應用組織塊和消化培養法均可。 1．取材： 人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要，體積較大的腫瘤組織中有退變或壞
腫瘤細胞的培養（一）
腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置，首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。 一、組織培養腫瘤細胞生物學特性 腫瘤細胞與體
腫瘤細胞的培養（三）
三、成纖維細胞排除法 1．機械刮除法： 是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭（用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲）、或裹少許脫脂棉制成，裝入試管中高壓滅菌后備用（也可用特制電熱燒灼器刮除）。刮除程序為： （1）標記：鏡下觀察，用不脫色筆在培養瓶皿的背面圈下生長腫瘤細胞的部位； （2）刮除：棄掉培養液，把無菌膠刮伸