動脈的基因轉移實驗——用外科方法將基因轉入到頸動脈
實驗材料成年 C57B1 6 小鼠編碼重組基因的重組病毒或非病毒載體溶液試劑、試劑盒氯胺酮甲苯噻嗪普通鹽水乳酸鹽保護液M-199培養基恩氟沙星25 和 33G 注射器儀器、耗材外科顯微切割顯微鏡外科手術刀片Agricola顯微切割牽引機便攜灼燒裝置26mm 直的微血管夾毛細血管磁夾6- 0絲縫合顯微注射器顯微切割剪硅酮插入導管Nexabond 經典皮膚復合系統溫暖的小鼠籠實驗步驟1.用 25 G 的注射器通過肌肉注射麻醉一只成年的 C57B1/6 小鼠,每千克 80 mg 氯胺酮和 12 mg 甲苯噻嗪。準備好將小鼠蓋上布單,將小鼠仰臥放置在顯微切割顯微鏡下確保能看得足夠清楚。2.在前部靠頸部的正中位置做一條線,用一把 15 號的手術刀從環狀軟骨切開一直切到垂管。切開 strap 肌肉并用 Agricola 顯微切割拉伸機橫向拉開。通過這樣的切割,用鈍圓的解剖方法將動脈管分開,保護迷走神經和喉部的回歸神經。3.電凝小的旁邊的分支......閱讀全文
基因轉移的轉移步驟
(1)配制下列溶液①2×HEPES-緩沖鹽溶液(HBS)②2mol/L CaCl2③0.1×TE(pH8.0)用0.22μm濾器過濾除菌,分裝貯存于4℃。④DNA:將DNA(約20μg/106細胞)溶于0.1×TE(pH8.0),使用濃度為40μg/ml。為使轉化效率達到最高,質粒DNA應用CsCl
基因轉移的轉移步驟
(1)配制下列溶液①2×HEPES-緩沖鹽溶液(HBS)②2mol/L CaCl2③0.1×TE(pH8.0)用0.22μm濾器過濾除菌,分裝貯存于4℃。④DNA:將DNA(約20μg/106細胞)溶于0.1×TE(pH8.0),使用濃度為40μg/ml。為使轉化效率達到最高,質粒DNA應用CsCl
基因轉移的轉移步驟
(1)配制下列溶液①2×HEPES-緩沖鹽溶液(HBS)②2mol/L CaCl2③0.1×TE(pH8.0)用0.22μm濾器過濾除菌,分裝貯存于4℃。④DNA:將DNA(約20μg/106細胞)溶于0.1×TE(pH8.0),使用濃度為40μg/ml。為使轉化效率達到最高,質粒DNA應用CsCl
將基因轉移至未分化ES細胞實驗—將ES克隆挑取到96孔板
儀器、耗材ES 生長培養基neoR-MEF 滋養板96 孔 U-底板無菌吸頭微量移液器實驗步驟1. 準備下列試劑和材料:ES 生長培養基,含 300 μg/ml G418 和青霉素/鏈霉素96 孔平底 neoR-MEF 滋養板96 孔 U-底板細而圓的無菌吸頭微量移液器(10~100 μl)8 道移
挺轉派力證轉基因安全:吃豬肉不會轉入豬基因
2004年10月有“農業諾貝爾”之稱的世界糧食獎授予中國水稻育種家袁隆平,以表彰他在雜交水稻育種方面的巨大貢獻。9年之后,2013年的世界糧食獎頒給了在植物轉基因技術方面的三位先驅,三位獲獎者在1983年幾乎同時研發出了世界上最早的轉基因植物,并在今后的三十年中,不斷發展和推進了轉基因技術。
基因轉移的步驟
(1)配制下列溶液 ①2×HEPES-緩沖鹽溶液(HBS) ②2mol/L CaCl2 ③0.1×TE(pH8.0)用0.22μm濾器過濾除菌,分裝貯存于4℃。 ④DNA:將DNA(約20μg/106細胞)溶于0.1×TE(pH8.0),使用濃度為40μg/ml。為使轉化效率達到最高,質
基因轉移的簡介
最常用的將克隆重組的DNA片段導入哺乳動物細胞的方法是用磷酸鈣介導的轉染。轉染的DNA可能是通過吞飲作用進入細胞質,然后進入細胞核。
基因轉移的定義
基因轉移指應用物理、 化學或生物學方法將目的基因轉移入受體細胞內的過程。基因轉移技術在基因工程、生物醫學研究、基因治療、植物農作物品種改 造等領域被廣泛應用。通過基因轉移將遺傳信息從一個基因組向另一個基因組轉移,使 轉移的遺傳信息在受者生物表達。
基因轉移的簡介
最常用的將克隆重組的DNA片段導入哺乳動物細胞的方法是用磷酸鈣介導的轉染。轉染的DNA可能是通過吞飲作用進入細胞質,然后進入細胞核。
基因轉移技術
基因轉移技術分為兩類:第一類是將目的基因轉導入體外培養的細胞或導入從體內取出的細胞,觀察目的基因在細胞中的表達,這項技術稱基因轉染(gene transfection)技術。通常情況下,該技術轉入的目的基因不與細胞染色體發生整合,而是在細胞質呈現暫時性表達,隨時間推移而逐漸減弱或消失。第二類是將
頸動脈支架植入術在頸動脈疾病應用研究
頸動脈支架植入術可以減少卒中或其他頸動脈疾病不良事件,如頸動脈內膜剝離的發生,治療方案需要根據不同病人的個體情況而定。一項新的研究表明,可根據頸動脈支架植入術(CAS)病人的個人信息及特征,預測病人是否有術后卒中或死亡的風險。 支架植入術和血管成形術保護有高風險動脈內膜切除術的患者(Stent
基因轉移技術的原理和方法簡介
基因轉移技術是一種將外源基因以在體(in vivo)或離體(in vitro)的方式導入到靶細胞核內的技術, 屬于基因工程技術(亦稱重組DNA?技術)的一個重要組成部分。基因工程技術以分子生物學等學科發展為基礎, 使人類擁有了構造生物遺傳物質新組合的能力。對在體方式而言, 基因轉移技術需要跨越細胞外
哈醫大基因檢測中心將投用
記者從哈醫大獲悉,經過一年的籌建,配有國際一流設備的哈醫大一院基因檢測中心即將投入使用。該技術平臺的成功搭建使哈醫大基因組醫學研究加入到了國際行列,并成為國內基因組醫學研究的領航者。 據介紹,該基因檢測中心引進的核心設備是SOLiDTM系統,是目前國際上最先進的基因分析儀。與傳統的第
頸動脈狹窄的病因分析
多種原因可導致頸動脈狹窄,不同病因導致頸動脈狹窄的特點亦不相同。 動脈粥樣硬化 動脈粥樣硬化是導致中、老年患者頸動脈狹窄最常見的病因。患者常常伴有高血壓、糖尿病、高脂血癥、肥胖、吸煙等其他易導致心腦血管損害的危險因素。動脈粥樣硬化是由于脂質物質在血管壁上堆積,而血管壁內的巨噬細胞吞噬脂質物質
頸動脈狹窄臨床路徑
? 一、頸動脈狹窄臨床路徑標準住院流程??? (一)適用對象。??? 第一診斷為頸內動脈狹窄或頸總動脈狹窄(ICD-10:I65.201I65.202I63.201I63.202)。??? (二)診斷依據。??? 根據《臨床診療指南-神經病學分冊》(中華醫學會編著,人民衛生出版社),《中國缺血性腦卒
頸動脈蹼病例報告
頸動脈蹼(carotid?web)是位于頸動脈球部后壁頸動脈分叉處遠端的腔內薄層突出物。由于其發病率低,國內病例報道少,容易造成漏診及誤診。現報道1例頸動脈蹼患者,并復習相關文獻,對其臨床特點進行探討,以期提高臨床及影像醫生對本病的認識。?1.臨床資料?患者,男,69歲,因“雙下肢乏力3月”于201
頸動脈竇綜合征的治療方法介紹
1、一般措施 避免刺激頸動脈竇,平時應保持情緒穩定及禁止穿衣領較高較緊的衣服。發作時立即將患者置于平臥位。 2、藥物治療 (1)硫酸阿托品 硫酸阿托品口服,或皮下注射,部分患者可有效地預防發作。 (2)麻黃素、硫酸麻黃堿 麻黃素、硫酸麻黃堿肌內注射或口服。 (3)苯巴比妥 苯巴比妥口服
將基因轉移至未分化ES細胞實驗—融化96孔板上的細胞
儀器、耗材ES 細胞凍存板MEF 滋養板塑料盒ES 生長培養基微量移液器實驗步驟1. 準備下列試劑和材料:96 孔 ES 細胞凍存板24 孔 MEF 滋養板塑料盒ES 生長培養基微量移液器2. 在塑料盒內裝入無菌水,置溫箱中預熱。3. 從 -80℃ 冰箱中取出 96 孔 ES 細胞板。4. 欲融化的
在果蠅體內發現了最大的細菌到動物的基因轉移
果蠅的基因組不僅僅是由果蠅的DNA組成的——至少對一種果蠅來說是這樣。馬里蘭大學醫學院(UMSOM)基因組科學研究所(IGS)的一項新研究表明,一種果蠅含有一種細菌的全部基因組,使這一發現成為迄今為止發現的最大的細菌向動物遺傳物質轉移。這項新研究還闡明了這是如何發生的。在UMSOM和IGS的微生物學
哺乳類動物的基因轉移方法
哺乳類動物基因轉移方法,是將改建后的目的基因(或基因組片段)用顯微注射等方法注入實驗動物的受精卵(或著床前的胚胎細胞),然后將此受精卵(或著床前的胚胎細胞)再植入受體動物的輸卵管(或子宮)中,使其發育成攜帶有外源基因的轉基因動物。?根據外源基因導入的方法和對象的不同,制作轉基因動物的方法主要有顯微注
袁隆平:轉基因是發展方向正研究把玉米基因轉入水稻
袁隆平(資料圖)。 有“雜交水稻之父”之稱的著名農學家袁隆平近日在接受媒體采訪時談到對轉基因的看法,他認為轉基因也是今后的發展方向,同時透露他也正在進行轉基因水稻的相關研究。 袁隆平用濃重的湖南口音一字一頓地說,“轉基因不能一概而論”。他認為,轉基因是今后的發展方向。 袁隆平認
基因轉移技術的簡介
基因轉移技術是一種將外源基因以在體(in vivo)或離體(in vitro)的方式導入到靶細胞核內的技術, 屬于基因工程技術(亦稱重組DNA?技術)的一個重要組成部分。基因工程技術以分子生物學等學科發展為基礎, 使人類擁有了構造生物遺傳物質新組合的能力。對在體方式而言, 基因轉移技術需要跨越細胞外
基因轉移技術的概念
基因轉移指應用物理、 化學或生物學方法將目的基因轉移入受體細胞內的過程。基因轉移技術在基因工程、生物醫學研究、基因治療、植物農作物品種改 造等領域被廣泛應用。通過基因轉移將遺傳信息從一個基因組向另一個基因組轉移,使 轉移的遺傳信息在受者生物表達。
基因轉移的應用特點
基因轉移指應用物理、 化學或生物學方法將目的基因轉移入受體細胞內的過程。基因轉移技術在基因工程、生物醫學研究、基因治療、植物農作物品種改 造等領域被廣泛應用。通過基因轉移將遺傳信息從一個基因組向另一個基因組轉移,使 轉移的遺傳信息在受者生物表達。
基因轉移技術的缺陷
①載體的滴度較低;②是輔助病毒與載體病毒重組重新獲得包裝信號使病人面臨感染輔助病毒的危險性;③此載體只能整合至分裂相細胞;④此載體容納的外源基因量較少,不利于較大的基因的插入。因此,人們在努力改造包裝細胞系使其日趨完善,并廣泛用于體外及體內的基因治療中。在體外治療中,為了增強腫瘤病人骨髓細胞對化療藥
腫瘤轉移基因的簡介
腫瘤轉移基因(tumor metastatic genes)是指某基因改變和表達能夠促進或導致腫瘤轉移的基因。主要指一些編碼細胞表面受體的基因,它們的突變或失活會導致細胞粘附能力的下降,促使腫瘤的發生和轉移,因此稱這類基因為腫瘤轉移基因!
中國科學家成功將人類腦基因插入到獼猴基因組中
近日,《National Science Review》刊登了來自中國科學院昆明動物研究所的科學家,通過將參與大腦生長的人類基因插入到猴子的基因組中,制造出了多個轉基因獼猴的實驗。在文章中,研究人員描述了他們如何在獼猴出生后對其進行相關的實驗。圖片來源于網絡 如今生物學家開始在人類機體中利用基
病毒介導基因轉移
病毒介導基因轉移:前述的化學和物理方法都是通過傳染方式基因轉移。病毒介導基因轉移(viral mediatedgene transfer)是通過轉換方式完成基因轉移,即以病毒為載體(vector),將外源目的基因通過基因重組技術,將其組裝于病毒上,讓這種重組病毒去感染受體宿主細胞,這種病毒稱為病毒運
基因分離克隆用什么方法
蛋白組是指細胞內全部蛋白的存在及活動方式,即基因組表達產生的總蛋白質的統稱。功能蛋白質組指那些可能涉及到特定功能機理的蛋白質群體。主要研究方法為蛋白質雙向電泳。通過高效液相色譜、質普對蛋白質序列進行分析,在借用分子生物學的手段則可以進行目的基因的分離。如:應用PCR進行分離目的基因:通過對蛋白質的序