植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_組織離析法
實驗方法原理用一些化學藥品配成離析液,便組織細胞的胞間層溶解,細胞彼此分離,獲得分散的、單個的完整細胞,以便觀察不同組織的細胞形態和特征。經離析制備的材料可制作臨時裝片觀察,也可制成永久玻片標本長期便用。實驗材料植物組織試劑、試劑盒離析液儀器、耗材玻片鑷子實驗步驟1 鉻酸-硝酸離析法適用于木質化的組織,如導管、管胞、纖維等。離析液由 10%鉻酸和 10%硝酸等量混合而成。具體步驟是將植物材料(如木材、枝條、果殼等)先切成火柴棒粗細、長約 1cm 的小條或小塊,放人小玻璃管中,加人離析液,其量約為材料的 20 倍,將口蓋嚴塞緊,放在30-40℃的溫箱中,經 1-2d。具體浸漬的時間可因材料塊的大小而不同,如果兩天以后仍未分離,則可換新的離析液繼續浸漬。草本植物可不必加溫。檢查材料是否離析:以細胞間的胞間層溶解、細胞彼此能夠分開為宜。可取出材料少許放在載玻片上的水滴中,加蓋破片,用滴管的橡皮頭輕輕敲壓,若材料分離,表示浸漬時間已夠。......閱讀全文
植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_組織離析法
實驗方法原理用一些化學藥品配成離析液,便組織細胞的胞間層溶解,細胞彼此分離,獲得分散的、單個的完整細胞,以便觀察不同組織的細胞形態和特征。經離析制備的材料可制作臨時裝片觀察,也可制成永久玻片標本長期便用。實驗材料植物組織試劑、試劑盒離析液儀器、耗材玻片鑷子實驗步驟1 鉻酸-硝酸離析法適用于木質化的組
植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_壓片法
實驗方法原理將植物的幼嫩器官如根尖、莖尖和幼葉等經過處理后,被涂抹或壓在載玻片上,使組織成一薄層然后進行觀察的制片方法。染色后可做臨時的觀察標本,也可以經過脫水、透明等步驟制成永久的玻片標本。實驗材料植物的幼嫩器官如根尖、莖尖和幼葉試劑、試劑盒酒精儀器、耗材玻片鑷子實驗步驟1 幼根的培養取洋蔥或大蒜
植物組織化學顯微鏡標本片制作方法
實驗方法原理 臨時裝片法是將實驗材料(徒手切片、表皮或一些低等植物等小型實驗材料)放置于載玻片上的水滴中,然后加蓋蓋玻片制作成的玻片標本。其優點是可以保留材料的生活狀態和天然色澤,一般多作為臨時觀察或用某些化學試劑做組織化學反應。也可選擇適宜染料染色,制作成永久制片。實驗材料 徒手切片、表皮或一些低
植物組織化學顯微鏡標本片制作方法
實驗方法原理: ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 臨時裝片法是將實驗材料(徒手切片、表皮或一些低等植物等小型實驗材料)放置于載玻片上的水滴中,然后加蓋蓋玻片制作成的玻片標本。其優點是可以保留材料的生活狀態和天然色
植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_石蠟切片法
實驗方法原理石蠟切片技術是顯微技術上最重要最常用的一種方法。其優點在于①應用范圍廣,幾乎適用于所有的植物材料;②能將材料切成厚薄均一的切片,較清楚地顯現細胞、組織的細微結構;③能切成連續蠟帶,可觀察細胞和組織的動態發生及層次變化過程;④切片可以長期保存,便于以后觀察比較。缺點是:操作程序比較復雜,需
植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_徒手切片法
實驗方法原理徒手切片法是指手拿刀片,將新鮮材料或預先固定好的材料切成薄片,不經染色或經簡單染色,制成水裝片后進行臨時觀察,必要時經鏡檢后可選擇好的薄片經過脫水與染色等制片步驟,制成永久玻片標本供長期使用。此方法的優點是不需要復雜的設備,方法簡使,制片迅速,而且能觀察到植物組織的天然色澤和活體結構,常
植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_臨時裝片法
實驗方法原理臨時裝片法是將實驗材料(徒手切片、表皮或一些低等植物等小型實驗材料)放置于載玻片上的水滴中,然后加蓋蓋玻片制作成的玻片標本。其優點是可以保留材料的生活狀態和天然色澤,一般多作為臨時觀察或用某些化學試劑做組織化學反應。也可選擇適宜染料染色,制作成永久制片。實驗材料徒手切片、表皮或一些低等植
植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_顯微化學方法
實驗方法原理植物解剖學中,利用新鮮材料與染色或化學反應方法柜結合,一方面用來確定梢物細胞壁或內含物的化學性質,另一方面用來分辨細胞的結構。顯微化學試驗可先用徒手切片法將材料切成薄片,一般應稍厚,大約在 20-40μm 之間,如杲太薄,有時因為所要觀察的內容物太少,反而不易清楚地顯示結果。實驗材料植物
植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_超薄切片技術
實驗材料植物組織試劑、試劑盒包埋劑儀器、耗材切片機實驗步驟1 取材:用于固定的材料要求切割成 1mm3而大小的小塊。太大固定液不易透入,造成材料內外固定不均;太小則材料受損傷的比率增高。取材時應注意:由于取材時要求切的組織塊很小,組織受損傷的比例相當大,這無疑會引起細胞代謝的巨大變化,因此,切取后的
物組織化學顯微鏡標本片制作方法_整體封藏法
實驗方法原理將小而扁平的檢物材料全部封藏起來,所以用此法制作的玻片標本可顯示出植物或植物某部分器官的整體。這種方法適用于微小或扁平的材料,例如絲狀或葉狀的藻類、菌類蕨類的原葉體抱子襄、纖小的苔鮮植物,以及被于植物的表皮、花粉粒、幼胚等幼小的器官。可以制成臨時裝片,也可以制成水久制片。實驗材料檢物材料
鉻酸-硝酸離析法
鉻酸-硝酸離析法為了觀察一個細胞完整的立體形態結構,可以用一些化學藥品把細壁中的中層物質(果膠質)溶解,使細胞分離散開,便于觀察。離析前先把材料洗凈,用刀切成1-2 毫米寬的狹條(如葉片)或切成火柴棍粗細的長約1厘米的小條(如根或莖)。然后把切好的材料放進小玻璃瓶中,加入離析液(加入量約為材料的20
激光掃描共聚焦顯微鏡在組織化學免疫組織化學中的應用
激光掃描共聚焦顯微鏡(laser scanning confcal microscope,LSCM)是激光、電子攝像和計算機圖像處理等現代高科技手段相互滲透的產物。由于其高分辨率,高靈敏度及高放大率等特點,在細胞水平上能作多種功能測量和分析,如熒光定量測量、共聚焦圖像分析、三維圖像重建、活細胞動力學
免疫金組織化學染色實驗——IGSS-法
實驗方法原理免疫金銀染色(immunogold silver staining;IGSS)的基本原理是通過免疫反應沉積在抗原位置的膠體金顆粒起著一種催化劑作用,用對苯二酚還原劑將銀離子(Ag+)還原成銀原子(Ag),被還原的銀原子圍繞金顆粒形成一個「銀殼」,「銀殼」一旦形成本身亦具有催化作用,從而使
免疫金組織化學染色實驗——CIGSS-法
實驗方法原理彩色免疫金銀染色方法(coloured IGSS,CIGSS)是由 Frite 和 Hoenes 等(1986)建立的一種新方法,劉彥仿等1988)在《中華病理學雜志》上也報道了改進后的 CIGSS 方法。其基本原理是在 IGSS 法的基礎上,根據洗彩色照片的顯影原理而發展起來的,即 I
親和免疫組織化學實驗——LSAB-法
實驗方法原理LSAB 法或稱 S-P 法、SABC 法,它是采用生物素標記的第二抗體與結合有 HRP 或 AKP 酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質,相對分子質量 60000,不含糖鏈,等電點 pI 為 6.0~6.5
親和免疫組織化學實驗——ABC-法
實驗方法原理ABC 法即親和素-生物素-過氧化物酶復合物法,是許世明于 1981 年在 BAB 法和 LAB 法的基礎上改良的,其特點是利用親和素分別連接生物素標記的第二抗體和生物素標記的酶。ABC 法與 LAB 法、BAB 法不同的是第一抗體不為生物素所標記,生物素標記的第二抗體與 ABC 復合物
親和免疫組織化學實驗——-CSA法
實驗方法原理催化信號放大系統(catalyzed signal amplification system,CSA),也稱釀胺信號放大(tyramine signal amplification system,TSA)或稱 CARD(catalyzed repoter deposition)。該方法的
脂類組織化學與酶組織化學
脂類(lipid)是構成細胞?結構的成分之一,可分為脂肪(fat)和類脂(1ipoid)兩大類。脂肪系指甘油三酯,以脂滴形式存在于細胞質內。類脂是一些與脂肪酸結合可形成酯的物質,包括膽固醇、固醇酯、磷脂和糖脂等。在組織化學上,根據染色性質不同可把脂類分為酸性脂類和中性脂類。酸性脂類包括脂肪酸和磷脂等
常用免疫組織化學方法的原理免疫酶標方法
免疫酶標方法是繼免疫熒光后,于60年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是最常用的技術。本方法與免疫熒光技術相比的主要優點是:定位準確,
免疫金組織化學染色實驗——雙-PAG-法
實驗方法原理免疫金銀染色方法敏感、簡便、省時、安全可靠,葡萄球菌 A 蛋白(SPA)金標記四步法是在此基礎上發展起來的更為敏感的一種新方法。SPA 和許多哺乳類動物 IgG 具有親和性,且它們之間的連接不會干擾抗原-抗體的結合。簡單的 SPA 金標記二步法后,第三步用抗 SPA 與 SPA 金表面分
小鼠腦片免疫組織化學(ABC法)實驗
實驗方法原理 通過特異的抗原抗體反應標記上可見的顯示物系統來檢查細胞及組織上原位抗原或抗體成分的方法。在光學顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其性質定位,還可以利用細胞分光光度計、圖像分析儀、共聚焦顯微鏡等進行細胞原位半定量測定。免疫組織化學的顯著特點是特異性強。實驗材料 冷凍切片試劑、試劑盒 一
親和免疫組織化學實驗——改進-CSA法
實驗方法原理已有的研究結果證實,CSA 法較 LSAB 法敏感 500~1000 倍,較 EnVision 法敏感 20~100 倍。其對細胞周期素等核內抗原的定位,有獨特的優點,定位準確性、敏感性、穩定性要較標準的 CSA 法好,其敏感性和穿透性要好于 EnVision 法。最近,Hasui K
免疫組織化學染色方法(SP法)
免疫細胞化學(immunocytochemistry)是根據免疫學原理,利用抗體同特定抗原專一結合,對抗原進行定位測定的技術。抗原主要為大分子或與大分子相結合的小分子;抗體則是由漿細胞針對特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果將抗體結合上標記物,再與組織中的抗原發生反應,即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗原存在于
親和組織化學染色方法之凝集素法
①直接法:將標志物直接結合在凝集素上,使其與組織細胞相應的糖蛋白或糖脂相結合; ②間接法:先將凝集素與組織細胞膜糖基結合,然后再用標記的抗凝集素抗體(即用凝集素免疫動物制備抗凝集素抗體)與結合在細胞上的凝集素反應。間接法還有糖-凝集素-糖法,該方法是利用生物細胞膜的特殊糖基與凝集素結合后,再用
石蠟制片法(用于免疫組織化學,HE染色)
?石蠟制片法是將材料經固定、脫水、透明、浸蠟后包埋在石蠟里面進行切片的方法。此法適用范圍,制片手段完備,能將材料切成極薄的片子(可切至2-8微米左右),并能制成連續的片子,這是其它制片法難以達到的,因此在光學顯微鏡的制片技術上它是最常用的一種方法。除了一些經不住石蠟切片法中所應用的各種藥劑處理的材料
非標記抗體免疫酶組織化學實驗——PAP-法
實驗方法原理與酶橋法相似,不同的是酶橋法分四步,而 PAP 法分三步。PAP 法將酶橋法的步驟(3)、步驟(4)合二并為一,用 PAP 復合物替代,故稱 PAP 法(圖 4-9)。PAP 復合物中的抗 HRP 抗體和第一抗體必須為同一種屬動物的 IgG,這樣橋抗體才能作為「橋」將 PAP 復合物連接
非標記抗體免疫酶組織化學實驗——ABPAP-法
實驗方法原理ABPAP 法是 PAP 法和 ABC 法的聯合應用,使更多的酶分子結合到抗原-抗體復合物上,目的就是增加方法的敏感性。其原理見圖 4-11。作者應用了 30 余種特異性一抗、鼠源性和兔源性 PAP 復合物以及 ABC 檢測系統,結果 ABPAP 法比單一的 PAP 法要敏感 7~8 倍
什么是“組織化學”
組織化學是指以常用的組織化學技術,對細胞內主要化學成分和活性的粗略(一般性)的研究.概要介紹如下:一,______ 核酸(DNA和RNA)(一)__ 化學特性1.分布: DNA (細胞核內)RNA(核仁10% ;細胞質-核糖體90%)2. 分子結構:戊糖 + 磷酸 + 堿基特點:① 大量的磷酸基團→
免疫組織化學
· ????????Double Peroxidase (HRP) Immunohistochemical Labeling of Trypsin-Sensitive Antigens?(KPL)·?????????Immunohistochemistry?(Tyner lab)This is a
免疫組織化學
實驗概要免疫組化流程實驗步驟?第一天:1、組織切片置于60℃烘烤1hr2、二甲苯1、2 分別浸泡15min,脫蠟3、水化:100% Etoh 10min X 295% Etoh 5min X 185% Etoh 5min X 170% Etoh 5min X 1注:以下步驟切勿讓組織處于干燥狀態!4